| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 甾体微生物转化概述 | 第11-15页 |
| 1.1.1 甾体化合物的分类和功能 | 第11-12页 |
| 1.1.2 甾体化合物的微生物转化研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 甾体微生物转化反应类型 | 第13-14页 |
| 1.1.4 常见的甾体微生物转化反应 | 第14-15页 |
| 1.2 微生物降解植物甾醇侧链 | 第15-19页 |
| 1.2.1 植物甾醇结构特点 | 第15-16页 |
| 1.2.2 雄甾烯酮简介 | 第16页 |
| 1.2.3 雄甾烯酮的制备方法 | 第16-17页 |
| 1.2.4 微生物降解植物甾醇的机理 | 第17-19页 |
| 1.3 微生物转化法生产雄烯二酮的研究现状 | 第19-21页 |
| 1.3.1 雄烯二酮生产菌株的改造 | 第19-20页 |
| 1.3.2 增加底物溶解性方法的研究 | 第20-21页 |
| 1.3.3 产物反馈抑制作用的研究 | 第21页 |
| 1.3.4 改善细胞通透性的研究 | 第21页 |
| 1.4 本论文的研究目的和主要研究内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第21-22页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 一株雄烯二酮转化菌的鉴定 | 第23-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基和培养条件 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 雄烯二酮转化菌的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.1 菌株的培养特征 | 第24页 |
| 2.2.2 菌株的生理生化特征 | 第24页 |
| 2.2.3 菌株总基因组 DNA 的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.4 菌株 16S rDNA 序列的 PCR 扩增 | 第25页 |
| 2.2.5 菌株的 16S rDNA 序列分析和系统发育树的构建 | 第25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-28页 |
| 2.3.1 菌株的生长特征 | 第25-27页 |
| 2.3.2 菌株的生理生化特征 | 第27页 |
| 2.3.3 菌株的遗传学特征 | 第27-28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-29页 |
| 第3章 雄烯二酮耐底物突变株的选育 | 第29-42页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第29-31页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第29-30页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第30页 |
| 3.1.3 菌株 | 第30页 |
| 3.1.4 培养基与培养条件 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 菌种诱变 | 第31-32页 |
| 3.2.2 耐底物突变株的筛选 | 第32页 |
| 3.2.3 突变株遗传稳定性实验 | 第32页 |
| 3.2.4 产物雄甾烯酮的分析测定方法 | 第32-33页 |
| 3.2.5 产物 AD(D)生成率的计算方法 | 第33页 |
| 3.2.6 高效液相色谱法定量测定 AD、ADD | 第33-35页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第35-41页 |
| 3.3.1 紫外线诱变的致死率曲线 | 第35页 |
| 3.3.2 硫酸二乙酯（DES）诱变的致死率曲线 | 第35-36页 |
| 3.3.3 复合诱变结果 | 第36页 |
| 3.3.4 耐底物突变株的初筛 | 第36-37页 |
| 3.3.5 耐底物突变株的复筛 | 第37-38页 |
| 3.3.6 转化产物的检测分析 | 第38-39页 |
| 3.3.7 突变株的遗传稳定性实验 | 第39-40页 |
| 3.3.8 出发菌株与突变株的发酵性能的比较 | 第40-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-42页 |
| 第4章 耐底物突变株生物转化培养基的优化 | 第42-54页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第42-44页 |
| 4.1.1 实验菌种 | 第42页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.1.4 培养基及培养条件 | 第44页 |
| 4.2 实验方案 | 第44-45页 |
| 4.2.1 不同碳源对转化的影响 | 第44页 |
| 4.2.2 不同氮源对转化的影响 | 第44页 |
| 4.2.3 不同磷酸盐对转化的影响 | 第44页 |
| 4.2.4 无机盐对转化的影响 | 第44页 |
| 4.2.5 响应面法优化突变株的转化培养基 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-53页 |
| 4.3.1 不同碳源对转化的影响 | 第45-46页 |
| 4.3.2 不同氮源对转化的影响 | 第46页 |
| 4.3.3 不同磷酸盐对转化的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.4 不同无机盐对转化的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.5 Plackett-Burman 实验设计结果与分析 | 第48-49页 |
| 4.3.6 最陡爬坡实验 | 第49-50页 |
| 4.3.7 响应面法优化转化培养基 | 第50-53页 |
| 4.3.8 模型验证 | 第53页 |
| 4.4 小结 | 第53-54页 |
| 第5章 耐底物突变株的转化条件优化及 5L 发酵罐试验 | 第54-62页 |
| 5.1 材料与方法 | 第54页 |
| 5.1.1 实验菌种 | 第54页 |
| 5.1.2 主要试剂及设备 | 第54页 |
| 5.1.3 培养基及培养条件 | 第54页 |
| 5.2 实验方案 | 第54-55页 |
| 5.2.1 pH 对转化的影响 | 第54-55页 |
| 5.2.2 液体种子培养时间对转化的影响 | 第55页 |
| 5.2.3 接种量对转化的影响 | 第55页 |
| 5.2.4 温度对转化的影响 | 第55页 |
| 5.2.5 转速对转化的影响 | 第55页 |
| 5.2.6 5L 发酵罐转化实验 | 第55页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 5.3.1 初始 pH 对转化结果的影响 | 第55-56页 |
| 5.3.2 液体种子培养时间对转化结果的影响 | 第56-57页 |
| 5.3.3 不同接种量对转化结果的影响 | 第57页 |
| 5.3.4 不同温度对转化结果的影响 | 第57-58页 |
| 5.3.5 不同转速对转化结果的影响 | 第58-59页 |
| 5.3.6 摇瓶转化条件优化综合验证实验 | 第59页 |
| 5.3.7 5L 发酵罐转化实验结果 | 第59-60页 |
| 5.4 小结 | 第60-62页 |
| 第6章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 6.1 结论 | 第62页 |
| 6.2 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 在读期间公开发表论文（著）及科研情况 | 第72页 |
