摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 内质网应激和 CHOP 的研究进展 | 第11-19页 |
1.1 内质网应激 | 第11-14页 |
1.1.1 内质网应激及其信号通路 | 第11-12页 |
1.1.2 内质网应激与疾病 | 第12-14页 |
1.2 CHOP | 第14-19页 |
1.2.1 CHOP 蛋白的结构 | 第14页 |
1.2.2 CHOP 蛋白的表达 | 第14-15页 |
1.2.3 CHOP 的转录调节 | 第15-16页 |
1.2.4 CHOP 的转录后调节 | 第16页 |
1.2.5 CHOP 与内质网应激 | 第16-19页 |
第二章 慢病毒载体的研究进展 | 第19-23页 |
2.1 慢病毒载体 | 第19-23页 |
2.1.1 慢病毒概况 | 第19-21页 |
2.1.2 基因沉默型慢病毒载体 | 第21-23页 |
第三章 山羊 chop 基因的克隆与序列分析 | 第23-33页 |
3.1 材料 | 第23-24页 |
3.1.1 试验动物、质粒和菌株 | 第23页 |
3.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
3.1.3 试验仪器 | 第24页 |
3.2 方法 | 第24-27页 |
3.2.1 山羊 chop 基因的克隆 | 第24-27页 |
3.2.2 生物信息学分析 | 第27页 |
3.3 结果 | 第27-31页 |
3.3.1 chop 基因扩增最适退火温度的筛选 | 第27-28页 |
3.3.2 chop 基因的回收 | 第28页 |
3.3.3 pMD18-T-chop 酶切鉴定 | 第28-29页 |
3.3.4 chop 基因的生物信息学分析 | 第29-31页 |
3.4 讨论 | 第31-32页 |
3.5 小结 | 第32-33页 |
第四章 山羊 chop 基因慢病毒过表达和 shRNA 干扰载体的构建 | 第33-42页 |
4.1 材料 | 第33-34页 |
4.1.1 质粒 | 第33-34页 |
4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
4.2 方法 | 第34-37页 |
4.2.1 山羊 chop 基因慢病毒过表达载体的构建 | 第34-35页 |
4.2.2 山羊 chop 基因 shRNA 慢病毒干扰载体的构建 | 第35-37页 |
4.3 结果 | 第37-40页 |
4.3.1 pCD513B 慢病毒过表达载体的酶切及纯化 | 第37-38页 |
4.3.2 山羊 chop 基因慢病毒过表达载体 pCD513B-chop 的双酶切鉴定 | 第38-39页 |
4.3.3 慢病毒干扰载体 pCD513B-U6 的酶切及纯化 | 第39页 |
4.3.4 山羊 chop 基因慢病毒干扰载体的 PCR 鉴定 | 第39-40页 |
4.4 讨论 | 第40-41页 |
4.5 小结 | 第41-42页 |
第五章 山羊 chop 基因慢病毒载体的包装和鉴定 | 第42-52页 |
5.1 材料 | 第42-43页 |
5.1.1 质粒和细胞 | 第42页 |
5.1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
5.1.3 试验仪器 | 第43页 |
5.2 方法 | 第43-47页 |
5.2.1 病毒颗粒的包装 | 第43-46页 |
5.2.2 重组慢病毒载体的效率鉴定 | 第46-47页 |
5.3 结果 | 第47-50页 |
5.3.1 慢病毒包装质粒的酶切鉴定 | 第47-48页 |
5.3.2 病毒包装所需质粒的大量制备 | 第48页 |
5.3.3 慢病毒包装 | 第48-49页 |
5.3.4 病毒滴度测定 | 第49页 |
5.3.5 慢病毒载体有效性的验证 | 第49-50页 |
5.4 讨论 | 第50-51页 |
5.5 小结 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
附录 | 第61-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |