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拟南芥中新型荧光比率定量基因编码钙指示剂的开发

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
一 前言第11-22页
    1.1 研究背景第11页
    1.2 钙信号第11-14页
        1.2.1 钙离子参与硝酸盐信号网络第12-13页
        1.2.2 钙信号与ABA信号第13-14页
    1.3 钙指示剂第14-19页
        1.3.1 化学染料指示剂第14-15页
        1.3.2 水母发光蛋白aequorin第15-16页
        1.3.3 基于FRET的钙指示剂Cameleons第16-18页
        1.3.4 基于单个荧光蛋白的基因编码钙指示剂第18-19页
    1.4 实验选题背景及创新点第19-21页
    1.5 研究目的与意义第21-22页
二 材料与方法第22-33页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 菌株第22页
        2.1.3 质粒第22页
        2.1.4 实验主要仪器第22-23页
        2.1.5 实验主要试剂或试剂盒第23页
    2.2 主要实验方法第23-33页
        2.2.1 质粒大量抽提方案第23-24页
        2.2.2 质粒浓缩方案第24-25页
        2.2.3 拟南芥原生质体转化操作流程第25-27页
        2.2.4 载体构建第27-30页
        2.2.5 激光扫描共聚焦显微镜观察实验第30页
        2.2.6 拟南芥种植第30-33页
三 实验结果与分析第33-54页
    3.1 超灵敏钙指示剂的构建第33-36页
        3.1.1 荧光强度定性钙指示剂第33-34页
        3.1.2 荧光比率型定量钙指示剂第34-35页
        3.1.3 超灵敏钙指示剂植物表达载体的构建第35-36页
    3.2 超灵敏钙指示剂能够在拟南芥原生质体瞬时表达第36-40页
    3.3 超灵敏钙指示剂能够在植物多个组织中表达第40-41页
    3.4 超灵敏钙指示剂转基因植物能够感知钙离子变化第41-45页
    3.5 利用超灵敏钙指示剂转基因拟南芥研究ABA触发的钙变化模式第45-49页
    3.6 利用超灵敏钙指示剂研究ABA与拟南芥侧根生长发育的关系第49-50页
    3.7 超灵敏钙指示剂能够靶定拟南芥细胞不同亚细胞结构第50-54页
四 讨论与展望第54-58页
参考文献第58-63页
附录A 实验所用引物第63-65页
附录B 亚细胞定位序列及接头序列第65-66页
致谢第66页

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