摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
一 前言 | 第11-22页 |
1.1 研究背景 | 第11页 |
1.2 钙信号 | 第11-14页 |
1.2.1 钙离子参与硝酸盐信号网络 | 第12-13页 |
1.2.2 钙信号与ABA信号 | 第13-14页 |
1.3 钙指示剂 | 第14-19页 |
1.3.1 化学染料指示剂 | 第14-15页 |
1.3.2 水母发光蛋白aequorin | 第15-16页 |
1.3.3 基于FRET的钙指示剂Cameleons | 第16-18页 |
1.3.4 基于单个荧光蛋白的基因编码钙指示剂 | 第18-19页 |
1.4 实验选题背景及创新点 | 第19-21页 |
1.5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
二 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株 | 第22页 |
2.1.3 质粒 | 第22页 |
2.1.4 实验主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.5 实验主要试剂或试剂盒 | 第23页 |
2.2 主要实验方法 | 第23-33页 |
2.2.1 质粒大量抽提方案 | 第23-24页 |
2.2.2 质粒浓缩方案 | 第24-25页 |
2.2.3 拟南芥原生质体转化操作流程 | 第25-27页 |
2.2.4 载体构建 | 第27-30页 |
2.2.5 激光扫描共聚焦显微镜观察实验 | 第30页 |
2.2.6 拟南芥种植 | 第30-33页 |
三 实验结果与分析 | 第33-54页 |
3.1 超灵敏钙指示剂的构建 | 第33-36页 |
3.1.1 荧光强度定性钙指示剂 | 第33-34页 |
3.1.2 荧光比率型定量钙指示剂 | 第34-35页 |
3.1.3 超灵敏钙指示剂植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
3.2 超灵敏钙指示剂能够在拟南芥原生质体瞬时表达 | 第36-40页 |
3.3 超灵敏钙指示剂能够在植物多个组织中表达 | 第40-41页 |
3.4 超灵敏钙指示剂转基因植物能够感知钙离子变化 | 第41-45页 |
3.5 利用超灵敏钙指示剂转基因拟南芥研究ABA触发的钙变化模式 | 第45-49页 |
3.6 利用超灵敏钙指示剂研究ABA与拟南芥侧根生长发育的关系 | 第49-50页 |
3.7 超灵敏钙指示剂能够靶定拟南芥细胞不同亚细胞结构 | 第50-54页 |
四 讨论与展望 | 第54-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
附录A 实验所用引物 | 第63-65页 |
附录B 亚细胞定位序列及接头序列 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |