摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
1.1 FPF1 基因研究概述 | 第13-14页 |
1.2 植物“避荫”反应研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1 光信号 | 第15-16页 |
1.2.2 光受体 | 第16-17页 |
1.2.3 茎伸长与避荫反应 | 第17-18页 |
1.2.4 叶片生长与避荫反应 | 第18页 |
1.2.5 开花与避荫反应 | 第18-19页 |
1.3 高等植物花芽分化分子机理 | 第19-25页 |
1.3.1 光周期与花芽分化 | 第20-22页 |
1.3.2 温度与植物成花 | 第22-23页 |
1.3.3 自主途径与植物开花 | 第23-24页 |
1.3.4 赤霉素途径调控花芽分化 | 第24-25页 |
1.4 棉花花芽分化及相关基因研究概述 | 第25-27页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 棉花中 FPF1 基因家族的克隆与序列分析 | 第28-40页 |
2.1 材料 | 第28-29页 |
2.1.1 数据库资源及序列分析软件 | 第28页 |
2.1.2 试验材料 | 第28页 |
2.1.3 酶与试剂 | 第28-29页 |
2.1.4 仪器设备 | 第29页 |
2.2 方法 | 第29-35页 |
2.2.1 RNA 提取与 cDNA 合成 | 第29-31页 |
2.2.2 序列预测与分析 | 第31-32页 |
2.2.3 基因克隆 | 第32-35页 |
2.2.4 生物信息学分析 | 第35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-39页 |
2.3.1 序列检索与比对分析 | 第35-36页 |
2.3.2 陆地棉 GhFPF1 及其同源基因克隆 | 第36页 |
2.3.3 序列分析 | 第36-39页 |
2.4 讨论 | 第39-40页 |
第三章 GhFPF1 基因家族表达模式分析及优势表达基因的筛选 | 第40-47页 |
3.1 材料 | 第40页 |
3.1.1 试验材料 | 第40页 |
3.1.2 酶与试剂 | 第40页 |
3.1.3 仪器设备 | 第40页 |
3.2 方法 | 第40-42页 |
3.2.1 RNA 提取和 cDNA 合成 | 第40页 |
3.2.2 荧光定量 PCR | 第40-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-45页 |
3.3.1 GhFPF1 基因家族组织表达特异性 | 第42-43页 |
3.3.2 优势表达基因筛选 | 第43-44页 |
3.3.3 GhFPF1 基因在不同时期顶芽表达量分析 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
第四章 GhFPF1 亚细胞定位及对激素的响应 | 第47-62页 |
4.1 材料 | 第47页 |
4.1.1 试验材料 | 第47页 |
4.1.2 酶与试剂 | 第47页 |
4.1.3 仪器设备 | 第47页 |
4.2 方法 | 第47-56页 |
4.2.1 基因枪轰击洋葱表皮 | 第47-51页 |
4.2.2 RACE 策略 | 第51-53页 |
4.2.3 GhFPF15’端启动子缺失突变 | 第53-54页 |
4.2.4 外源激素处理 | 第54页 |
4.2.5 抗体制备及 Western Blot 检测 | 第54-56页 |
4.3 结果与分析 | 第56-60页 |
4.3.1 GhFPF1 亚细胞定位结果 | 第56页 |
4.3.2 5 '-RACE PCR 及 3'-RACE PCR 扩增结果 | 第56-57页 |
4.3.3 GhFPF1 启动子元件分析及缺失设计 | 第57-59页 |
4.3.4 GhFPF1 对外源激素的响应 | 第59-60页 |
4.3.5 抗体制备及检测结果 | 第60页 |
4.4 讨论 | 第60-62页 |
第五章 GhFPF1 正调控拟南芥开花时间 | 第62-73页 |
5.1 材料 | 第62页 |
5.1.1 试验材料 | 第62页 |
5.1.2 酶与试剂 | 第62页 |
5.1.3 仪器设备 | 第62页 |
5.2 方法 | 第62-67页 |
5.2.1 pBI121-GhFPF1 表达载体的构建 | 第62-63页 |
5.2.2 重组质粒转化农杆菌 | 第63-64页 |
5.2.3 拟南芥的种植 | 第64-65页 |
5.2.4 花序浸染法转化拟南芥 | 第65页 |
5.2.5 转基因阳性植株的鉴定 | 第65-67页 |
5.3 结果与分析 | 第67-70页 |
5.3.1 转基因阳性植株的筛选与鉴定 | 第67-68页 |
5.3.2 转基因拟南芥提前开花 | 第68-69页 |
5.3.3 拟南芥內源开花时间基因的表达量变化 | 第69-70页 |
5.4 讨论 | 第70-73页 |
第六章 GhFPF1 在拟南芥中参与调节避荫反应 | 第73-82页 |
6.1 材料 | 第73页 |
6.1.1 试验材料 | 第73页 |
6.1.2 酶与试剂 | 第73页 |
6.1.3 仪器设备 | 第73页 |
6.2 方法 | 第73-76页 |
6.2.1 拟南芥叶柄和下胚轴长度的测量 | 第73-74页 |
6.2.2 拟南芥叶绿素含量的测定 | 第74页 |
6.2.3 扫描电镜观察 | 第74页 |
6.2.4 拟南芥中相关基因表达量检测 | 第74-75页 |
6.2.5 生长素含量测定 | 第75-76页 |
6.3 结果与分析 | 第76-79页 |
6.3.1 拟南芥叶柄和下胚轴的测量 | 第76-77页 |
6.3.2 下胚轴扫描电镜观察 | 第77页 |
6.3.3 生长素含量测定 | 第77-78页 |
6.3.4 转基因拟南芥呈现“避荫”反应 | 第78-79页 |
6.4 讨论 | 第79-82页 |
第七章 GhFPF1 在棉花中的遗传转化 | 第82-91页 |
7.1 材料 | 第82页 |
7.1.1 试验材料 | 第82页 |
7.1.2 菌株与载体 | 第82页 |
7.1.3 试剂 | 第82页 |
7.1.4 仪器设备 | 第82页 |
7.2 方法 | 第82-86页 |
7.2.1 培养基配方与配制 | 第82-84页 |
7.2.2 农杆菌介导棉花的遗传转化 | 第84-85页 |
7.2.3 转基因棉花阳性植株的检测 | 第85-86页 |
7.3 结果与分析 | 第86-90页 |
7.3.1 GhFPF1 过表达转化棉花 | 第86-88页 |
7.3.2 转基因棉花阳性植株的筛选 | 第88-89页 |
7.3.3 转基因棉花后代表型观察 | 第89-90页 |
7.4 讨论 | 第90-91页 |
第八章 结论与展望 | 第91-93页 |
8.1 全文结论 | 第91-92页 |
8.2 展望 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
作者简介 | 第104页 |