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拟南芥SG1参与叶绿体发育和topp4-1抑制子鉴定及相关功能研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词表第7-15页
第一部分:SG1参与叶绿体发育第15-76页
    第一章 文献综述第15-32页
        1.1 叶绿体的起源与功能第15-17页
            1.1.1 叶绿体的进化来源第15页
            1.1.2 叶绿体的结构第15-17页
        1.2 叶绿体的发育第17-20页
            1.2.1 质体与叶绿体第17页
            1.2.2 叶绿体发育第17-18页
            1.2.3 叶绿体分裂第18-19页
            1.2.4 叶绿体发育影响因素第19-20页
        1.3 叶绿体发育调控第20-30页
            1.3.1 叶绿体基因组第20-21页
            1.3.2 叶绿体基因的表达和调控第21-22页
            1.3.3 叶绿体蛋白运输第22-23页
            1.3.4 叶绿体发育过程中的逆行信号第23-30页
        1.4 叶绿体发育与胚胎发育第30页
        1.5 TPR蛋白与叶绿体发育第30-31页
        1.6 研究目的与意义第31-32页
    第二章 实验材料与方法第32-46页
        2.1 实验材料第32-34页
            2.1.1 拟南芥材料第32页
            2.1.2 载体和菌株第32页
            2.1.3 工具酶及试剂第32页
            2.1.4 实验仪器第32-33页
            2.1.5 常用抗生素配制第33页
            2.1.6 常用溶液配制第33-34页
            2.1.7 常用培养基配制第34页
        2.2 实验方法第34-46页
            2.2.1 拟南芥植株种植培养第34页
            2.2.2 DAB染色第34页
            2.2.3 质体拟核形态观察第34-35页
            2.2.4 叶绿体超微结构观察第35-36页
            2.2.5 叶绿体含量测定第36页
            2.2.6 植物DNA提取第36-37页
            2.2.7 质粒提取、DNA胶回收和PCR产物回收第37页
            2.2.8 图位克隆第37-39页
            2.2.9 大肠杆菌转化第39-40页
            2.2.10 农杆菌转化第40-41页
            2.2.11 载体构建第41-42页
            2.2.12 转化拟南芥植株第42页
            2.2.13 植物RNA提取第42页
            2.2.14 cDNA第一链合成第42-43页
            2.2.15 荧光定量PCR第43页
            2.2.16 植物总蛋白提取及Westernblot检测第43-44页
            2.2.17 GUS染色第44页
            2.2.18 双突变构建第44-45页
            2.2.19 叶片原生质体中的瞬时表达第45页
            2.2.20 亚细胞定位观察第45-46页
    第三章 结果与分析第46-73页
        3.1 sg1突变体表型鉴定第46-50页
            3.1.1 sg1突变体植株表型第46-48页
            3.1.2 sg1突变体胚胎发育第48-50页
        3.2 sg1突变体叶绿体表型第50-53页
            3.2.1 sg1叶绿体发育过程第50-52页
            3.2.2 sg1突变体中叶绿体拟核形态观察第52-53页
        3.3 SG1基因克隆第53-56页
        3.4 SG1蛋白进化分析第56-58页
        3.5 SG1基因表达模式第58-59页
        3.6 SG1蛋白亚细胞定位第59-60页
        3.7 SG1表达量受光调控第60-61页
        3.8 sg1突变体中叶绿体相关基因表达第61-65页
        3.9 SG1与GUN1和GUN4遗传互作第65-70页
            3.9.1 sg1gun1和sg1gun4双突变植株表型第65-67页
            3.9.2 sg1gun1和sg1gun4双突变表叶绿体结构观察第67-68页
            3.9.3 sg1gun1和sg1gun4双突变中叶绿体相关基因表达第68-70页
        3.10 gun5不能恢复sg1表型第70-72页
        3.11 sg1及sg1gun1,sg1gun4和sg1gun5中过氧化物检测第72-73页
    第四章 讨论第73-76页
        4.1 叶绿体与胚胎发育第73页
        4.2 SG1蛋白与叶绿体发育第73-75页
        4.3 GUN1和GUN4与SG1遗传互作第75-76页
第二部分:topp4-1抑制子鉴定及相关功能研究第76-120页
    第一章 文献综述第76-87页
        1.1 蛋白磷酸酶概述第76-78页
        1.2 PP1蛋白磷酸酶研究进展第78-79页
            1.2.1 PP1蛋白磷酸酶在植物中的功能第78页
            1.2.2 PP1蛋白磷酸酶调节亚基的研究第78-79页
        1.3 植物免疫研究进展第79-85页
            1.3.1 病原相关分子模式触发的免疫(PTI)第80-82页
            1.3.2 效应因子触发的免疫反应(ETI)第82-84页
            1.3.3 植物免疫与温度第84-85页
            1.3.4 核质运输和植物免疫第85页
        1.4 研究目的与意义第85-87页
    第二章 材料与方法第87-93页
        2.1 实验材料第87页
        2.2 不同亚细胞定位载体构建第87-88页
        2.3 烟草表皮细胞瞬时表达第88页
        2.4 台盼蓝染色第88页
        2.5 酵母双杂交第88-90页
            2.5.1 酵母双杂交载体构建第88-89页
            2.5.2 酵母感受态的制备第89页
            2.5.3 酵母感受态转化第89-90页
        2.6 双光子荧光互补(BiFC)第90-92页
            2.6.1 BiFC载体构建第90-91页
            2.6.2 BiFC烟草瞬时表达观察第91-92页
        2.7 基于混合池基因组测的图位克隆技术第92-93页
    第三章 结果与分析第93-117页
        3.1 topp4-1抑制子的筛选与表型鉴定第93-94页
        3.2 2562topp4-1中topp4-1基因表达、蛋白含量和定位检测第94-96页
        3.3 2562topp4-1对外源生长素生理响应第96-97页
        3.4 2562topp4-1对外源GA和PAC生理响应第97-99页
        3.5 2562基因克隆第99-103页
            3.5.1 混合池全基因组测序和图位克隆鉴定2562基因第100-102页
            3.5.2 2562基因为恢复topp4-1的基因第102-103页
        3.6 2562基因表达模式分析第103-104页
        3.7 2562及2562topp4-1植株细胞死亡和PR基因表达检测第104-105页
        3.8 不同亚细胞定位对topp4-1蛋白功能影响第105-110页
            3.8.1 不同定位信号对topp4-1蛋白定位改变第105-107页
            3.8.2 不同定位topp4-1转基因植株表型分析第107-109页
            3.8.3 转基因植株中topp4-1蛋白亚细胞定位第109-110页
        3.9 不同定位topp4-1转基因植株中细胞死亡和PR基因表达检测第110-112页
        3.10 高温对不同定位topp4-1转基因植株表型影响第112-114页
        3.11 MOS3和TOPP4遗传关系第114-117页
            3.11.1 mos3topp4-1双突变表型第114页
            3.11.2 MOS3和TOPP4相互作用检测第114-115页
            3.11.3 MOS3和TOPP4遗传关系分析第115-117页
    第四章 讨论第117-120页
        4.1 2562与生长素和GA关系第117页
        4.2 R蛋白2562可能的功能第117-118页
        4.3 topp4-1定位对其功能影响第118页
        4.4 TOPP4与MOS3关系第118-119页
        4.5 基于基因组测序的图位克隆技术第119-120页
参考文献第120-136页
附加材料第136-138页
在学期间的研究成果第138-139页
致谢第139页

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