| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-26页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-12页 |
| 1.2 两栖动物生殖腺的发育 | 第12-13页 |
| 1.2.1 两栖动物生殖腺的发生 | 第12页 |
| 1.2.2 两栖动物生殖腺的分化 | 第12-13页 |
| 1.3 两栖动物的性别决定 | 第13-16页 |
| 1.3.1 基因对两栖动物性别决定的影响 | 第13-14页 |
| 1.3.2 环境对两栖动物性别决定的影响 | 第14-16页 |
| 1.4 Sox9、Esr1、Cyp19基因的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.4.1 Sox9基因 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Cyp19基因 | 第17-19页 |
| 1.4.3 Esr1基因 | 第19-20页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR技术 | 第20-24页 |
| 1.5.1 RT-PCR的原理 | 第20-23页 |
| 1.5.2 RT-PCR的解析 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第24-26页 |
| 第2章 材料与方法 | 第26-40页 |
| 2.1 试剂、仪器与实验动物 | 第26-28页 |
| 2.1.1 试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 实验动物处理 | 第28页 |
| 2.2.2 预实验 | 第28-29页 |
| 2.2.3 样品收集 | 第29页 |
| 2.2.4 性别鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.5 RNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.6 cDNA的合成 | 第31-32页 |
| 2.2.7 引物设计与合成 | 第32-33页 |
| 2.2.8 PCR扩增 | 第33-35页 |
| 2.2.9 PCR扩增产物回收和测序 | 第35-36页 |
| 2.2.10 扩增效率检测 | 第36-38页 |
| 2.2.11 RT-PCR反应 | 第38-40页 |
| 第3章 结果与分析 | 第40-52页 |
| 3.1 大鲵性别鉴定 | 第40-42页 |
| 3.1.1 8月龄大鲵性别鉴定 | 第40页 |
| 3.1.2 12月龄大鲵性别鉴定 | 第40-41页 |
| 3.1.3 20月龄大鲵性别鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2 大鲵性腺总RNA质量 | 第42页 |
| 3.3 cDNA质量 | 第42-43页 |
| 3.4 引物特异性 | 第43页 |
| 3.5 PCR扩增产物序列 | 第43-45页 |
| 3.5.1 Sox9基因扩增产物序列 | 第43-44页 |
| 3.5.2 Cyp19基因扩增产物序列 | 第44页 |
| 3.5.3 Esr1基因扩增产物序列 | 第44页 |
| 3.5.4 β-actin基因扩增产物序列 | 第44-45页 |
| 3.6 扩增效率检测 | 第45页 |
| 3.7 RT-PCR结果 | 第45-52页 |
| 3.7.1 Sox9基因的表达 | 第45-47页 |
| 3.7.2 Cyp19基因的表达 | 第47-49页 |
| 3.7.3 Esr1基因的表达 | 第49-52页 |
| 第4章 讨论 | 第52-58页 |
| 4.1 雌二醇对大鲵性别分化的影响 | 第52页 |
| 4.2 不同发育期大鲵性腺Sox9基因的表达 | 第52-53页 |
| 4.3 不同发育期大鲵性腺Cyp19基因的表达 | 第53-55页 |
| 4.4 不同发育期大鲵性腺Esr1基因的表达 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第70页 |
| 所获荣誉 | 第70页 |