| 摘要 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1.1 欧李概述 | 第9页 |
| 1.2 果实中糖代谢的研究 | 第9-20页 |
| 1.2.1 果实中糖的生理功能 | 第9-10页 |
| 1.2.2 蔗糖和山梨醇的合成及运输 | 第10-12页 |
| 1.2.3 果实中糖积累的特点 | 第12-13页 |
| 1.2.4 果实糖代谢相关酶与糖转运蛋白 | 第13-20页 |
| 1.3 转录组测序技术 | 第20-22页 |
| 1.3.1 转录组测序技术概述 | 第20-21页 |
| 1.3.2 转录组测序技术在果实发育过程中的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究的意义及主要内容 | 第22-23页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第22页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 欧李果实糖代谢相关基因表达与糖积累的关系 | 第23-47页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 欧李果实中可溶性糖含量的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.2 总RNA的提取及检测 | 第25-26页 |
| 2.2.3 基因表达谱测序 | 第26页 |
| 2.2.4 测序结果组装与注释 | 第26-27页 |
| 2.2.5 糖代谢相关基因(Unigene)表达量分析 | 第27页 |
| 2.2.6 酶活性测定 | 第27-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-44页 |
| 2.3.1 欧李果实发育过程中可溶性糖含量的变化 | 第29-30页 |
| 2.3.2 测序结果分析 | 第30-32页 |
| 2.3.3 测序结果组装与注释 | 第32-33页 |
| 2.3.4 欧李糖代谢相关基因的筛选 | 第33页 |
| 2.3.5 欧李果实发育过程中糖代谢相关酶基因的表达分析 | 第33-37页 |
| 2.3.6 欧李果实发育过程中编码糖转运蛋白基因的表达分析 | 第37-38页 |
| 2.3.7 欧李糖代谢相关酶在果实发育过程中的活性变化 | 第38-40页 |
| 2.3.8 欧李果实发育过程中糖代谢相关酶基因的表达与酶活性的关系 | 第40-42页 |
| 2.3.9 欧李果实发育过程中糖代谢相关基因的表达与糖积累的关系 | 第42-43页 |
| 2.3.10 欧李果实发育过程中糖代谢相关酶的活性变化与糖积累的关系 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-47页 |
| 2.4.1 欧李果实中可溶性糖积累的特性 | 第44-45页 |
| 2.4.2 糖代谢相关基因在欧李果实糖积累中的作用 | 第45-47页 |
| 第三章 欧李果实糖代谢相关基因的克隆及时空表达模式 | 第47-97页 |
| 3.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第47页 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 | 第47-48页 |
| 3.2 试验方法 | 第48-53页 |
| 3.2.1 欧李总RNA的提取 | 第48页 |
| 3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第48页 |
| 3.2.3 欧李糖代谢相关基因的克隆及分析 | 第48-51页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR分析 | 第51-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-96页 |
| 3.3.1 欧李糖代谢相关酶基因的克隆与分析 | 第54-84页 |
| 3.3.2 欧李编码糖转运蛋白基因的克隆与分析 | 第84-89页 |
| 3.3.3 欧李糖代谢相关酶基因的时空表达模式 | 第89-95页 |
| 3.3.4 欧李编码糖转运蛋白基因的时空表达模式 | 第95-96页 |
| 3.4 讨论 | 第96-97页 |
| 3.4.1 基因克隆及生物信息学分析 | 第96页 |
| 3.4.2 糖代谢基因在欧李生长发育中的表达 | 第96-97页 |
| 第四章 欧李蔗糖代谢酶基因对烟草的转化 | 第97-117页 |
| 4.1 试验材料 | 第97-98页 |
| 4.1.1 植物材料、菌株及载体 | 第97页 |
| 4.1.2 酶和试剂 | 第97页 |
| 4.1.3 溶液及培养基配制 | 第97-98页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第98页 |
| 4.2 试验方法 | 第98-105页 |
| 4.2.1 表达载体的构建 | 第98-102页 |
| 4.2.2 农杆菌工程菌的获得与鉴定 | 第102-103页 |
| 4.2.3 表达载体对烟草的遗传转化 | 第103-104页 |
| 4.2.4 转基因烟草株系的PCR分析 | 第104页 |
| 4.2.5 转基因烟草株系的GUS染色分析 | 第104-105页 |
| 4.2.6 转基因烟草株系的荧光定量PCR分析 | 第105页 |
| 4.2.7 转基因烟草株系的酶活性及可溶性糖含量分析 | 第105页 |
| 4.3 结果与分析 | 第105-115页 |
| 4.3.1 过表达载体的构建 | 第105-106页 |
| 4.3.2 干扰表达载体的构建 | 第106-108页 |
| 4.3.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第108-109页 |
| 4.3.4 转基因烟草株系的PCR分析 | 第109-111页 |
| 4.3.5 转基因烟草株系的GUS检测 | 第111页 |
| 4.3.6 转基因烟草株系的荧光定量PCR分析 | 第111-112页 |
| 4.3.7 转基因烟草株系的酶活性分析 | 第112-113页 |
| 4.3.8 转基因烟草株系的可溶性糖含量分析 | 第113-115页 |
| 4.4 讨论 | 第115-117页 |
| 4.4.1 RNAi表达载体的构建 | 第115页 |
| 4.4.2 外源基因过量表达对烟草叶片可溶性糖含量的影响 | 第115-117页 |
| 研究结论、创新点与展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-127页 |
| Abstract | 第127-129页 |
| 附录 | 第130-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
