| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 文献回顾 | 第16-24页 |
| 实验一 CD147 分子促进肝癌细胞糖酵解的作用研究 | 第24-42页 |
| 1 实验材料 | 第24-27页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 1.2 实验动物 | 第25页 |
| 1.3 细胞系 | 第25页 |
| 1.4 主要试剂 | 第25-26页 |
| 1.5 耗材 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-35页 |
| 2.1 细胞培养 | 第27页 |
| 2.2 构建稳定干涉 CD147 基因的肝癌细胞株 HepG222 | 第27-28页 |
| 2.3 免疫印迹技术 | 第28-29页 |
| 2.4 荷瘤小鼠模型构建 | 第29-30页 |
| 2.5 免疫组织化学技术 | 第30-31页 |
| 2.6 细胞葡萄糖摄取检测 | 第31-32页 |
| 2.7 细胞乳酸排出检测 | 第32-33页 |
| 2.8 细胞外 pH 检测 | 第33页 |
| 2.9 细胞乳酸脱氢酶活性检测 | 第33-34页 |
| 2.10 细胞糖代谢中间产物的色谱/质谱检测 | 第34页 |
| 2.11 荷瘤小鼠体内18F-FDG 摄取率检测 | 第34-35页 |
| 2.12 统计学处理 | 第35页 |
| 3 实验结果 | 第35-40页 |
| 3.1 CD147 分子干涉肝癌细胞的建立及 CD147 分子的表达鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2 CD147 分子显著促进肝癌细胞的糖酵解途径 | 第36-38页 |
| 3.3 CD147 分子显著促进裸鼠体内肿瘤的糖摄取速率 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 实验二 CD147 分子抑制肝癌细胞线粒体氧化呼吸功能的作用研究 | 第42-59页 |
| 1 实验材料 | 第42-44页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 1.3 细胞系 | 第43页 |
| 1.4 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.5 耗材 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-50页 |
| 2.1 肝癌表达谱芯片数据的筛选 | 第44-45页 |
| 2.2 肝癌组织 DNA 提取 | 第45-46页 |
| 2.3 线粒体 DNA 拷贝数检测 | 第46页 |
| 2.4 线粒体 mitotracker 荧光染色 | 第46-47页 |
| 2.5 线粒体电子透射显微镜观察 | 第47-48页 |
| 2.6 细胞耗氧速率检测 | 第48-49页 |
| 2.7 线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性检测 | 第49页 |
| 2.8 免疫组化染色、评分、相关性分析 | 第49-50页 |
| 2.9 统计学处理 | 第50页 |
| 3 实验结果 | 第50-58页 |
| 3.1 肝癌中核编码线粒体基因与 CD147 分子表达显著负相关 | 第50-52页 |
| 3.2 肝癌细胞中线粒体 DNA、线粒体拷贝数与 CD147 分子表达显著负相关 | 第52-54页 |
| 3.3 肝癌组织中线粒体 DNA、线粒体拷贝数与 CD147 分子表达显著负相关 | 第54-56页 |
| 3.4 CD147 分子可显著抑制肝癌细胞中线粒体氧化呼吸功能 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 实验三 CD147 分子调控肝癌细胞糖代谢重编程的分子机制研究 | 第59-95页 |
| 1 实验材料 | 第59-62页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第59-60页 |
| 1.3 细胞系 | 第60-61页 |
| 1.4 主要试剂 | 第61-62页 |
| 1.5 耗材 | 第62页 |
| 2 实验方法 | 第62-73页 |
| 2.1 基于新一代测序技术的肝癌细胞转录组测序 | 第62-67页 |
| 2.2 qPCR 技术检测基因表达 | 第67-69页 |
| 2.3 免疫组化染色、评分及相关性分析 | 第69页 |
| 2.4 免疫印迹技术 | 第69-70页 |
| 2.5 免疫荧光染色 | 第70页 |
| 2.6 基因过表达及干涉 | 第70-71页 |
| 2.7 细胞内乳酸检测 | 第71页 |
| 2.8 细胞葡萄糖摄取检测 | 第71页 |
| 2.9 细胞乳酸排出检测 | 第71-72页 |
| 2.10 细胞磷酸果糖激酶活性检测 | 第72-73页 |
| 2.11 线粒体 DNA 拷贝数检测 | 第73页 |
| 2.12 线粒体 mitotracker 荧光染色 | 第73页 |
| 2.13 细胞耗氧速率检测 | 第73页 |
| 2.14 线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性检测 | 第73页 |
| 2.15 统计学处理 | 第73页 |
| 3 实验结果 | 第73-91页 |
| 3.1 CD147 分子显著促进肝癌细胞糖酵解途径中效应酶的表达 | 第73-75页 |
| 3.2 CD147 分子通过激活 PI3K/Akt/MDM2 信号促进 p53 分子降解 | 第75-79页 |
| 3.3 CD147 分子通过促进 MCT1 的膜定位与表达激活 PI3K/Akt 信号 | 第79-83页 |
| 3.4 CD147 分子通过 p53 依赖的信号途径促进肝癌细胞糖酵解 | 第83-87页 |
| 3.5 CD147 分子通过 p53 依赖的信号途径抑制肝癌细胞线粒体氧化磷酸化 | 第87-91页 |
| 4 讨论 | 第91-95页 |
| 小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 个人简历和研究成果 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
