摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词表 | 第10-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 金黄色葡萄球菌概述 | 第14页 |
1.2 S.aureus感染机制 | 第14-15页 |
1.3 S.aureus疫苗研究进展 | 第15-18页 |
1.3.1 S.aureus疫苗抗原选择 | 第15-18页 |
1.3.2 葡萄球菌疫苗设计策略 | 第18页 |
1.4 多糖作为佐剂的研究进展 | 第18-21页 |
1.4.1 目前常用佐剂 | 第18-20页 |
1.4.2 乳酸菌胞外多糖(EPS)概述 | 第20页 |
1.4.3 乳酸菌胞外多糖的免疫调节功能 | 第20-21页 |
1.5 本课题的研究意义 | 第21-22页 |
第二章 实验部分 | 第22-71页 |
2.1 试验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 菌种与载体 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器及设备 | 第23页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第23-24页 |
2.1.5 实验动物 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-38页 |
2.2.1 EsxA、EsxB、FhuD2的CDS区的克隆及鉴定 | 第24-28页 |
2.2.2 EsxA、EsxB的融合及鉴定及Hla的无毒突变 | 第28-30页 |
2.2.3 表达EsxA-EsxB、HlaH35L、FhuD2蛋白的载体构建及蛋白表达检测 | 第30-31页 |
2.2.4 重组表达蛋白的纯化及检测 | 第31-32页 |
2.2.5 小鼠分组及免疫 | 第32-34页 |
2.2.6 小鼠金黄色葡萄球菌感染及免疫保护效果 | 第34-35页 |
2.2.7 抗体水平检测 | 第35页 |
2.2.8 小鼠脾脏T淋巴细胞增殖检测 | 第35-36页 |
2.2.9 细胞因子检测 | 第36-37页 |
2.2.10 胞内细胞因子染色及流式细胞检测 | 第37-38页 |
2.3 结果与分析 | 第38-68页 |
2.3.1 目的序列的克隆及载体构建 | 第38-41页 |
2.3.2 目的蛋白EsxA-EsxB、HlaH35L和FhuD2诱导表达与纯化 | 第41-45页 |
2.3.3 混合抗原疫苗对S.aureus的小鼠肺炎模型保护效果评价 | 第45-48页 |
2.3.4 混合抗原疫苗的免疫效果评价 | 第48-56页 |
2.3.5 EPS029免疫佐剂对S.aureus的小鼠肺炎模型保护效果评价 | 第56-59页 |
2.3.6 EPS029作为佐剂的免疫效果评价 | 第59-68页 |
2.4 讨论 | 第68-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
附录一 EsxA-EsxB测序结果 | 第81-82页 |
附录二 HlaH35L测序结果 | 第82-83页 |
附录三 FhuD2测序结果 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |