| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表(Abbreviations) | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-26页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第14-15页 |
| 1.2 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.2.1 PRRS及PRRSV的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.2 IFN-γ信号通路的研究 | 第18-22页 |
| 1.2.3 ISG12A的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.2.4 OASL的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.3 研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-43页 |
| 2.1 技术路线 | 第26页 |
| 2.2 材料 | 第26-29页 |
| 2.2.1 菌株、细胞、毒株、组织样品和RNA-Seq数据 | 第26-27页 |
| 2.2.2 PCR引物设计及真核表达载体 | 第27-28页 |
| 2.2.3 主要试剂及抗体 | 第28页 |
| 2.2.4 主要仪器和设备 | 第28-29页 |
| 2.2.5 主要软件、主要生物学数据库与相关网站 | 第29页 |
| 2.3 研究方法 | 第29-43页 |
| 2.3.1 试验动物与设计 | 第29页 |
| 2.3.2 RNA-Seq数据分析 | 第29-30页 |
| 2.3.3 重组质粒构建 | 第30-33页 |
| 2.3.4 LB培养基配制 | 第33-34页 |
| 2.3.5 细胞复苏、培养及冻存 | 第34-35页 |
| 2.3.6 细胞转染试验 | 第35页 |
| 2.3.7 PRRSV病毒制备、毒力测定及病毒感染试验 | 第35-36页 |
| 2.2.8 Western Blot试验 | 第36-38页 |
| 2.3.9 实时荧光定量PCR检测试验 | 第38-40页 |
| 2.3.10 间接免疫荧光试验 | 第40-41页 |
| 2.3.11 DAPI染核 | 第41页 |
| 2.3.12 细胞周期检测 | 第41-42页 |
| 2.3.13 激光共聚焦试验 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-59页 |
| 3.1 通城猪IFN-γ相关差异表达基因的筛选 | 第43-44页 |
| 3.2 不同品种猪人工感染PRRSV前后ISG12A、OASL基因的表达变化 | 第44-45页 |
| 3.3 ISG12A和OASL基因的克隆 | 第45-46页 |
| 3.4 在MARC-145细胞系中研究ISG12A基因的抗PRRSV功能 | 第46-55页 |
| 3.4.1 猪ISG12A序列分析及系统进化树的构建 | 第46-48页 |
| 3.4.2 ISG12A的亚细胞定位 | 第48页 |
| 3.4.3 ISG12A在不同品种猪感染前后主要免疫组织中的表达变化 | 第48-49页 |
| 3.4.4 MARC-145细胞中超表达ISG12A对PRRSV增殖的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.5 siRNA干扰ISG12A基因对PRRSV增殖的影响 | 第51-53页 |
| 3.4.6 ISG12A对MARC-145细胞周期的影响 | 第53-55页 |
| 3.5 在MARC-145细胞系中研究OASL基因的抗PRRSV功能 | 第55-59页 |
| 3.5.1 猪OASL结构域分析 | 第55页 |
| 3.5.2 在MARC-145细胞系中超表达OASL对PRRSV复制的影响 | 第55-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 关于本研究基因筛选结果的讨论 | 第59-60页 |
| 4.2 关于利用体外细胞系研究抗PRRSV功能基因的讨论 | 第60-62页 |
| 4.3 关于待进一步研究和探索的问题 | 第62-63页 |
| 5 小结 | 第63-65页 |
| 5.1 本研究的主要结论 | 第63页 |
| 5.2 本研究的创新点与特色 | 第63-64页 |
| 5.3 本研究的不足之处与进一步工作建议 | 第64-65页 |
| 6 其他工作 | 第65-68页 |
| 6.1 稳定表达猪SARM1的MARC-145细胞系的建立 | 第65-66页 |
| 6.2 不同品种猪感染前后与参考数据的联合分析 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 附录 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
