摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第1章 前言 | 第13-21页 |
1.1 地下鼠 | 第13-15页 |
1.1.1 地下鼠概述 | 第13页 |
1.1.2 地下鼠的低氧适应 | 第13-15页 |
1.2 甘肃鼢鼠 | 第15-16页 |
1.3 mTOR信号通路 | 第16-19页 |
1.3.1 mTOR信号通路的激活和调控 | 第16-18页 |
1.3.2 mTOR信号通路与重大疾病的相关调控 | 第18-19页 |
1.4 研究目的及内容 | 第19-21页 |
第2章 甘肃鼢鼠HIF-1α及mTOR信号通路中相关基因mRNA的表达 | 第21-37页 |
2.1 实验动物 | 第21页 |
2.2 实验仪器和耗材 | 第21-22页 |
2.3 实验试剂 | 第22页 |
2.4 实验方法 | 第22-28页 |
2.4.1 脑组织总mRNA的提取 | 第22-23页 |
2.4.2 RNA的鉴定 | 第23-24页 |
2.4.3 第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.4.4 引物设计及检测 | 第25-27页 |
2.4.5 实时定量 | 第27页 |
2.4.6 数据分析 | 第27-28页 |
2.5 结果与分析 | 第28-35页 |
2.5.1 模板及引物专一性检测 | 第28-29页 |
2.5.2 实时定量 | 第29-30页 |
2.5.3 mTOR实时定量结果 | 第30-31页 |
2.5.4 HIF-1α实时定量结果 | 第31-32页 |
2.5.5 4E-BP1实时定量结果 | 第32-33页 |
2.5.6 EIF4E实时定量结果 | 第33-34页 |
2.5.7 相同氧浓度下HIF-1α、mTOR信号通路中相关基因表达 | 第34-35页 |
2.6 讨论 | 第35-37页 |
第3章 甘肃鼢鼠HIF-1α及mTOR信号通路相关蛋白表达 | 第37-51页 |
3.1 实验动物 | 第37页 |
3.2 实验仪器 | 第37-38页 |
3.3 实验试剂 | 第38-39页 |
3.4 实验方法 | 第39-43页 |
3.4.1 脑组织总蛋白提取 | 第39页 |
3.4.2 蛋白定量 | 第39-40页 |
3.4.3 制作蛋白样品 | 第40页 |
3.4.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第40-41页 |
3.4.5 转膜 | 第41-42页 |
3.4.6 免疫反应 | 第42页 |
3.4.7 Ecl化学发光显影 | 第42-43页 |
3.5 结果与分析 | 第43-49页 |
3.5.1 蛋白电泳结果显影 | 第43页 |
3.5.2 HIF-1α蛋白表达量 | 第43-44页 |
3.5.3 4E-BP1磷酸化蛋白表达量 | 第44-45页 |
3.5.4 EIF4E蛋白表达量 | 第45-46页 |
3.5.5 相同氧浓度下HIF-1α、mTOR信号通路中相关蛋白表达 | 第46-47页 |
3.5.6 HIF-1α、磷酸化4E-BP1、EIF4E蛋白翻译比例 | 第47-49页 |
3.6 讨论 | 第49-51页 |
第4章 甘肃鼢鼠在不同氧浓度下脑细胞凋亡情况 | 第51-59页 |
4.1 实验动物 | 第51页 |
4.2 实验仪器 | 第51-52页 |
4.3 实验试剂 | 第52页 |
4.4 实验方法 | 第52-54页 |
4.4.1 取脑 | 第52页 |
4.4.2 脱水 | 第52-53页 |
4.4.3 浸蜡 | 第53页 |
4.4.4 包埋 | 第53页 |
4.4.5 制作石蜡切片 | 第53页 |
4.4.6 HE染色 | 第53-54页 |
4.4.7 TUNEL凋亡检测 | 第54页 |
4.5 实验结果及分析 | 第54-59页 |
4.5.1 HE染色结果 | 第54-55页 |
4.5.2 TUNEL染色结果 | 第55-59页 |
第5章 总结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-75页 |
致谢 | 第75页 |