前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
英文缩写词 | 第15-16页 |
文献综述 | 第16-30页 |
第一部分miR-203和SIK2在人结肠癌组织及细胞株中的表达变化及临床关系研究 | 第30-42页 |
1.1 材料 | 第30-32页 |
1.1.1 研究对象 | 第30-31页 |
1.1.2 主要实验抗体和试剂 | 第31-32页 |
1.1.3 主要实验仪器 | 第32页 |
1.2 实验方法 | 第32-36页 |
1.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
1.2.2 微阵列数据分析 | 第33-34页 |
1.2.3 实时荧光定量PCR实验 | 第34-36页 |
1.2.4 统计学方法 | 第36页 |
1.3 结果 | 第36-40页 |
1.3.1 人结肠癌组织与癌旁正常组织中miR-203的表达水平对照 | 第36-37页 |
1.3.2 人结肠癌细胞中miR-203的mRNA表达水平差异 | 第37-38页 |
1.3.3 miR-203的表达水平与结肠癌患者临床病理特征的关联性 | 第38-39页 |
1.3.4 人结肠癌组织及其癌旁正常组织中SIK2的表达水平对照 | 第39-40页 |
1.4 讨论 | 第40-42页 |
第二部分miR-203在结肠癌细胞表达变化及由此对化疗药物敏感性影响的研究 | 第42-50页 |
2.1 材料 | 第42-43页 |
2.1.1 细胞株 | 第42页 |
2.1.2 主要实验抗体和试剂 | 第42-43页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第43页 |
2.2 实验方法 | 第43-44页 |
2.2.1 细胞培养 | 第43页 |
2.2.2 转染 | 第43-44页 |
2.2.3 MTT测定法测定细胞增殖实验 | 第44页 |
2.2.4 统计学方法 | 第44页 |
2.3 结果 | 第44-47页 |
2.3.1 过表达miR-203对结肠癌细胞紫杉醇敏感性的影响 | 第44-45页 |
2.3.2 过表达miR-203对结肠癌细胞其他抗癌药物敏感性的影响 | 第45-47页 |
2.4 讨论 | 第47-50页 |
第三部分 过表达miR-203可提高结肠癌紫衫醇耐药细胞对紫衫醇的敏感性 | 第50-58页 |
3.1 材料 | 第50-52页 |
3.1.1 细胞株 | 第50页 |
3.1.2 主要实验抗体和试剂 | 第50-51页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第51-52页 |
3.2 实验方法 | 第52-53页 |
3.2.1 细胞培养 | 第52页 |
3.2.2 实时荧光定量PCR实验 | 第52页 |
3.2.3 构建紫杉醇耐药细胞 | 第52页 |
3.2.4 转染 | 第52页 |
3.2.5 MTT测定法测定细胞增殖实验 | 第52页 |
3.2.6 统计学方法 | 第52-53页 |
3.3 结果 | 第53-54页 |
3.3.1 HT-29紫杉醇耐药细胞可以耐受比亲代细胞更高浓度的紫杉醇 | 第53页 |
3.3.2 miR-203的表达与结肠癌细胞的紫杉醇耐药性呈负相关 | 第53-54页 |
3.4 转染ANTI-MIR-203反向证实过表达MIR-203可提高结肠癌细胞对紫杉醇的敏感性 | 第54-55页 |
3.5 讨论 | 第55-58页 |
第四部分miR-203通过靶向SIK2提高结肠癌对于紫衫醇耐药敏感性的研究 | 第58-76页 |
4.1 材料 | 第58-61页 |
4.1.1 研究对象 | 第58页 |
4.1.2 细胞株 | 第58页 |
4.1.3 主要实验抗体和试剂 | 第58-60页 |
4.1.4 主要实验仪器 | 第60-61页 |
4.2 方法 | 第61-64页 |
4.2.1 miR-203靶点预测 | 第61页 |
4.2.2 细胞培养 | 第61页 |
4.2.3 构建紫杉醇耐药细胞 | 第61页 |
4.2.4 转染 | 第61页 |
4.2.5 MTT测定法测定细胞增殖实验 | 第61-62页 |
4.2.6 荧光素酶实验 | 第62页 |
4.2.7 免疫组化 | 第62页 |
4.2.8 实时荧光定量PCR实验 | 第62页 |
4.2.9 Western-Blot法 | 第62-64页 |
4.2.10 统计学方法 | 第64页 |
4.3 结果 | 第64-73页 |
4.3.1 SIK2是miR-203在人结肠癌中的直接靶标 | 第64-67页 |
4.3.2 miR-203通过抑制SIK2表达来影响紫杉醇耐药性 | 第67-70页 |
4.3.3 miR-203可以靶向调节其他肿瘤细胞中的SIK2 | 第70-71页 |
4.3.4 SIK2的siRNA抑制或者敲除实验可提高紫杉醇耐药细胞的敏感性 | 第71-73页 |
4.4 讨论 | 第73-76页 |
结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-90页 |
作者简介及在学期间取得的科研成果 | 第90-92页 |
致谢 | 第92页 |