| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 一、前言 | 第8-15页 |
| 1 TAG 合成途径和关键酶 | 第8-10页 |
| 2 DGAT 的研究进展 | 第10-13页 |
| 3 类波氏真眼点藻的生物学特征及其研究进展 | 第13-14页 |
| 4 本文研究的内容和意义 | 第14-15页 |
| 二、材料与方法 | 第15-35页 |
| 1 实验材料 | 第15页 |
| 1.1 实验藻种 | 第15页 |
| 1.2 菌种及其载体 | 第15页 |
| 2 实验方法 | 第15-33页 |
| 2.1 藻细胞培养 | 第15-16页 |
| 2.2 引物设计 | 第16-17页 |
| 2.3 cDNA 样品的制备 | 第17-20页 |
| 2.4 基因转录本 cDNA 序列的验证 | 第20-21页 |
| 2.5 基因 cDNA 全长片段克隆 | 第21-27页 |
| 2.6 DNA 序列分析 | 第27页 |
| 2.7 基因的真核表达 | 第27-31页 |
| 2.8 真核表达产物检测和分析 | 第31-32页 |
| 2.9 实时荧光定量 PCR | 第32-33页 |
| 3 实验设计 | 第33-34页 |
| 3.1 EcfpDGAT cDNA 全长的克隆 | 第33-34页 |
| 3.2 EcfpDGAT 基于酵母表达的功能鉴定 | 第34页 |
| 3.3 不同硝酸钠浓度培养条件下 EcfpDGAT mRNA 水平的表达 | 第34页 |
| 4 数据处理与分析 | 第34-35页 |
| 三、结果与分析 | 第35-54页 |
| 1 EcfpDGAT 转录本 cDNA 序列的验证 | 第35-37页 |
| 2 基因 cDNA 全长的克隆 | 第37-42页 |
| 2.1 基因 3’末端序列的克隆 | 第37-39页 |
| 2.2 基因 5’末端序列的克隆 | 第39-41页 |
| 2.3 EcfpDGATb cDNA 全长片段的克隆 | 第41-42页 |
| 3 EcfpDGATb 的序列分析 | 第42-48页 |
| 3.1 EcfpDGATb 的预测蛋白序列 | 第42-43页 |
| 3.2 EcfpDGATb 的预测信号肽与跨膜区分析 | 第43-44页 |
| 3.3 EcfpDGATb 氨基酸序列同源比对 | 第44-46页 |
| 3.4 基于 DGAT 蛋白序列的系统进化树构建 | 第46-48页 |
| 4 EcfpDGATb 的功能鉴定 | 第48-52页 |
| 4.1 EcfpDGATb 与表达载体 pYES2 的重组 | 第48-50页 |
| 4.2 EcfpDGATb 在 TAG 合成中的功能鉴定 | 第50-52页 |
| 5 两种硝酸钠浓度培养的藻细胞中 EcfpDGATb mRNA 水平的表达 | 第52-54页 |
| 四、讨论 | 第54-59页 |
| 1 EcfpDGAT 从转录本到 cDNA 全长的克隆 | 第54页 |
| 2 EcfpDGATb 的序列分析及类型确定 | 第54-56页 |
| 3 EcfpDGATb 的功能研究 | 第56-57页 |
| 4 氮限制培养藻细胞中 EcfpDGATb mRNA 的表达模式 | 第57-59页 |
| 五、结论及展望 | 第59-60页 |
| 1 结论 | 第59页 |
| 2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 在读期间发表论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
