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陆地棉开花促进因子基因GhFPF1的克隆、表达及功能分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第13-28页
    1.1 FPF1 基因研究概述第13-14页
    1.2 植物“避荫”反应研究进展第14-19页
        1.2.1 光信号第15-16页
        1.2.2 光受体第16-17页
        1.2.3 茎伸长与避荫反应第17-18页
        1.2.4 叶片生长与避荫反应第18页
        1.2.5 开花与避荫反应第18-19页
    1.3 高等植物花芽分化分子机理第19-25页
        1.3.1 光周期与花芽分化第20-22页
        1.3.2 温度与植物成花第22-23页
        1.3.3 自主途径与植物开花第23-24页
        1.3.4 赤霉素途径调控花芽分化第24-25页
    1.4 棉花花芽分化及相关基因研究概述第25-27页
    1.5 本研究的目的和意义第27-28页
第二章 棉花中 FPF1 基因家族的克隆与序列分析第28-40页
    2.1 材料第28-29页
        2.1.1 数据库资源及序列分析软件第28页
        2.1.2 试验材料第28页
        2.1.3 酶与试剂第28-29页
        2.1.4 仪器设备第29页
    2.2 方法第29-35页
        2.2.1 RNA 提取与 cDNA 合成第29-31页
        2.2.2 序列预测与分析第31-32页
        2.2.3 基因克隆第32-35页
        2.2.4 生物信息学分析第35页
    2.3 结果与分析第35-39页
        2.3.1 序列检索与比对分析第35-36页
        2.3.2 陆地棉 GhFPF1 及其同源基因克隆第36页
        2.3.3 序列分析第36-39页
    2.4 讨论第39-40页
第三章 GhFPF1 基因家族表达模式分析及优势表达基因的筛选第40-47页
    3.1 材料第40页
        3.1.1 试验材料第40页
        3.1.2 酶与试剂第40页
        3.1.3 仪器设备第40页
    3.2 方法第40-42页
        3.2.1 RNA 提取和 cDNA 合成第40页
        3.2.2 荧光定量 PCR第40-42页
    3.3 结果与分析第42-45页
        3.3.1 GhFPF1 基因家族组织表达特异性第42-43页
        3.3.2 优势表达基因筛选第43-44页
        3.3.3 GhFPF1 基因在不同时期顶芽表达量分析第44-45页
    3.4 讨论第45-47页
第四章 GhFPF1 亚细胞定位及对激素的响应第47-62页
    4.1 材料第47页
        4.1.1 试验材料第47页
        4.1.2 酶与试剂第47页
        4.1.3 仪器设备第47页
    4.2 方法第47-56页
        4.2.1 基因枪轰击洋葱表皮第47-51页
        4.2.2 RACE 策略第51-53页
        4.2.3 GhFPF15’端启动子缺失突变第53-54页
        4.2.4 外源激素处理第54页
        4.2.5 抗体制备及 Western Blot 检测第54-56页
    4.3 结果与分析第56-60页
        4.3.1 GhFPF1 亚细胞定位结果第56页
        4.3.2 5 '-RACE PCR 及 3'-RACE PCR 扩增结果第56-57页
        4.3.3 GhFPF1 启动子元件分析及缺失设计第57-59页
        4.3.4 GhFPF1 对外源激素的响应第59-60页
        4.3.5 抗体制备及检测结果第60页
    4.4 讨论第60-62页
第五章 GhFPF1 正调控拟南芥开花时间第62-73页
    5.1 材料第62页
        5.1.1 试验材料第62页
        5.1.2 酶与试剂第62页
        5.1.3 仪器设备第62页
    5.2 方法第62-67页
        5.2.1 pBI121-GhFPF1 表达载体的构建第62-63页
        5.2.2 重组质粒转化农杆菌第63-64页
        5.2.3 拟南芥的种植第64-65页
        5.2.4 花序浸染法转化拟南芥第65页
        5.2.5 转基因阳性植株的鉴定第65-67页
    5.3 结果与分析第67-70页
        5.3.1 转基因阳性植株的筛选与鉴定第67-68页
        5.3.2 转基因拟南芥提前开花第68-69页
        5.3.3 拟南芥內源开花时间基因的表达量变化第69-70页
    5.4 讨论第70-73页
第六章 GhFPF1 在拟南芥中参与调节避荫反应第73-82页
    6.1 材料第73页
        6.1.1 试验材料第73页
        6.1.2 酶与试剂第73页
        6.1.3 仪器设备第73页
    6.2 方法第73-76页
        6.2.1 拟南芥叶柄和下胚轴长度的测量第73-74页
        6.2.2 拟南芥叶绿素含量的测定第74页
        6.2.3 扫描电镜观察第74页
        6.2.4 拟南芥中相关基因表达量检测第74-75页
        6.2.5 生长素含量测定第75-76页
    6.3 结果与分析第76-79页
        6.3.1 拟南芥叶柄和下胚轴的测量第76-77页
        6.3.2 下胚轴扫描电镜观察第77页
        6.3.3 生长素含量测定第77-78页
        6.3.4 转基因拟南芥呈现“避荫”反应第78-79页
    6.4 讨论第79-82页
第七章 GhFPF1 在棉花中的遗传转化第82-91页
    7.1 材料第82页
        7.1.1 试验材料第82页
        7.1.2 菌株与载体第82页
        7.1.3 试剂第82页
        7.1.4 仪器设备第82页
    7.2 方法第82-86页
        7.2.1 培养基配方与配制第82-84页
        7.2.2 农杆菌介导棉花的遗传转化第84-85页
        7.2.3 转基因棉花阳性植株的检测第85-86页
    7.3 结果与分析第86-90页
        7.3.1 GhFPF1 过表达转化棉花第86-88页
        7.3.2 转基因棉花阳性植株的筛选第88-89页
        7.3.3 转基因棉花后代表型观察第89-90页
    7.4 讨论第90-91页
第八章 结论与展望第91-93页
    8.1 全文结论第91-92页
    8.2 展望第92-93页
参考文献第93-103页
致谢第103-104页
作者简介第104页

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