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超低分子量肝素对神经细胞凋亡及细胞内钙调控的实验研究

中文摘要第1-17页
Abstract第17-23页
符号说明第23-26页
前言第26-34页
实验材料第34-43页
 1. 实验动物第34页
 2. 化学试剂第34-37页
 3. 试剂配制第37-41页
 4. 主要仪器设备第41-43页
第一部分 AB25-35诱导细胞损伤及其纤维形成的鉴定第43-50页
 1. 实验方法第43-44页
     ·大鼠神经细胞原代培养第43页
     ·Aβ25-35浓度的确定第43页
     ·透射电镜(TEM)观察Aβ25-35纤维形成第43-44页
     ·硫磺素T(Th-T)荧光分析第44页
 2. 数据处理第44页
 3. 实验结果第44-47页
     ·神经元形态学观察第44-45页
     ·Aβ25-35浓度的确定第45-46页
     ·透射电镜(TEM)观察Aβ25-35纤维形成第46页
     ·硫磺素T(Th-T)荧光分析第46-47页
 4. 讨论第47-49页
 5. 结论第49-50页
第二部分 ULMWH对AB25-35诱导神经细胞凋亡的影响第50-67页
 1. 实验方法第50-54页
     ·大鼠神经细胞原代培养第50页
     ·实验分组第50页
     ·细胞活力测定第50-51页
     ·LDH释放率测定第51页
     ·Annexin V/PI双染实验第51页
     ·Hoechst 33258染色实验第51-52页
     ·TUNEL实验第52-53页
     ·Western blotting实验第53页
     ·钙离子浓度测定第53-54页
       ·Fura-2/AM负载第53-54页
       ·荧光测定第54页
       ·[Ca~(2+)]i的计算第54页
 2. 数据处理第54页
 3. 实验结果第54-63页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的细胞活力的影响第54-55页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的LDH释放率的影响第55-56页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的神经细胞凋亡率的影响第56-59页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的神经细胞核形态的影响第59-60页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的神经细胞DNA的影响第60-61页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的Caspase-3、Bcl-2表达的影响第61-62页
     ·ULMWH对Aβ25-35诱导的[Ca~(2+)]i的影响第62-63页
 4. 讨论第63-66页
 5. 结论第66-67页
第三部分 ULMWH对神经细胞内钙浓度的影响第67-78页
 1. 实验方法第67-71页
     ·大鼠神经细胞原代培养第67页
     ·细胞内钙离子浓度的测定第67-68页
       ·Fura-2/AM负载第67页
       ·荧光测定第67-68页
       ·[Ca~(2+)]i的计算第68页
     ·ULMWH对静息状态下神经细胞[Ca~(2+)]i的影响第68页
     ·ULMWH对KCl诱导的神经细胞外钙内流的的影响第68页
     ·ULMWH对谷氨酸诱导的神经细胞外钙内流的的影响第68-69页
     ·ULMWH对IP_3诱导的神经细胞内钙释放的的影响第69页
     ·ULMWH对IP_3诱导的线粒体和内质网内钙释放的的影响第69-71页
       ·神经细胞线粒体的提取第69-70页
       ·神经细胞内质网的提取第70页
       ·线粒体和内质网内钙释放的测定第70-71页
 2. 数据处理第71页
 3. 实验结果第71-76页
     ·ULMWH对静息状态下神经细胞[Ca~(2+)]i的影响第71-72页
     ·ULMWH对KCl诱导的神经细胞外钙内流的的影响第72-73页
     ·ULMWH对谷氨酸诱导的神经细胞外钙内流的的影响第73-74页
     ·ULMWH对IP_3诱导的神经细胞内钙释放的的影响第74-75页
     ·ULMWH对IP_3诱导的线粒体和内质网内钙释放的的影响第75-76页
 4. 讨论第76-77页
 5. 结论第77-78页
参考文献第78-87页
致谢第87-88页
攻读学位期间发表的学术论文第88-89页
附 已发表论文第89-109页
学位论文评阅及答辩情况表第109页

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