PtSnRK基因的遗传转化研究
| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 植物抗逆基因研究的意义及现状 | 第9-10页 |
| 2 植物抗逆基因 | 第10-18页 |
| ·在植物抗性中起作用的蛋白基因 | 第10-15页 |
| ·渗透调节类 | 第10-12页 |
| ·脯氨酸 | 第10-11页 |
| ·甜菜碱 | 第11-12页 |
| ·海藻糖 | 第12页 |
| ·功能蛋白类 | 第12-14页 |
| ·胚胎发育后期蛋白 | 第12-13页 |
| ·水通道蛋白 | 第13页 |
| ·离子通道蛋白 | 第13-14页 |
| ·毒性降解酶类 | 第14-15页 |
| ·超氧化物酶 | 第14页 |
| ·过氧化氢酶 | 第14-15页 |
| ·在信号传导和基因表达中起调节作用的蛋白基因 | 第15-18页 |
| ·转录因子 | 第15-17页 |
| ·蛋白激酶 | 第17-18页 |
| ·钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶 | 第17-18页 |
| ·促分裂原活化蛋白激酶 | 第18页 |
| 3 杨树抗逆研究进展与展望 | 第18-19页 |
| 4 SnRK 研究进展 | 第19-20页 |
| 5 本课题研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 PtSnRK 基因的遗传转化研究 | 第21-48页 |
| 1 前言 | 第21页 |
| 第一部分 | 第21-26页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| ·菌株和载体 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·仪器与设备 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第23页 |
| ·提取质粒 | 第23-24页 |
| ·剂盒提取质粒 | 第23-24页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第24页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第24页 |
| ·农杆菌感受态的转化 | 第24页 |
| ·PCR 鉴定转化子 | 第24-26页 |
| ·PCR 引物 | 第25页 |
| ·PCR 反应体系和程序 | 第25页 |
| ·PCR 反应体系 | 第25页 |
| ·PCR 反应程序 | 第25页 |
| ·电泳检测 | 第25-26页 |
| 第二部分 | 第26-43页 |
| 1 实验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·细菌培养基 | 第26页 |
| ·植物培养基 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-31页 |
| ·南林895 的扩繁 | 第27页 |
| ·抑制菌剂头孢霉素敏感性试验 | 第27页 |
| ·南林895 杨潮霉素敏感性测定 | 第27-28页 |
| ·南林895 杨树叶盘分化的潮霉素敏感性测试 | 第27页 |
| ·南林895 杨树不定芽生根的潮霉素敏感性测试 | 第27-28页 |
| ·两种农杆菌介导的南林895 的转化 | 第28-31页 |
| ·菌株的活化与保存 | 第28页 |
| ·预培养 | 第28页 |
| ·正负对照的设置 | 第28-29页 |
| ·菌液的制备 | 第29页 |
| ·侵染 | 第29页 |
| ·共培养 | 第29页 |
| ·分化筛选培养 | 第29-30页 |
| ·抗性芽伸长培养 | 第30-31页 |
| ·抗性芽生根培养 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·PCR 鉴定转化子 | 第31-32页 |
| ·抑菌剂浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·南林895 筛选浓度确定 | 第33-34页 |
| ·南林895 杨叶盘分化的潮霉素浓度的确定 | 第33-34页 |
| ·南林895 杨叶盘不定芽生根的潮霉素浓度的确定 | 第34页 |
| ·预培养对转化效率的影响 | 第34-35页 |
| ·农杆菌浓度和侵染时间对转化效率的影响 | 第35-38页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第38页 |
| ·乙酰丁香酮对转化率的影响 | 第38-39页 |
| ·不同筛选方法对转化效率的影响 | 第39页 |
| ·不同农杆菌菌株转化南林895 杨的转化统计 | 第39-41页 |
| ·农杆菌EHA105 转化南林895 杨 | 第39-40页 |
| ·农杆菌LBA4404 转化南林895 杨 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三部分 | 第43-48页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| 2 试剂 | 第43页 |
| 3 实验方法 | 第43-45页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第43-45页 |
| ·DNA 提取 | 第43-44页 |
| ·TIANGEN 试剂盒法 | 第43页 |
| ·CTAB 法—硅珠吸附法 | 第43-44页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·PCR 反应体系和程序 | 第44-45页 |
| ·PCR 反应体系 | 第44页 |
| ·PCR 反应程序 | 第44-45页 |
| ·电泳检测 | 第45页 |
| 4 结果与分析 | 第45-46页 |
| ·抗性植株的DNA 提取 | 第45页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第45-46页 |
| 5 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 主要结论和进一步研究展望 | 第48-50页 |
| 1 主要结论 | 第48页 |
| 2 进一步展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 详细摘要 | 第55-58页 |
