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番茄组蛋白去乙酰化酶家族基因SlHDA1和SlHDT3的功能研究

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-8页
缩略词表第13-15页
1 绪论第15-33页
    1.1 番茄果实成熟研究进展第15-22页
        1.1.1 乙烯与番茄果实成熟第15-19页
        1.1.2 色素代谢与果实成熟第19-20页
        1.1.3 番茄果实突变体与果实成熟第20-22页
    1.2 组蛋白去乙酰化酶研究进展第22-29页
        1.2.1 组蛋白乙酰化修饰第22页
        1.2.2 组蛋白去乙酰化酶基因的功能第22-27页
        1.2.3 番茄中组蛋白去乙酰化酶基因的研究进展第27-28页
        1.2.4 展望第28-29页
    1.3 课题的提出及研究意义第29页
    1.4 课题的研究内容、技术路线及创新点第29-33页
        1.4.1 课题的研究内容第29-31页
        1.4.2 课题的技术路线第31-32页
        1.4.3 课题的创新点第32-33页
2 番茄组蛋白去乙酰化酶基因的筛选与表达分析第33-51页
    2.1 引言第33页
    2.2 材料、试剂和仪器第33-34页
        2.2.1 材料第33页
        2.2.2 药品与试剂第33页
        2.2.3 常用仪器设备第33-34页
    2.3 实验方法第34-40页
        2.3.1 番茄材料的收集第34-35页
        2.3.2 番茄SlHDACs基因的生物信息学分析第35-36页
        2.3.3 总RNA的提取第36-37页
        2.3.4 cDNA第一链的合成第37页
        2.3.5 番茄SlHDACs基因的引物设计及评估第37-38页
        2.3.6 番茄SlHDACs基因的组织表达模式分析第38-39页
        2.3.7 番茄SlHDACs基因非生物胁迫响应表达分析第39-40页
    2.4 结果与分析第40-48页
        2.4.1 番茄SlHDACs基因的分子特征分析第40页
        2.4.2 番茄SlHDACs蛋白质的分类进化分析第40-42页
        2.4.3 番茄SlHDACs基因组织表达模式分析第42-45页
        2.4.4 番茄SlHDA1-SlHDA9基因的非生物胁迫处理表达模式分析第45-48页
    2.5 讨论第48-50页
    2.6 本章小结第50-51页
3 SlHDA1基因的功能研究第51-95页
    3.1 引言第51页
    3.2 材料、试剂和仪器第51-57页
        3.2.1 材料第51-53页
        3.2.2 仪器与设备第53页
        3.2.3 试剂与培养基第53-57页
    3.3 实验方法第57-71页
        3.3.1 番茄材料的收集第57页
        3.3.2 植物基因组DNA的提取第57页
        3.3.3 总RNA的提取及cDNA的合成第57-58页
        3.3.4 SlHDA1基因的克隆第58-60页
        3.3.5 SlHDA1基因RNAi沉默载体的构建第60-63页
        3.3.6 双元质粒的农杆菌结合转移第63-64页
        3.3.7 农杆菌LBA4404介导的番茄基因转化第64-65页
        3.3.8 SlHDA1基因沉默阳性转基因番茄株系的筛选第65-66页
        3.3.9 SlHDA1基因沉默转基因番茄株系表达水平检测第66页
        3.3.10 果实总叶绿素及类胡萝卜素的提取第66页
        3.3.11 乙烯三重检验第66-67页
        3.3.12 果实乙烯合成量的测定第67页
        3.3.13 SlHDA1转基因对番茄果实耐贮藏性的影响第67页
        3.3.14 SlHDA1转基因对成熟相关基因表达的影响第67-69页
        3.3.15 SlHDA1转基因株系的盐胁迫耐受力分析第69页
        3.3.16 SlHDA1转基因番茄对ABA敏感性分析第69页
        3.3.17 SlHDA1转基因株系的干旱胁迫耐受力分析第69-70页
        3.3.18 SlHDA1转基因株系胁迫处理后各生理指标的测定第70页
        3.3.19 SlHDA1转基因对胁迫相关基因表达的影响第70-71页
    3.4 结果与分析第71-88页
        3.4.1 SlHDA1转基因番茄苗系的培育及筛选第71-74页
        3.4.2 SlHDA1基因的沉默促进了番茄果实的正常成熟第74页
        3.4.3 SlHDA1基因的沉默改变了果实色素含量及相关基因的表达第74-76页
        3.4.4 SlHDA1基因的沉默诱导乙烯的合成及乙烯相关基因的表达第76-79页
        3.4.5 SlHDA1基因的沉默影响了成熟相关基因的表达第79-80页
        3.4.6 SlHDA1基因的沉默影响了番茄果实的贮藏第80-81页
        3.4.7 SlHDA1基因的沉默使得番茄对盐胁迫的抗性降低第81-84页
        3.4.8 SlHDA1基因的沉默抑制了胁迫相关基因的表达第84-86页
        3.4.9 SlHDA1基因的沉默使番茄幼苗对ABA的敏感性增加第86-87页
        3.4.10 SlHDA1基因的沉默使番茄干旱胁迫耐受力降低第87-88页
    3.5 讨论第88-93页
        3.5.1 SlHDA1基因在番茄果实成熟中的功能第88-90页
        3.5.2 SlHDA1基因在非生物胁迫响应中的功能第90-93页
    3.6 本章小结第93-95页
4 SlHDT3基因的功能研究第95-121页
    4.1 引言第95页
    4.2 材料、设备与试剂第95页
        4.2.1 材料第95页
        4.2.2 仪器与设备第95页
        4.2.3 试剂与培养基第95页
    4.3 实验方法第95-102页
        4.3.1 番茄材料的收集第95页
        4.3.2 基因组DNA的提取第95-96页
        4.3.3 总RNA的提取及cDNA的合成第96页
        4.3.4 SlHD2s亚家族基因的生物信息学分析第96页
        4.3.5 SlHDT1和SlHDT3基因的引物设计及评估第96页
        4.3.6 SlHDT1和SlHDT3基因的表达模式分析第96-97页
        4.3.7 SlHDT1和SlHDT3基因响应非生物胁迫的表达模式分析第97页
        4.3.8 SlHDT3基因的克隆第97-98页
        4.3.9 SlHDT3基因沉默载体的构建第98-101页
        4.3.10 农杆菌LBA4404介导的番茄转基因及阳性转基因株系的筛选第101页
        4.3.11 沉默转基因株系SlHDT3基因的表达水平检测第101-102页
        4.3.12 果实总叶绿素及类胡萝卜素的提取第102页
        4.3.13 果实乙烯合成量的测定第102页
        4.3.14 SlHDT3转基因对番茄果实耐贮藏性的影响第102页
        4.3.15 SlHDT3转基因对成熟相关基因表达的影响第102页
    4.4 结果与分析第102-117页
        4.4.1 SlHD2s基因的核苷酸及蛋白序列生物信息学分析第102-104页
        4.4.2 SlHDT1和SlHDT3基因的组织表达模式分析第104-106页
        4.4.3 SlHDT1和SlHDT3基因的非生物胁迫处理表达模式分析第106-108页
        4.4.4 SlHDT3转基因苗系的培育及筛选第108-110页
        4.4.5 SlHDT3基因的沉默延迟了番茄果实的成熟第110-111页
        4.4.6 SlHDT3基因的沉默改变了果实色素含量及相关基因的表达第111-113页
        4.4.7 SlHDT3基因的沉默抑制了乙烯的合成及乙烯相关基因的表达第113-114页
        4.4.8 SlHDT3基因的沉默影响了果实成熟相关基因的表达第114-116页
        4.4.9 SlHDT3基因的沉默影响了番茄果实的贮藏第116-117页
    4.5 讨论第117-119页
    4.6 本章小结第119-121页
5 结论与展望第121-125页
    5.1 主要结论第121-122页
    5.2 展望第122-125页
致谢第125-127页
参考文献第127-145页
附录第145-146页
    A. 作者在攻读博士学位期间发表的论文目录第145页
    B. 作者在攻读博士学位期间发明的专利第145-146页
    C. 作者在攻读博士学位期间主持和参与的科研项目第146页

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