| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第11页 |
| 1.2 嫁接在作物育种中的发展与应用 | 第11页 |
| 1.3 植物体韧皮部远距离传递的RNA的种类 | 第11-16页 |
| 1.3.1 病毒RNA | 第11-12页 |
| 1.3.2 小分子RNA | 第12-13页 |
| 1.3.3 内源特异mRNA分子 | 第13-14页 |
| 1.3.4 韧皮部mRNA运输机制 | 第14-16页 |
| 1.4 植物病毒tRNA类似结构研究进展 | 第16-19页 |
| 1.4.1 tRNA简介 | 第16-17页 |
| 1.4.2 tRNA类似结构简介 | 第17-19页 |
| 1.5 成花素移动性研究进展 | 第19-22页 |
| 1.5.1 FT基因的作用 | 第19页 |
| 1.5.2 FT蛋白的移动 | 第19-20页 |
| 1.5.3 FT蛋白运输机制 | 第20-21页 |
| 1.5.4 FTmRNA移动性 | 第21-22页 |
| 1.6 课题的提出 | 第22-23页 |
| 第二章 砧穗间移动mRNA验证 | 第23-37页 |
| 1 引言 | 第23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.2 实验主要试剂和仪器 | 第24页 |
| 2.3 挑取基因验证方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 植物RNA提取 | 第24页 |
| 2.3.2 第一链cDNA合成 | 第24-25页 |
| 2.3.3 挑取基因引物设计 | 第25页 |
| 2.3.4 PCR扩增挑取的61个基因 | 第25-26页 |
| 2.3.5 目的片段切胶回收与测序 | 第26页 |
| 2.3.6 砧穗间移动mRNA实验验证方法 | 第26页 |
| 2.3.7 可移动基因TLS结构预测方法 | 第26-27页 |
| 2.3.8 柑橘BEL家族基因的进化及移动分析 | 第27页 |
| 3 结果分析 | 第27-35页 |
| 3.1 可移动mRNA实验验证 | 第27-31页 |
| 3.2 可移动基因TLS结构预测 | 第31-32页 |
| 3.3 柑橘BEL家族进化分析与可移动性验证 | 第32-35页 |
| 3.3.1 柑橘与拟南芥中BEL基因进化分析 | 第32-33页 |
| 3.3.2 BEL1-reatelated mRNA分子可移动性验证 | 第33-35页 |
| 4 结果讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 FT改造载体的早花功能和移动性检测 | 第37-57页 |
| 1 引言 | 第37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第37-39页 |
| 2.1.3 实验主要试剂和仪器 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-44页 |
| 2.2.1 植物超表达载体构建 | 第39-42页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第42-43页 |
| 2.2.3 番茄苗的嫁接方法 | 第43-44页 |
| 2.2.4 特异引物PCR鉴定FT mRNA分子的传递性 | 第44页 |
| 3 结果分析 | 第44-52页 |
| 3.1 超表达载体构建 | 第44-46页 |
| 3.1.1 35S::PtFT:GFP:tRNA22和35S::PtFT:tRNA22载体酶切 | 第45-46页 |
| 3.1.2 农杆菌菌液检测 | 第46页 |
| 3.2 FT改装载体遗传转化番茄 | 第46-47页 |
| 3.3 转基因番茄分子鉴定 | 第47-49页 |
| 3.3.1 DNA水平的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3.2 RNA水平的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.4 转基因番茄开花表型 | 第49-50页 |
| 3.5 转基因番茄与野生型番茄嫁接及FT移动性分析 | 第50-52页 |
| 3.5.1 嫁接植株表型 | 第50页 |
| 3.5.2 FT蛋白移动性分析 | 第50-51页 |
| 3.5.3 FTmRNA传递性分析 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-57页 |
| 4.1 PtFT基因功能 | 第53-54页 |
| 4.2 FT蛋白移动性 | 第54-55页 |
| 4.3 FT mRNA分子移动性 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 基因验证引物 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
