| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 SBP-box基因家族的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2 SPL6基因的功能 | 第14-16页 |
| 1.3 烟草简介及叶片表皮毛的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4 本研究的主要内容及意义 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第18页 |
| 1.4.2 本研究的意义及创新之处 | 第18-20页 |
| 第2章 普通烟草NtabSPL6-1和NtabSPL6-4基因植物双元表达载体的构建 | 第20-31页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料、载体与菌株 | 第20-21页 |
| 2.1.2 主要试剂与溶液 | 第21-22页 |
| 2.1.3 引物设计 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 烟草叶片总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 烟草cDNA的合成 | 第23页 |
| 2.2.3 烟草NtabSPL6-1和NtabSPL6-4基因编码序列的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.4 目的片段和载体的酶切与连接 | 第24页 |
| 2.2.5 大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备及转化 | 第24-25页 |
| 2.2.6 农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化 | 第25-26页 |
| 2.2.7 根瘤农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-30页 |
| 2.3.1 烟草总RNA质量检测 | 第26-27页 |
| 2.3.2 烟草NtabSPL6-1和NtabSPL6-4植物双元表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.3 NtabSPL6-1和NtabSPL6-4植物双元表达载体的农杆菌转化 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 第3章 NtabSPL6-和NtabSPL6-4转基因拟南芥和烟草的获得及鉴定 | 第31-37页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第31页 |
| 3.1.1 植物材料与菌株 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂与溶液 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 拟南芥和烟草的种植 | 第31-32页 |
| 3.2.2 拟南芥的遗传转化 | 第32页 |
| 3.2.3 烟草的遗传转化 | 第32-33页 |
| 3.2.4 转基因植株的鉴定 | 第33页 |
| 3.3 实验结果 | 第33-35页 |
| 3.3.1 转基因植株的获得 | 第33-35页 |
| 3.3.2 转基因植株的PCR鉴定 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第4章 NtabSPL6-1和NtabSPL6-4转基因拟南芥和烟草的表型特征 | 第37-49页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第37页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 4.1.2 主要试剂与溶液 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 4.2.1 转基因烟草的表型观察 | 第37-38页 |
| 4.2.2 烟草叶片组织石蜡切片的制作 | 第38页 |
| 4.2.3 利用扫描电镜和透射电镜观察表型 | 第38-39页 |
| 4.3 实验结果 | 第39-47页 |
| 4.3.1 NtabSPL6-1基因对拟南芥莲座叶片的影响 | 第39页 |
| 4.3.2 NtabSPL6-1对拟南芥茎生叶的影响 | 第39-40页 |
| 4.3.3 NtabSPL6-1基因对烟草生长发育的影响 | 第40-41页 |
| 4.3.4 NtabSPL6-1基因对烟草叶片形态的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.5 秦烟95野生型和NtabSPL6-1过表达植株叶片的显微结构 | 第42-43页 |
| 4.3.6 秦烟95野生型和NtabSPL6-1过表达植株叶片的扫描电镜观察 | 第43-44页 |
| 4.3.7 秦烟95野生型和NtabSPL6-1过表达植株叶片的透射电镜观察 | 第44-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第5章 NtabSPL6-1互作蛋白的筛选 | 第49-62页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第49页 |
| 5.1.1 材料、载体与菌株 | 第49页 |
| 5.1.2 试剂 | 第49页 |
| 5.2 引物设计 | 第49-50页 |
| 5.3 实验方法 | 第50-52页 |
| 5.3.1 原核表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 5.3.2 蛋白质的诱导表达和纯化 | 第51页 |
| 5.3.3 NtabSPL6-1抗体制备 | 第51-52页 |
| 5.3.4 互作蛋白的CoIP-MS鉴定 | 第52页 |
| 5.4 实验结果 | 第52-58页 |
| 5.4.1 原核表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 5.4.2 蛋白质的诱导表达与纯化 | 第53-54页 |
| 5.4.3 NtabSPL6-1抗体制备 | 第54-55页 |
| 5.4.4 CoIP-MS实验结果 | 第55-56页 |
| 5.4.5 CoIP-MS检测蛋白的生物信息学分析 | 第56-58页 |
| 5.5 讨论 | 第58-62页 |
| 第6章 烟草酵母双杂交cDNA文库的建立和诱饵载体的构建 | 第62-75页 |
| 6.1 材料与试剂 | 第62-65页 |
| 6.1.1 植物材料、载体与菌株 | 第62-63页 |
| 6.1.2 主要试剂与溶液 | 第63-65页 |
| 6.2 引物设计 | 第65-66页 |
| 6.3 实验方法 | 第66-69页 |
| 6.3.1 烟草叶片酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第66-68页 |
| 6.3.2 构建BD诱饵载体 | 第68-69页 |
| 6.3.3 诱饵蛋白自激活能力的检测 | 第69页 |
| 6.4 实验结果 | 第69-74页 |
| 6.4.1 烟草叶片酵母双杂交cDNA文库的制备 | 第69-70页 |
| 6.4.2 BD诱饵载体的构建 | 第70-72页 |
| 6.4.3 诱饵蛋白自激活能力的检测 | 第72-74页 |
| 6.5 讨论 | 第74-75页 |
| 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
