| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 目前林木常规育种和转基因育种的情况 | 第10-11页 |
| ·常规育种 | 第10页 |
| ·转基因育种 | 第10-11页 |
| 2 遗传转化技术 | 第11-13页 |
| ·农杆菌介导法 | 第11页 |
| ·原生质体转化法 | 第11-12页 |
| ·基因枪法 | 第12页 |
| ·花粉管道法 | 第12-13页 |
| ·电击法 | 第13页 |
| ·SAAT 法 | 第13页 |
| 3 非生物胁迫下编码逆境蛋白的相关基因 | 第13-20页 |
| ·渗透调节基因 | 第13-16页 |
| ·脯氨酸合成相关基因 | 第14页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH) | 第14-15页 |
| ·编码基因甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因(MtlD) | 第15页 |
| ·肌醇甲基转移酶基因(Imtl 基因) | 第15页 |
| ·果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB 基因) | 第15页 |
| ·AtGolS2 基因 | 第15-16页 |
| ·活性氧清除的相关基因 | 第16-17页 |
| ·蛋白激酶基因 | 第17-18页 |
| ·MAPK 基因 | 第17页 |
| ·CDPK 基因 | 第17页 |
| ·RPK 基因 | 第17-18页 |
| ·核糖体蛋白激酶(ribosomal-protein kinase)基因 | 第18页 |
| ·转录调控蛋白激酶(transcription-regulation protein kinase)基因 | 第18页 |
| ·SRK2C 基因 | 第18页 |
| ·保护生物大分子及膜结构的蛋白质基因 | 第18-19页 |
| ·抗冻蛋白基因 | 第18-19页 |
| ·胚胎发育晚期丰富蛋白基因 | 第19页 |
| ·编码转录因子的调节基因 | 第19-20页 |
| 4 杨树抗性基因工程研究 | 第20-23页 |
| ·抗虫基因工程 | 第20-21页 |
| ·抗病基因工程 | 第21-22页 |
| ·木质素改良基因工程 | 第22页 |
| ·抗非生物胁迫基因工程 | 第22-23页 |
| 5 转基因的检测 | 第23-25页 |
| ·外源基因整合的鉴定 | 第23-24页 |
| ·标记基因 | 第23页 |
| ·PCR 检测与分子标记 | 第23-24页 |
| ·Southern 杂交 | 第24页 |
| ·转基因植株的外源基因表达的检测 | 第24-25页 |
| ·报告基因的检测 | 第24-25页 |
| ·外源基因转录的检测 | 第25页 |
| ·外源基因表达蛋白的检测 | 第25页 |
| 6 本课题研究的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 南林895 杨遗传转化研究 | 第26-45页 |
| 1 实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26-27页 |
| ·抗生素 | 第27页 |
| ·仪器与设备 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·植物培养基 | 第27页 |
| ·细菌培养基 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-33页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·目的基因大肠杆菌的转化 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·转化大肠杆菌XL1-blue 感受态细胞 | 第28页 |
| ·连接产物的检测 | 第28-30页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·PCR 反应体系 | 第29页 |
| ·PCR 反应程序 | 第29-30页 |
| ·电泳检测 | 第30页 |
| ·表达载体转化根癌农杆菌 | 第30页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第30页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第30页 |
| ·潮霉素本底浓度的确定 | 第30-31页 |
| ·叶片分化的潮霉素本底浓度的确定 | 第31页 |
| ·生根潮霉素本底浓度的确定 | 第31页 |
| ·抑菌性抗生素的选择 | 第31页 |
| ·根癌农杆菌 Ti 质粒介导法转化南林 895 杨 | 第31-33页 |
| ·外植体的制备 | 第31-32页 |
| ·正负对照的设置 | 第32页 |
| ·外植体的侵染 | 第32-33页 |
| ·菌株的活化 | 第32页 |
| ·菌液的制备 | 第32页 |
| ·农杆菌侵染和共培养 | 第32页 |
| ·芽伸长培养 | 第32页 |
| ·生根培养 | 第32页 |
| ·继代培养 | 第32-33页 |
| ·影响农杆菌转化的各个因素 | 第33页 |
| ·预培养时间 | 第33页 |
| ·菌液浓度 | 第33页 |
| ·侵染时间 | 第33页 |
| ·共培养时间 | 第33页 |
| ·目的基因在两种农杆菌中的转化效率 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-44页 |
| ·植物表达载体农杆菌转化 | 第33-34页 |
| ·潮霉素本底浓度的确定 | 第34-36页 |
| ·叶片分化的潮霉素本底浓度的确定 | 第34-35页 |
| ·生根的潮霉素本底浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·抑菌性抗生素的选择 | 第36页 |
| ·正负对照 | 第36-37页 |
| ·南林895 杨的遗传转化条件的优化 | 第37-41页 |
| ·叶片的预培养 | 第37-38页 |
| ·菌液浓度 | 第38-39页 |
| ·侵染时间 | 第39-40页 |
| ·共培养时间 | 第40-41页 |
| ·转基因杨树的获得 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 第三章 转基因杨树的检测 | 第45-55页 |
| 1 实验材料 | 第45页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45页 |
| ·实验试剂 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-50页 |
| ·转基因杨树总DNA 提取 | 第45-46页 |
| ·转基因杨树PCR 分子检测 | 第46-47页 |
| ·引物设计 | 第46页 |
| ·PCR 反应体系 | 第46页 |
| ·PCR 反应程序 | 第46-47页 |
| ·电泳检测 | 第47页 |
| ·转基因植株的RT-PCR 检测 | 第47-49页 |
| ·植株总RNA 提取步骤 | 第47-48页 |
| ·纯化总RNA | 第48页 |
| ·反转录反应 | 第48页 |
| ·RT-PCR 引物 | 第48-49页 |
| ·反应体系 | 第49页 |
| ·RT-PCR 反应程序 | 第49页 |
| ·转基因植株的抗盐性实验 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-54页 |
| ·转基因植株DNA 提取 | 第50页 |
| ·转基因杨树的PCR 检测 | 第50-51页 |
| ·转基因植株的RT-PCR 检测 | 第51-52页 |
| ·转基因植株RNA 提取 | 第51页 |
| ·转基因植株目的基因的RT-PCR 检测 | 第51-52页 |
| ·转基因植株的抗盐性实验 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 结论与展望 | 第55-56页 |
| 1 全文总结 | 第55页 |
| 2 存在的问题和展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 详细摘要 | 第61-63页 |