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miR-203靶向SIK2调控结肠癌紫杉醇药物敏感性的研究

前言第4-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-11页
英文缩写词第15-16页
文献综述第16-30页
第一部分miR-203和SIK2在人结肠癌组织及细胞株中的表达变化及临床关系研究第30-42页
    1.1 材料第30-32页
        1.1.1 研究对象第30-31页
        1.1.2 主要实验抗体和试剂第31-32页
        1.1.3 主要实验仪器第32页
    1.2 实验方法第32-36页
        1.2.1 细胞培养第32-33页
        1.2.2 微阵列数据分析第33-34页
        1.2.3 实时荧光定量PCR实验第34-36页
        1.2.4 统计学方法第36页
    1.3 结果第36-40页
        1.3.1 人结肠癌组织与癌旁正常组织中miR-203的表达水平对照第36-37页
        1.3.2 人结肠癌细胞中miR-203的mRNA表达水平差异第37-38页
        1.3.3 miR-203的表达水平与结肠癌患者临床病理特征的关联性第38-39页
        1.3.4 人结肠癌组织及其癌旁正常组织中SIK2的表达水平对照第39-40页
    1.4 讨论第40-42页
第二部分miR-203在结肠癌细胞表达变化及由此对化疗药物敏感性影响的研究第42-50页
    2.1 材料第42-43页
        2.1.1 细胞株第42页
        2.1.2 主要实验抗体和试剂第42-43页
        2.1.3 主要实验仪器第43页
    2.2 实验方法第43-44页
        2.2.1 细胞培养第43页
        2.2.2 转染第43-44页
        2.2.3 MTT测定法测定细胞增殖实验第44页
        2.2.4 统计学方法第44页
    2.3 结果第44-47页
        2.3.1 过表达miR-203对结肠癌细胞紫杉醇敏感性的影响第44-45页
        2.3.2 过表达miR-203对结肠癌细胞其他抗癌药物敏感性的影响第45-47页
    2.4 讨论第47-50页
第三部分 过表达miR-203可提高结肠癌紫衫醇耐药细胞对紫衫醇的敏感性第50-58页
    3.1 材料第50-52页
        3.1.1 细胞株第50页
        3.1.2 主要实验抗体和试剂第50-51页
        3.1.3 主要实验仪器第51-52页
    3.2 实验方法第52-53页
        3.2.1 细胞培养第52页
        3.2.2 实时荧光定量PCR实验第52页
        3.2.3 构建紫杉醇耐药细胞第52页
        3.2.4 转染第52页
        3.2.5 MTT测定法测定细胞增殖实验第52页
        3.2.6 统计学方法第52-53页
    3.3 结果第53-54页
        3.3.1 HT-29紫杉醇耐药细胞可以耐受比亲代细胞更高浓度的紫杉醇第53页
        3.3.2 miR-203的表达与结肠癌细胞的紫杉醇耐药性呈负相关第53-54页
    3.4 转染ANTI-MIR-203反向证实过表达MIR-203可提高结肠癌细胞对紫杉醇的敏感性第54-55页
    3.5 讨论第55-58页
第四部分miR-203通过靶向SIK2提高结肠癌对于紫衫醇耐药敏感性的研究第58-76页
    4.1 材料第58-61页
        4.1.1 研究对象第58页
        4.1.2 细胞株第58页
        4.1.3 主要实验抗体和试剂第58-60页
        4.1.4 主要实验仪器第60-61页
    4.2 方法第61-64页
        4.2.1 miR-203靶点预测第61页
        4.2.2 细胞培养第61页
        4.2.3 构建紫杉醇耐药细胞第61页
        4.2.4 转染第61页
        4.2.5 MTT测定法测定细胞增殖实验第61-62页
        4.2.6 荧光素酶实验第62页
        4.2.7 免疫组化第62页
        4.2.8 实时荧光定量PCR实验第62页
        4.2.9 Western-Blot法第62-64页
        4.2.10 统计学方法第64页
    4.3 结果第64-73页
        4.3.1 SIK2是miR-203在人结肠癌中的直接靶标第64-67页
        4.3.2 miR-203通过抑制SIK2表达来影响紫杉醇耐药性第67-70页
        4.3.3 miR-203可以靶向调节其他肿瘤细胞中的SIK2第70-71页
        4.3.4 SIK2的siRNA抑制或者敲除实验可提高紫杉醇耐药细胞的敏感性第71-73页
    4.4 讨论第73-76页
结论第76-78页
参考文献第78-90页
作者简介及在学期间取得的科研成果第90-92页
致谢第92页

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