| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-18页 |
| 文献综述 | 第18-32页 |
| 第一章 绒山羊毛囊生物学及其内部关键细胞系研究进展 | 第18-32页 |
| 1.1 毛囊发育基本规律及相关机制 | 第18-23页 |
| 1.1.1 毛囊的形态发生 | 第19-21页 |
| 1.1.2 毛囊的周期性再生 | 第21-23页 |
| 1.2 毛乳头细胞研究进展 | 第23-29页 |
| 1.2.1 毛乳头细胞体外培养技术 | 第23-25页 |
| 1.2.2 编码基因和非编码基因在毛乳头细胞中的功能 | 第25-27页 |
| 1.2.3 全反式视黄酸和瘦素在毛囊发育中的作用 | 第27-29页 |
| 1.3 毛母质细胞体外培养研究 | 第29-30页 |
| 1.4 共培养技术在毛囊生物学中的应用 | 第30页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第30-32页 |
| 试验研究 | 第32-165页 |
| 第二章 绒山羊毛囊毛乳头细胞的全转录组建谱及分析 | 第32-80页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 2.1.1 主要生化试剂与实验动物 | 第34页 |
| 2.1.2 毛囊毛乳头细胞和皮肤成纤维细胞的原代和传代培养 | 第34页 |
| 2.1.3 绒山羊毛囊毛乳头细胞编码和非编码基因的建谱及分析 | 第34-35页 |
| 2.1.4 qRT-PCR验证测序结果 | 第35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-74页 |
| 2.2.1 毛乳头细胞和成纤维细胞的分离培养 | 第35-36页 |
| 2.2.2 毛乳头细胞和成纤维细胞总RNA的提取及质量检测 | 第36-37页 |
| 2.2.3 测序数据质控分析 | 第37-43页 |
| 2.2.4 测序数据匹配分析 | 第43-46页 |
| 2.2.4.1 Lnc RNAs 文库匹配 | 第43-45页 |
| 2.2.4.2 MiRNAs文库匹配 | 第45-46页 |
| 2.2.5 LncRNAs文库的可变剪切分析 | 第46-47页 |
| 2.2.6 LncRNAs和 mRNAs分析 | 第47-53页 |
| 2.2.6.1 mRNAs筛选 | 第47页 |
| 2.2.6.2 LncRNAs筛选 | 第47-48页 |
| 2.2.6.3 LncRNAs和 mRNAs特征比较分析 | 第48-50页 |
| 2.2.6.4 LncRNAs和 mRNAs表达水平比较分析 | 第50-53页 |
| 2.2.7 CircRNAs鉴定及结构分析 | 第53-54页 |
| 2.2.8 MiRNAs鉴定及结构分析 | 第54-56页 |
| 2.2.9 基因差异表达分析 | 第56-61页 |
| 2.2.10 差异表达基因及靶基因KEGG和 GO分析 | 第61-64页 |
| 2.2.11 差异表达转录本的联合分析 | 第64-69页 |
| 2.2.11.1 LncRNAs和mRNAs的联合分析 | 第64-65页 |
| 2.2.11.2 LncRNAs和miRNAs联合分析 | 第65-66页 |
| 2.2.11.3 MiRNAs和 m RNAs联合分析 | 第66-67页 |
| 2.2.11.4 LncRNAs-miRNAs-mRNAs和CircRNAs-miRNAs-mRNAs调控网络分析 | 第67-69页 |
| 2.2.12 NcRNAs对 HOXC8和RSPO1 的表达调控分析 | 第69-74页 |
| 2.3 讨论 | 第74-79页 |
| 2.3.1 毛乳头细胞和成纤维细胞的异质性及基因表达差异 | 第75-76页 |
| 2.3.2 毛乳头细胞介导激素对毛囊发育的调控 | 第76-77页 |
| 2.3.3 非编码基因在毛乳头细胞中的表达及作用 | 第77-78页 |
| 2.3.4 毛乳头细胞核心基因的鉴定及表达调控 | 第78-79页 |
| 2.4 小结 | 第79-80页 |
| 第三章 全反式视黄酸和瘦素对毛乳头细胞的影响 | 第80-98页 |
| 3.1 材料与方法 | 第81-83页 |
| 3.1.1 化学试剂 | 第81页 |
| 3.1.2 皮肤样品的收集 | 第81页 |
| 3.1.3 细胞的培养 | 第81页 |
| 3.1.4 MTT检测 | 第81-82页 |
| 3.1.5 细胞免疫组化 | 第82页 |
| 3.1.6 EdU检测 | 第82页 |
| 3.1.7 细胞凋亡检测 | 第82页 |
| 3.1.8 细胞周期检测 | 第82页 |
| 3.1.9 总RNA提取和实时荧光定量 | 第82页 |
| 3.1.10 FGF7 报告载体的构建及双荧光素酶检测 | 第82-83页 |
| 3.1.11 FGF7 启动子区域转录因子结合位点的预测 | 第83页 |
| 3.1.12 数据分析 | 第83页 |
| 3.2 结果与分析 | 第83-93页 |
| 3.2.1 ATRA对毛乳头细胞的影响 | 第83-90页 |
| 3.2.2 瘦素对毛乳头细胞的影响 | 第90-93页 |
| 3.3 讨论 | 第93-95页 |
| 3.2.1 ATRA对毛乳头细胞的影响 | 第93-95页 |
| 3.3.2 瘦素对毛乳头细胞的影响 | 第95页 |
| 3.4 小结 | 第95-98页 |
| 第四章 绒山羊毛囊毛母质细胞的分离培养及应用 | 第98-123页 |
| 4.1 材料与方法 | 第99-103页 |
| 4.1.1 试验动物及主要生化试剂 | 第99页 |
| 4.1.2 毛母质细胞和毛乳头细胞的分离培养 | 第99-101页 |
| 4.1.3 毛母质细胞在不同培养基中形态变化和增殖情况 | 第101页 |
| 4.1.4 不同贴壁介质对毛母质细胞贴壁和形态的影响 | 第101页 |
| 4.1.5 毛母质细胞生长曲线的绘制及细胞倍增时间的计算 | 第101-102页 |
| 4.1.6 钙离子对毛母质细胞体外培养的影响 | 第102页 |
| 4.1.7 全反式视黄酸对毛母质细胞体外培养的影响 | 第102页 |
| 4.1.8 EdU检测 | 第102-103页 |
| 4.1.9 细胞RNA提取及实时荧光定量 | 第103页 |
| 4.1.10 蛋白质提取及蛋白免疫印记分析 | 第103页 |
| 4.1.11 细胞周期检测 | 第103页 |
| 4.1.12 数据分析 | 第103页 |
| 4.2 结果与分析 | 第103-118页 |
| 4.2.1 毛母质细胞从毛球部外植体的迁出及传代 | 第103页 |
| 4.2.2 毛母质细胞体外培养条件的优化 | 第103-108页 |
| 4.2.3 毛母质细胞的生长曲线和细胞倍增时间 | 第108-109页 |
| 4.2.4 毛母质细胞的鉴定 | 第109-111页 |
| 4.2.5 钙离子对毛母质细胞增殖和分化的影响 | 第111-115页 |
| 4.2.6 全反式视黄酸对毛母质细胞增殖和分化的影响 | 第115-118页 |
| 4.3 讨论 | 第118-122页 |
| 4.4 小结 | 第122-123页 |
| 第五章 绒山羊毛囊毛乳头细胞和毛母质细胞分子互作分析 | 第123-163页 |
| 5.1 材料与方法 | 第124页 |
| 5.1.1 毛乳头细胞和毛母质细胞的共培养 | 第124页 |
| 5.1.2 细胞周期检测 | 第124页 |
| 5.1.3 转录组测序分析 | 第124页 |
| 5.2 结果与分析 | 第124-154页 |
| 5.2.1 共培养细胞和单独培养的细胞细胞周期变化 | 第124-125页 |
| 5.2.2 测序细胞样品RNA质量检测与分析 | 第125-126页 |
| 5.2.3 测序文库构建结果与质量分析 | 第126-129页 |
| 5.2.4 测序数据的比对分析 | 第129-130页 |
| 5.2.5 基因结构分析 | 第130-135页 |
| 5.2.6 基因表达水平分析 | 第135-141页 |
| 5.2.7 差异基因表达分析 | 第141-147页 |
| 5.2.8 差异基因GO分析 | 第147-150页 |
| 5.2.9 差异基因KEGG分析 | 第150-152页 |
| 5.2.10 IL-1α调控基因表达机制 | 第152-154页 |
| 5.3 讨论 | 第154-160页 |
| 5.3.1 共培养对毛乳头细胞和毛母质细胞增殖的影响 | 第155-156页 |
| 5.3.2 共培养对毛乳头细胞基因表达的影响 | 第156-158页 |
| 5.3.3 共培养对毛母质细胞基因表达的影响 | 第158-160页 |
| 5.4 小结 | 第160-163页 |
| 第六章 结论 | 第163-165页 |
| 6.1 总结 | 第163页 |
| 6.2 创新点 | 第163页 |
| 6.3 还需进一步深入研究的问题 | 第163-165页 |
| 参考文献 | 第165-183页 |
| 附录 | 第183-189页 |
| 致谢 | 第189-191页 |
| 作者简介 | 第191页 |
