| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-18页 |
| 1.1 免疫检查点抑制剂 | 第13-15页 |
| 1.1.1 程序性细胞死亡通路 | 第14页 |
| 1.1.2 免疫检查点抑制剂治疗的机遇与挑战 | 第14-15页 |
| 1.2 免疫原性细胞死亡 | 第15-16页 |
| 1.2.1 免疫原性细胞死亡的依据 | 第15-16页 |
| 1.2.2 免疫原性细胞死亡的特征 | 第16页 |
| 1.3 纳米靶向递药 | 第16-17页 |
| 1.3.1 纳米递药系统的优势 | 第16-17页 |
| 1.3.2 纳米递药系统在肿瘤免疫治疗中的应用 | 第17页 |
| 1.4 本课题的研究思路 | 第17-18页 |
| 第2章 药物免疫活性的验证 | 第18-30页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第19-20页 |
| 2.1.3 溶液的配制 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 CT26肿瘤细胞培养 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞钙网膜蛋白暴露的检测 | 第22页 |
| 2.2.3 细胞分泌ATP的检测 | 第22-23页 |
| 2.2.4 DNA损伤相关蛋白γH2AX的检测 | 第23页 |
| 2.2.5 BCA的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.6 Western Blot实验 | 第24-25页 |
| 2.2.7 PD-L1的表达 | 第25-26页 |
| 2.2.8 数据分析 | 第26页 |
| 2.3 实验结果及讨论 | 第26-28页 |
| 2.3.1 伊立替康引起CT26肿瘤细胞形成免疫原性细胞死亡 | 第26-27页 |
| 2.3.2 CPT和JQ1的协同效果 | 第27-28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-30页 |
| 第3章 复方脂质体的表征 | 第30-36页 |
| 3.1 材料和仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.2 实验器材 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 CT26肿瘤细胞培养 | 第31页 |
| 3.2.2 CT26细胞PD-L1表达水平的测定 | 第31页 |
| 3.2.3 修饰anti-PD-L1脂质体的制备 | 第31-32页 |
| 3.2.4 脂质体的形态学观察 | 第32页 |
| 3.2.5 脂质体的粒径分布及稳定性 | 第32页 |
| 3.2.6 脂质体的包封率 | 第32-33页 |
| 3.2.7 修饰anti-PD-L1脂质体的体外释放 | 第33页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第33-35页 |
| 3.3.1 CT26肿瘤细胞的PD-L1表达 | 第33页 |
| 3.3.2 脂质体的形态学 | 第33-34页 |
| 3.3.3 脂质体的粒径 | 第34页 |
| 3.3.4 脂质体的包封率和载药量 | 第34页 |
| 3.3.5 脂质体的稳定性 | 第34页 |
| 3.3.6 脂质体的体外释放实验 | 第34-35页 |
| 3.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第4章 复方脂质体的靶向性及体外活性 | 第36-48页 |
| 4.1 材料和仪器 | 第36-38页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第36-37页 |
| 4.1.2 实验器材 | 第37页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第37页 |
| 4.1.4 溶液的配制 | 第37-38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 4.2.1 CT26肿瘤细胞的培养 | 第38页 |
| 4.2.2 标记香豆素-6 的脂质体的制备 | 第38页 |
| 4.2.3 肿瘤细胞对脂质体的摄取 | 第38-39页 |
| 4.2.4 骨髓来源的原代树突状细胞（BMDC）的制备 | 第39页 |
| 4.2.5 CT26细胞发生免疫原性细胞死亡促进BMDC的成熟 | 第39-40页 |
| 4.2.6 T淋巴细胞的制备 | 第40页 |
| 4.2.7 熟化的BMDC刺激T淋巴细胞的激活 | 第40-41页 |
| 4.2.8 骨髓来源的巨噬细胞（BMDM）的诱导 | 第41页 |
| 4.2.9 吞噬实验 | 第41-42页 |
| 4.2.10 活体成像 | 第42-43页 |
| 4.2.10.1 DIR标记的脂质体的制备 | 第42页 |
| 4.2.10.2 皮下移植CT26肿瘤小鼠模型的建立 | 第42页 |
| 4.2.10.3 活体成像 | 第42-43页 |
| 4.2.11 数据分析 | 第43页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第43-46页 |
| 4.3.1 CT26细胞对标记香豆素脂质体的摄取 | 第43-44页 |
| 4.3.2 体内靶向性和分布 | 第44-45页 |
| 4.3.3 免疫原性细胞死亡引起固有免疫反应 | 第45-46页 |
| 4.3.4 免疫原性细胞死亡（ICD）引起的免疫激活 | 第46页 |
| 4.4 本章小结 | 第46-48页 |
| 第5章 复方脂质体的结肠癌免疫治疗的研究 | 第48-63页 |
| 5.1 材料和仪器 | 第48-50页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第48-49页 |
| 5.1.2 实验器材 | 第49-50页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-55页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第50页 |
| 5.2.2 体内药效学评价 | 第50页 |
| 5.2.3 药效学机理研究 | 第50-51页 |
| 5.2.4 血清样本收集 | 第51页 |
| 5.2.5 肿瘤组织中PD-L1的染色 | 第51页 |
| 5.2.6 肿瘤组织中CRT的免疫荧光染色 | 第51-52页 |
| 5.2.7 DC的染色 | 第52-53页 |
| 5.2.7.1 淋巴结中DC的染色 | 第52页 |
| 5.2.7.2 脾脏中DC染色 | 第52-53页 |
| 5.2.8 T淋巴细胞的染色 | 第53页 |
| 5.2.9 肿瘤组织中T细胞的制备 | 第53页 |
| 5.2.10 CD8~+IFN-γ~+T细胞的染色 | 第53-54页 |
| 5.2.11 调节性T细胞的染色 | 第54页 |
| 5.2.12 生物安全性评价 | 第54页 |
| 5.2.13 数据分析 | 第54-55页 |
| 5.3 实验结果和讨论 | 第55-61页 |
| 5.3.1 体内药效学评价 | 第55页 |
| 5.3.2 药物治疗后肿瘤组织部位的钙网膜蛋白 | 第55-56页 |
| 5.3.3 JQ1下调免疫检查点PD-L1蛋白的表达 | 第56-57页 |
| 5.3.4 在免疫器官中熟化DC数量的测定 | 第57页 |
| 5.3.5 CD4~+和CD8~+细胞的比例变化 | 第57-58页 |
| 5.3.6 APCJ治疗后激活机体抗肿瘤免疫反应 | 第58-61页 |
| 5.3.6.1 血清中IFN-γ 的浓度 | 第58-59页 |
| 5.3.6.2 肿瘤组织内CD8~+T细胞的活性 | 第59-60页 |
| 5.3.6.3 肿瘤组织内Tregs的比例 | 第60-61页 |
| 5.3.7 生物安全性评价 | 第61页 |
| 5.4 本章小结 | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第74页 |
