摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第10-24页 |
1.1 雌激素相关受体ER的概述 | 第10-12页 |
1.1.1 ERRs与能量代谢 | 第10-11页 |
1.1.2 ERRs与疾病 | 第11-12页 |
1.2 酪氨酸羟化酶TH的概述 | 第12-15页 |
1.2.1 TH的结构 | 第13-14页 |
1.2.2 TH的生物学功能 | 第14-15页 |
1.3 多巴脱羧酶DDC的概述 | 第15-17页 |
1.3.1 DDC与黑化过程 | 第15-16页 |
1.3.2 DDC的生物学功能 | 第16-17页 |
1.4 RNAi技术的概述 | 第17-18页 |
1.5 拟黑多刺蚁的概述 | 第18-21页 |
1.5.1 拟黑多刺蚁的脑部结构 | 第19-20页 |
1.5.2 拟黑多刺蚁的生殖系统结构 | 第20-21页 |
1.6 研究目的与研究意义 | 第21页 |
1.7 研究内容与技术路线 | 第21-24页 |
1.7.1 研究内容 | 第21-22页 |
1.7.2 技术路线 | 第22-24页 |
第2章 实验材料与实验步骤 | 第24-44页 |
2.1 实验材料 | 第24-28页 |
2.1.1 拟黑多刺蚁的饲养 | 第24页 |
2.1.2 实验用仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.3 实验所用试剂及相关溶液配制 | 第25-28页 |
2.2 实验步骤 | 第28-44页 |
2.2.1 Total RNA提取 | 第28-29页 |
2.2.2 cDNA第一链合成 | 第29-30页 |
2.2.3 引物设计及特异性检测 | 第30-31页 |
2.2.4 PCR产物的回收和检测 | 第31-32页 |
2.2.5 dsRNA的合成 | 第32-34页 |
2.2.6 RNAi实验 | 第34页 |
2.2.7 荧光实时定量(qRT-PCR) | 第34-35页 |
2.2.8 Western blot | 第35-38页 |
2.2.9 免疫组织化学技术 | 第38-40页 |
2.2.10 荧光原位杂交技术 | 第40-44页 |
第3章 实验结果 | 第44-64页 |
3.1 PvERR的干扰实验 | 第44-47页 |
3.1.1 Total RNA的提取 | 第44-45页 |
3.1.2 PvERR和PvGFP引物的特异性及所用模板的质量检测 | 第45页 |
3.1.3 T7启动子添加结果检测 | 第45-46页 |
3.1.4 PvERR-dsRNA和PvGFP-dsRNA质量及稳定性检测 | 第46-47页 |
3.2 从mRNA水平和蛋白水平定量检测干扰效果 | 第47-50页 |
3.2.1 qRT-PCR检测PvERR被干扰前后在mRNA水平的变化 | 第47-49页 |
3.2.2 Western blot检测PvERR被干扰前后在蛋白水平的变化 | 第49-50页 |
3.3 PvERR与PvTH及PvDDC的关联性研究 | 第50-58页 |
3.3.1 qRT-PCR检测PvERR被干扰前后PvTH及PvDDC在mRNA水平的变化 | 第50-53页 |
3.3.2 Western blot检测PvERR被干扰前后PvTH及PvDDC在蛋白水平的变化 | 第53-57页 |
3.3.3 免疫组化检测PvERR被干扰前后PvTH和PvDDC蛋白在不同品级P.vicina体内的变化 | 第57-58页 |
3.3.4 荧光原位杂交检测PvERR被干扰前后PvTH和PvDDC mRNA在不同品级P.vicina体内的变化 | 第58页 |
3.4 PvERR被干扰前后虫体表型变化 | 第58-64页 |
第4章 讨论 | 第64-68页 |
总结 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-86页 |
附录 | 第86-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第114页 |