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山羊chop基因过表达和shRNA干扰慢病毒载体的构建和鉴定

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 内质网应激和 CHOP 的研究进展第11-19页
    1.1 内质网应激第11-14页
        1.1.1 内质网应激及其信号通路第11-12页
        1.1.2 内质网应激与疾病第12-14页
    1.2 CHOP第14-19页
        1.2.1 CHOP 蛋白的结构第14页
        1.2.2 CHOP 蛋白的表达第14-15页
        1.2.3 CHOP 的转录调节第15-16页
        1.2.4 CHOP 的转录后调节第16页
        1.2.5 CHOP 与内质网应激第16-19页
第二章 慢病毒载体的研究进展第19-23页
    2.1 慢病毒载体第19-23页
        2.1.1 慢病毒概况第19-21页
        2.1.2 基因沉默型慢病毒载体第21-23页
第三章 山羊 chop 基因的克隆与序列分析第23-33页
    3.1 材料第23-24页
        3.1.1 试验动物、质粒和菌株第23页
        3.1.2 主要试剂第23-24页
        3.1.3 试验仪器第24页
    3.2 方法第24-27页
        3.2.1 山羊 chop 基因的克隆第24-27页
        3.2.2 生物信息学分析第27页
    3.3 结果第27-31页
        3.3.1 chop 基因扩增最适退火温度的筛选第27-28页
        3.3.2 chop 基因的回收第28页
        3.3.3 pMD18-T-chop 酶切鉴定第28-29页
        3.3.4 chop 基因的生物信息学分析第29-31页
    3.4 讨论第31-32页
    3.5 小结第32-33页
第四章 山羊 chop 基因慢病毒过表达和 shRNA 干扰载体的构建第33-42页
    4.1 材料第33-34页
        4.1.1 质粒第33-34页
        4.1.2 主要试剂第34页
    4.2 方法第34-37页
        4.2.1 山羊 chop 基因慢病毒过表达载体的构建第34-35页
        4.2.2 山羊 chop 基因 shRNA 慢病毒干扰载体的构建第35-37页
    4.3 结果第37-40页
        4.3.1 pCD513B 慢病毒过表达载体的酶切及纯化第37-38页
        4.3.2 山羊 chop 基因慢病毒过表达载体 pCD513B-chop 的双酶切鉴定第38-39页
        4.3.3 慢病毒干扰载体 pCD513B-U6 的酶切及纯化第39页
        4.3.4 山羊 chop 基因慢病毒干扰载体的 PCR 鉴定第39-40页
    4.4 讨论第40-41页
    4.5 小结第41-42页
第五章 山羊 chop 基因慢病毒载体的包装和鉴定第42-52页
    5.1 材料第42-43页
        5.1.1 质粒和细胞第42页
        5.1.2 主要试剂第42-43页
        5.1.3 试验仪器第43页
    5.2 方法第43-47页
        5.2.1 病毒颗粒的包装第43-46页
        5.2.2 重组慢病毒载体的效率鉴定第46-47页
    5.3 结果第47-50页
        5.3.1 慢病毒包装质粒的酶切鉴定第47-48页
        5.3.2 病毒包装所需质粒的大量制备第48页
        5.3.3 慢病毒包装第48-49页
        5.3.4 病毒滴度测定第49页
        5.3.5 慢病毒载体有效性的验证第49-50页
    5.4 讨论第50-51页
    5.5 小结第51-52页
结论第52-53页
参考文献第53-61页
附录第61-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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