| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-57页 |
| 第一章 旋毛虫与旋毛虫病 | 第15-25页 |
| 1 病原 | 第15-18页 |
| 1.1 旋毛虫的分类及分布 | 第15页 |
| 1.2 旋毛虫形态特征 | 第15-16页 |
| 1.3 旋毛虫生活史 | 第16-18页 |
| 2 流行病学 | 第18-19页 |
| 2.1 传染源 | 第18页 |
| 2.2 传播方式 | 第18-19页 |
| 2.3 分布与流行 | 第19页 |
| 3 旋毛虫病 | 第19-22页 |
| 3.1 症状 | 第19-20页 |
| 3.2 诊断与治疗 | 第20页 |
| 3.3 预防 | 第20-22页 |
| 参考文献 | 第22-25页 |
| 第二章 核酸疫苗的研究进展 | 第25-37页 |
| 1 核酸疫苗的研究简况 | 第25-30页 |
| 1.1 核酸疫苗的概念 | 第25页 |
| 1.2 核酸疫苗的优缺点 | 第25-26页 |
| 1.3 核酸疫苗的免疫机理 | 第26-27页 |
| 1.4 核酸疫苗的接种方法与途径 | 第27-29页 |
| 1.5 核酸疫苗的发展空间 | 第29-30页 |
| 2 寄生虫核酸疫苗的研究进展 | 第30-33页 |
| 2.1 利氏曼病 | 第31页 |
| 2.2 克氏锥虫病 | 第31页 |
| 2.3 弓形虫病 | 第31-32页 |
| 2.4 血吸虫病 | 第32页 |
| 2.5 旋毛虫病 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| 第三章 醛缩酶、烯醇化酶和己糖激酶研究进展 | 第37-57页 |
| 1 醛缩酶的研究进展 | 第37-41页 |
| 1.1 醛缩酶的结构与分布 | 第37-38页 |
| 1.2 醛缩酶的催化途径 | 第38-39页 |
| 1.3 醛缩酶活性的测定研究 | 第39-40页 |
| 1.4 寄生虫醛缩酶的研究进展 | 第40-41页 |
| 2 烯醇化酶的研究进展 | 第41-46页 |
| 2.1 烯醇化酶的分布 | 第41-42页 |
| 2.2 烯醇化酶的蛋白结构 | 第42-43页 |
| 2.3 烯醇化酶的催化途径 | 第43-44页 |
| 2.4 烯醇化酶的生物学功能 | 第44-45页 |
| 2.5 烯醇化酶在寄生虫中的研究进展 | 第45-46页 |
| 3 己糖激酶的研究进展 | 第46-50页 |
| 3.1 己糖激酶的分布 | 第46-47页 |
| 3.2 己糖激酶的催化途径 | 第47-48页 |
| 3.3 己糖激酶的生物学活性功能 | 第48页 |
| 3.4 己糖激酶在寄生虫中的研究进展 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 第二篇 实验研究 | 第57-123页 |
| 第四章 旋毛虫醛缩酶基因克隆、原核表达、重组蛋白酶活性分析及其真核表达质粒的构建 | 第57-79页 |
| 1 材料和与试剂 | 第58-61页 |
| 1.1 虫株 | 第58页 |
| 1.2 实验动物 | 第58页 |
| 1.3 质粒、菌株和主要试剂 | 第58页 |
| 1.4 主要溶液及其配置 | 第58-60页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-67页 |
| 2.1 旋毛虫肌幼虫的获取 | 第61页 |
| 2.2 旋毛虫肌幼虫总RNA的提取 | 第61页 |
| 2.3 引物设计与合成 | 第61页 |
| 2.4 旋毛虫肌幼虫cDNA的合成 | 第61-62页 |
| 2.5 Tsald基因的扩增 | 第62-63页 |
| 2.6 pMD18-T-Tsald重组质粒的构建 | 第63-65页 |
| 2.7 pET32a-Tsald重组表达质粒的构建 | 第65页 |
| 2.8 TsAld基因序列的多重比较分析 | 第65页 |
| 2.9 pET32a-Tsald重组表达质粒在大肠杆菌中的表达 | 第65页 |
| 2.10 表达产物在菌体中的分布鉴定 | 第65-66页 |
| 2.11 重组蛋白的纯化 | 第66页 |
| 2.12 抗血清制备与Western blot分析 | 第66-67页 |
| 2.13 重组蛋白的活性分析 | 第67页 |
| 2.14 pVAX1-Tsald质粒的构建 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-73页 |
| 3.1 旋毛虫Tsald基因的扩增 | 第67-68页 |
| 3.2 原核表达质粒pET32a-Tsald的构建 | 第68-69页 |
| 3.3 Tsald在大肠杆菌中的表达、分布及纯化 | 第69-70页 |
| 3.4 Western blot分析 | 第70-71页 |
| 3.5 Tsald基因序列的多重比较分析 | 第71-72页 |
| 3.6 重组蛋白的酶活性分析 | 第72-73页 |
| 3.7 真核表达质粒pVAX1-Tsald的酶切鉴定 | 第73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 第五章 旋毛虫烯醇化酶和己醣激酶基因的克隆、原核表达及真核表达质粒的构建 | 第79-95页 |
| 1 材料与试剂 | 第80页 |
| 1.1 虫株与实验动物 | 第80页 |
| 1.2 菌种、质粒和主要试剂 | 第80页 |
| 1.3 主要溶液及其配置 | 第80页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第80页 |
| 2 实验方法 | 第80-82页 |
| 2.0 旋毛虫总RNA的提取 | 第80页 |
| 2.1 引物的设计和合成 | 第80-81页 |
| 2.2 Tseno基因和Tshk2基因的扩增 | 第81页 |
| 2.3 Tseno与Tshk2基因序列的多重比较分析 | 第81页 |
| 2.4 pMD18-T-Tseno和pMD18-T-Tshk2重组质粒的构建 | 第81页 |
| 2.5 pET32a-Tseno和pET32a-Tshk2重组表达质粒的构建 | 第81页 |
| 2.6 Tseno和Tshk2在大肠杆菌中的表达 | 第81页 |
| 2.7 表达产物在菌体中的分布鉴定 | 第81页 |
| 2.8 重组蛋白的纯化 | 第81-82页 |
| 2.9 抗血清制备与Western blot分析 | 第82页 |
| 2.10 pVAX1-Tseno和pVAX1-Tshk2真核表达质粒的构建 | 第82页 |
| 3 结果 | 第82-90页 |
| 3.1 旋毛虫Tseno基因的扩增 | 第82-83页 |
| 3.2 旋毛虫Tshk2基因的扩增 | 第83-84页 |
| 3.3 Tseno与Tshk2基因序列的多重比较分析 | 第84-85页 |
| 3.4 重组表达质粒pET32a-Tseno和pET32a-Tshk2的构建 | 第85-86页 |
| 3.5 Tseno和Tshk2在大肠杆菌中的表达、分布 | 第86-88页 |
| 3.6 Western blot分析 | 第88-89页 |
| 3.7 真核表达质粒pVAX1-Tseno和pVAX1-Tshk2的酶切鉴定 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 第六章 旋毛虫Tsald、Tseno和Tshk2的免疫保护性实验 | 第95-123页 |
| 1 材料 | 第96页 |
| 1.1 实验动物与虫株 | 第96页 |
| 1.2 载体与菌株 | 第96页 |
| 1.3 酶与试剂 | 第96页 |
| 2 方法 | 第96-99页 |
| 2.1 重组真核质粒的大量制备 | 第97页 |
| 2.2 实验动物分组及免疫 | 第97页 |
| 2.3 Western blot鉴定真核质粒在体内的表达 | 第97页 |
| 2.4 流式技术检测T细胞亚类 | 第97页 |
| 2.5 血清抗体水平的检测 | 第97-98页 |
| 2.6 血清细胞因子检测 | 第98-99页 |
| 2.7 攻虫保护实验 | 第99页 |
| 3 结果 | 第99-115页 |
| 3.1 Western blot检测质粒DNA在小鼠体内表达情况 | 第99-100页 |
| 3.2 血清抗体水平的检测 | 第100-107页 |
| 3.3 小鼠脾脏淋巴细胞中CD4+、CD8+的检测结果 | 第107-110页 |
| 3.4 血清细胞因子水平的检测 | 第110-114页 |
| 3.5 攻虫保护试验 | 第114-115页 |
| 4 讨论 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-123页 |
| 全文总结 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
