意大利蜜蜂(Apis mellifera L.)工蜂幼虫表皮E-β-罗勒烯含量测定与相关合成基因表达研究
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第13-23页 |
1 蜜蜂信息素的种类与作用 | 第13-14页 |
2 蜜蜂幼虫信息素 | 第14-16页 |
2.1 β-罗勒烯 | 第14页 |
2.2 E-β-罗勒烯的研究概况 | 第14-16页 |
3 气相色谱质谱联用仪 | 第16-21页 |
3.1 色谱法的发展进程 | 第16-17页 |
3.2 气相色谱法 | 第17-18页 |
3.2.1 气相色谱法的分类 | 第17页 |
3.2.2 气相色谱仪的组成 | 第17-18页 |
3.3 质谱仪 | 第18-20页 |
3.3.1 质谱仪的组成 | 第18-19页 |
3.3.2 质谱的扫描模式 | 第19-20页 |
3.4 分析方法 | 第20页 |
3.4.1 测定方法 | 第20页 |
3.4.2 定性分析法 | 第20页 |
3.4.3 定量分析法 | 第20页 |
3.5 气相色谱-串联质谱联用 | 第20-21页 |
4 荧光定量技术 | 第21-22页 |
4.1 qPCR的工作原理及分类 | 第21页 |
4.2 qPCR的数据处理 | 第21-22页 |
5 研究内容与研究意义 | 第22-23页 |
第二章 幼虫体表E-β-罗勒烯的定性与定量 | 第23-35页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
1.1 试验材料与仪器 | 第23页 |
1.1.1 试验材料与标准品 | 第23页 |
1.1.2 试验仪器与器材 | 第23页 |
1.2 样品的采集与制备 | 第23-24页 |
1.3 E-β-罗勒烯的定性与定量 | 第24-26页 |
1.3.1 色谱条件 | 第24页 |
1.3.2 建立TraceFinder主方法 | 第24-25页 |
1.3.3 建立标准曲线 | 第25页 |
1.3.4 定性与定量分析 | 第25-26页 |
1.3.5 数据分析 | 第26页 |
2 试验结果与分析 | 第26-32页 |
2.1 TraceFinder主方法的建立 | 第26-30页 |
2.1.1 E-β-罗勒烯保留时间的确认 | 第26-27页 |
2.1.2 特征离子的确立 | 第27-29页 |
2.1.3 碰撞能的优化 | 第29-30页 |
2.2 标准曲线的建立 | 第30页 |
2.3 幼虫体表E-β-罗勒烯的含量 | 第30-32页 |
3 讨论 | 第32-35页 |
第三章 E-β-罗勒烯相关基因的表达 | 第35-47页 |
1 材料与方法 | 第35-39页 |
1.1 试验材料 | 第35-37页 |
1.1.1 试验试剂 | 第35页 |
1.1.2 试验仪器 | 第35页 |
1.1.3 样品的采集 | 第35-37页 |
1.2 试验方法 | 第37-39页 |
1.2.1 RNA的提取 | 第37页 |
1.2.2 cDNA的合成 | 第37-38页 |
1.2.3 实时荧光定量核酸扩增检测 | 第38-39页 |
1.2.4 数据分析 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-44页 |
2.1 引物特异性检验 | 第39-40页 |
2.2 标准曲线的建立 | 第40-41页 |
2.3 相关基因的表达 | 第41-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
第四章 总结与展望 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
附录A 相关质谱图 | 第55-58页 |
附录B 相关扩增曲线、溶解曲线以及标准曲线 | 第58-61页 |
附录C 相关PCR引物 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |