| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第8-20页 |
| 1.1 人肠道病毒D68 简介 | 第8-9页 |
| 1.2 病毒感染与应激颗粒Stress Granules | 第9-15页 |
| 1.2.1 应激颗粒Stress Granules及其形成机制 | 第9-10页 |
| 1.2.2 细胞内SGs抗病毒免疫机制 | 第10-13页 |
| 1.2.3 病毒感染调控SGs形成 | 第13-15页 |
| 1.3 小分子抗病毒药物法匹拉韦 | 第15-17页 |
| 1.3.1 法匹拉韦T705结构 | 第15-16页 |
| 1.3.2 法匹拉韦T705的抗病毒活性 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的主要内容及意义 | 第17-20页 |
| 第2章 材料和方法 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 主要试剂及抗体 | 第20-21页 |
| 2.1.2 质粒、细胞株及病毒株 | 第21页 |
| 2.1.3 引物 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 载体克隆构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2 细胞复苏、培养与冻存 | 第27-28页 |
| 2.2.3 肠道病毒D68的培养与滴度测定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 细胞RNA提取与逆转录 | 第29-31页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第31页 |
| 2.2.6 细胞瞬时转染与免疫印迹 | 第31-34页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| 2.2.8 免疫荧光 | 第35页 |
| 2.2.9 激光共聚焦显微镜 | 第35-36页 |
| 2.2.10 MTT细胞毒性检测 | 第36页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第36-38页 |
| 第3章 实验结果 | 第38-62页 |
| 3.1 细胞模型筛选 | 第38-39页 |
| 3.2 内参引物、VP1引物设计 | 第39-41页 |
| 3.3 SGs蛋白G3BP1、TIA-1、HuR质粒的构建及蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 3.4 人肠道病毒D68诱导SGs的形成 | 第42-48页 |
| 3.4.1 人肠道病毒D68感染细胞形成SGs | 第43-44页 |
| 3.4.2 人肠道病毒D68抑制应激颗粒SGs形成 | 第44-48页 |
| 3.5 人肠道病毒D68感染与应激颗粒SGs的相互作用机制 | 第48-50页 |
| 3.6 SGs蛋白TIA-1 与病毒基因组的相互作用 | 第50-55页 |
| 3.7 T705抑制人肠道病毒D68的增殖 | 第55-59页 |
| 3.7.1 T705最佳处理浓度的确定 | 第55-56页 |
| 3.7.2 T705抑制EV-D68病毒增殖剂量依赖关系 | 第56-59页 |
| 3.8 T705 处理降低EV-D68病毒造成的RD细胞病变程度 | 第59页 |
| 3.9 T705 抑制EV-D68病毒增殖时效关系 | 第59-62页 |
| 第4章 结果讨论 | 第62-64页 |
| 第5章 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 发表论文与参与科研情况 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
