| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-40页 |
| 1.1 玉米胚乳发育与调控 | 第12-24页 |
| 1.1.1 胚乳早期发育 | 第13-14页 |
| 1.1.2 胚乳细胞分化 | 第14-23页 |
| 1.1.3 胚乳成熟过程 | 第23-24页 |
| 1.2 Dof类转录因子的研究进展 | 第24-34页 |
| 1.2.1 Dof转录因子的结构特点及识别序列 | 第24-26页 |
| 1.2.2 Dof转录因子的生物功能 | 第26-34页 |
| 1.3 植物转录因子的研究方法 | 第34-39页 |
| 1.3.1 生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 1.3.2 转录因子蛋白定位分析 | 第35页 |
| 1.3.3 转录因子与靶基因启动子区元件结合的分析 | 第35-37页 |
| 1.3.4 转录因子之间的互作分析 | 第37-39页 |
| 1.4 本论文研究的目的与意义 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-74页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-48页 |
| 2.1.1 宿主菌 | 第40页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第40页 |
| 2.1.3 植物材料 | 第40页 |
| 2.1.4 各种酶及试剂 | 第40-42页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 2.1.6 实验中使用的引物及其序列 | 第43-48页 |
| 2.2 常用培养基及溶液的配制 | 第48-50页 |
| 2.2.1 常用培养基的配制 | 第48-49页 |
| 2.2.2 常用溶液的配制 | 第49-50页 |
| 2.3 实验所需试剂的配制 | 第50-54页 |
| 2.3.1 碱裂解法小提质粒DNA | 第50页 |
| 2.3.2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50页 |
| 2.3.3 冻融转化法农杆菌感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| 2.3.4 SDS法提取植物基因组DNA | 第51页 |
| 2.3.5 CTAB法提取植物基因组DNA | 第51页 |
| 2.3.6 基因枪法转化玉米愈伤 | 第51页 |
| 2.3.7 SDS-PAGE | 第51-52页 |
| 2.3.8 Western blot | 第52页 |
| 2.3.9 酵母转录激活实验 | 第52页 |
| 2.3.10 His融合蛋白的表达纯化 | 第52页 |
| 2.3.11 GST融合蛋白的表达纯化 | 第52-53页 |
| 2.3.12 MBP融合蛋白的表达纯化 | 第53页 |
| 2.3.13 GST Pull-down实验 | 第53页 |
| 2.3.14 EMSA | 第53-54页 |
| 2.3.15 玉米原生质体的制备 | 第54页 |
| 2.3.16 石蜡切片实验 | 第54页 |
| 2.3.17 烟草系统检测转录因子对下游基因的调控 | 第54页 |
| 2.4 基本实验方法 | 第54-72页 |
| 2.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| 2.4.2 热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第55页 |
| 2.4.3 碱裂解法小量提取质粒DNA | 第55页 |
| 2.4.4 农杆菌感受态细胞的制备 | 第55-56页 |
| 2.4.5 转化农杆菌感受态细胞 | 第56-57页 |
| 2.4.6 SDS法小量提取植物总DNA | 第57页 |
| 2.4.7 CTAB法小量提取植物基因组DNA | 第57页 |
| 2.4.8 CTAB法大量提取植物基因组DNA | 第57-58页 |
| 2.4.9 PCR扩增目的基因 | 第58页 |
| 2.4.10 PCR产物或酶切产物的琼脂糖凝胶回收 | 第58-59页 |
| 2.4.11 植物组织总RNA的提取 | 第59-60页 |
| 2.4.12 RNA反转录、RT-PCR、半定量RT-PCR及qRT-PCR | 第60-61页 |
| 2.4.13 酵母转录激活实验 | 第61-62页 |
| 2.4.14 冻融法提取酵母质粒 | 第62-63页 |
| 2.4.15 GST标签融合蛋白的表达和纯化 | 第63-64页 |
| 2.4.16 MBP标签融合蛋白的表达和纯化 | 第64-65页 |
| 2.4.17 His标签融合蛋白的纯化 | 第65页 |
| 2.4.18 SDS-PAGE | 第65页 |
| 2.4.19 Western blot | 第65-66页 |
| 2.4.20 GST Pull-down实验 | 第66页 |
| 2.4.21 玉米原生质体的制备和转化 | 第66-67页 |
| 2.4.22 EMSA | 第67-68页 |
| 2.4.23 烟草系统检测转录因子对下游基因的调控 | 第68-69页 |
| 2.4.24 基因枪法转化玉米愈伤 | 第69-71页 |
| 2.4.25 玉米未成熟籽粒胚乳半薄切片的制备 | 第71页 |
| 2.4.26 玉米成熟种子胚乳扫描电镜观察 | 第71页 |
| 2.4.27 玉米未成熟种子胚乳透射电镜观察 | 第71-72页 |
| 2.5 数据库及软件 | 第72-74页 |
| 2.5.1 数据库及网站 | 第72-73页 |
| 2.5.2 常用软件及分析工具 | 第73-74页 |
| 第三章 玉米Dof类转录因子的鉴定和分析 | 第74-87页 |
| 3.1 前言 | 第74页 |
| 3.2 玉米Dof转录因子的鉴定和表达分析 | 第74-87页 |
| 3.2.1 玉米Dof转录因子家族的鉴定 | 第74-78页 |
| 3.2.3 ZmDofs基因的表达模式分析 | 第78-80页 |
| 3.2.4 ZmDof3 ZmDof28和ZmDof16基因编码序列的克隆 | 第80-81页 |
| 3.2.5 ZmDof3、ZmDof28和ZmDof16转录因子特性分析 | 第81-87页 |
| 第四章 玉米胚乳特异表达基因ZmESDP对种子发育的调控作用 | 第87-111页 |
| 4.1 前言 | 第87页 |
| 4.2 ZmESDP在玉米籽粒发育过程中的表达情况 | 第87-88页 |
| 4.3 转ZmESDP-OE超表达载体和ZmESDP-RNAi干扰载体玉米的获得 | 第88-93页 |
| 4.3.1 ZmESDP-OE超表达载体和ZmESDP-RNAi干扰载体的构建 | 第88-90页 |
| 4.3.2 玉米愈伤的遗传转化 | 第90-91页 |
| 4.3.3 T_0代再生植株的PCR检测 | 第91-93页 |
| 4.4 ZmESDP-OE和ZmESDP-RNAi转基因玉米的表型观察 | 第93-108页 |
| 4.4.1 ZmESDP-OE和ZmESDP-RNAi转基因玉米的表型观察 | 第93-94页 |
| 4.4.2 ZmESDP表达量降低导致玉米胚乳部分位置的糊粉层细胞发育异常 | 第94-98页 |
| 4.4.3 ZmESDP表达量降低导致玉米籽粒胚乳发育异常 | 第98-100页 |
| 4.4.4 ZmESDP在种子发育过程中能够影响碳水化合物的合成 | 第100-108页 |
| 4.5 ZmESDP在体外和体内能够与O2和PBF发生相互作用 | 第108-111页 |
| 第五章 讨论 | 第111-115页 |
| 5.1 在玉米中新鉴定了一个胚乳特异表达的Dof转录因子ZmESDP | 第111页 |
| 5.2 抑制ZmESDP基因的表达导致严重异常的籽粒表型 | 第111-112页 |
| 5.3 ZmESDP通过调节nkd基因的表达影响糊粉层部分位置细胞的发育 | 第112-113页 |
| 5.4 ZmESDP和PBF/O2在调节胚乳发育过程中的关系 | 第113页 |
| 5.5 ZmESDP-RNAi转基因的剂量效应 | 第113-115页 |
| 第六章 结论 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-127页 |
| 附录Ⅰ 响应干旱胁迫的谷子转录组研究 | 第127-160页 |
| 1.1 研究背景 | 第127-135页 |
| 1.1.1 谷子的特点和研究进展 | 第127-129页 |
| 1.1.2 非编码RNA的研究进展 | 第129-135页 |
| 1.2 响应干旱胁迫的谷子转录组研究结果 | 第135-154页 |
| 1.2.1 谷子干旱处理条件的选择和测序样品的准备 | 第135-136页 |
| 1.2.2 转录组测序、比对和拼接 | 第136-138页 |
| 1.2.3 干旱胁迫条件下谷子转录组的变化 | 第138-139页 |
| 1.2.4 差异表达基因的功能注释 | 第139-142页 |
| 1.2.5 谷子lncRNA的鉴定及功能分析 | 第142-151页 |
| 1.2.6 24-nt siRNAs在调节干旱响应基因表达方面的作用 | 第151-154页 |
| 1.3 小结 | 第154-155页 |
| 1.4 参考文献 | 第155-160页 |
| 附录Ⅱ | 第160-161页 |
| 附录Ⅲ | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162-163页 |
| 个人简历 | 第163页 |
