中文摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
中英文缩略表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-14页 |
一、材料与方法 | 第14-24页 |
(一)实验材料 | 第14-17页 |
1.实验细胞 | 第14页 |
2.仪器设备 | 第14-15页 |
3.实验试剂 | 第15-16页 |
4.PCR引物序列 | 第16-17页 |
5.Sanger测序引物 | 第17页 |
6.siRNA序列 | 第17页 |
(二)实验方法 | 第17-23页 |
1.细胞培养 | 第17-18页 |
1.1 细胞复苏 | 第17-18页 |
1.2 细胞培养 | 第18页 |
1.3 细胞传代 | 第18页 |
1.4 细胞计数 | 第18页 |
1.5 细胞冻存 | 第18页 |
2.细胞转染实验 | 第18-19页 |
3.细胞 DNA 提取实验 | 第19页 |
4.细胞HBV基因拷贝数检测 | 第19页 |
5.实时荧光定量 PCR 实验 | 第19-20页 |
6.HBV捕获测序 | 第20页 |
6.1 DNA水平的HBV捕获测序 | 第20页 |
6.2 RNA水平的HBV捕获测序 | 第20页 |
7.VirusSeq分析病毒-人类基因整合突变 | 第20页 |
8.Sanger测序验证整合突变位点 | 第20-21页 |
9.RNA-Seq检测细胞基因表达 | 第21页 |
10.细胞增殖检测实验 | 第21页 |
11.细胞周期实验 | 第21页 |
12.细胞凋亡实验 | 第21页 |
13.Western blot 实验 | 第21-23页 |
(三)统计学分析 | 第23-24页 |
二、结果 | 第24-28页 |
(一)HepG2.2.15 细胞HBV感染的验证 | 第24页 |
(二)HepG2.2.15 细胞DNA水平HBV整合位点测序及分析 | 第24页 |
(三)HepG2.2.15 细胞RNA水平HBV整合位点测序及分析 | 第24-25页 |
(四)HBV整合位点表达情况 | 第25页 |
(五)Sanger测序验证整合位点 | 第25页 |
(六)HBV整合抑制HepG2.2.15 细胞增殖 | 第25页 |
(七)HBV整合诱导HepG2.2.15 细胞G1 期停滞及机制 | 第25-26页 |
(八)HBV整合诱导HepG2.2.15 细胞凋亡增加 | 第26页 |
(九)DPP7 敲低诱导HepG2 细胞凋亡 | 第26-28页 |
三、分析与讨论 | 第28-32页 |
(一)实验结果分析与讨论 | 第28-29页 |
(二)不足与展望 | 第29-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-40页 |
附图(表) | 第40-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
文献综述 | 第47-56页 |
参考文献 | 第51-56页 |