摘要 | 第4-11页 |
Abstract | 第11-19页 |
英文缩略语 | 第20-26页 |
第一部分 阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞需要细胞骨架的重排 | 第26-42页 |
1 前言 | 第26-28页 |
2 材料与方法 | 第28-32页 |
2.1 材料 | 第28-29页 |
2.1.1 细胞系 | 第28页 |
2.1.2 主要试剂 | 第28页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2.2 方法 | 第29-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第29页 |
2.2.2 细菌培养 | 第29-30页 |
2.2.3 细菌侵袭实验和细菌黏附实验检测阪崎杆菌侵袭与黏附HBMECs的能力 | 第30-31页 |
2.2.4 荧光染色技术检测阪崎杆菌侵袭HBMECs的微丝(F-actin)的变化 | 第31页 |
2.2.5 荧光染色技术检测阪崎杆菌侵袭HBMECs的微管(Tubulin)的变化 | 第31-32页 |
3 实验结果 | 第32-38页 |
3.1 阪崎杆菌的生物学特性 | 第32-34页 |
3.2 阪崎杆菌侵袭进入HBMECs | 第34-35页 |
3.3 微丝抑制剂Cytochalasin D可以抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs,而不影响其粘附 | 第35页 |
3.4 微管抑制剂秋水仙素可以抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs,而不影响其粘附 | 第35-36页 |
3.5 阪崎杆菌可以使HBMECs的细胞骨架F-actin发生改变 | 第36-37页 |
3.6 阪崎杆菌可以使HBMECs的tubulin发生改变 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
第二部分 阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞依赖PI3K-Akt-cPLA2α信号通路的活化 | 第42-68页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-49页 |
2.1 | 第43-44页 |
2.1.1 细胞系 | 第43页 |
2.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第44页 |
2.2 方法 | 第44-49页 |
2.2.1 细胞培养 | 第44-45页 |
2.2.2 细菌培养 | 第45页 |
2.2.3 细菌侵袭实验和细菌黏附实验检测阪崎杆菌侵袭与黏附HBMECs的能力 | 第45-46页 |
2.2.4 荧光染色技术检测阪崎杆菌侵袭HBMECs的微丝(F-actin)的变化 | 第46-47页 |
2.2.5 荧光染色技术检测阪崎杆菌侵袭HBMECs的微管(Tubulin)的变化 | 第47页 |
2.2.6 Western-blot方法检测AKT的表达 | 第47-49页 |
2.2.7 RNA干扰 | 第49页 |
3 实验结果 | 第49-64页 |
3.1 各种细胞信号通路抑制剂对阪崎杆菌侵袭HBMECs的作用 | 第49-52页 |
3.1.1 PI3K抑制剂LY294002与Wortmannin明显抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs | 第49-50页 |
3.1.2 PKC抑制剂G?6976可以抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs | 第50-51页 |
3.1.3 Src抑制剂PP1与PP2不能抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs | 第51-52页 |
3.1.4 ROCK抑制剂Y27632不能抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs | 第52页 |
3.2 阪崎杆菌侵袭HBMECs导致HBMECs的PI3K活化 | 第52-53页 |
3.3 PI3K抑制剂可以消除阪崎杆菌侵袭HBMECs时的F-actin变化 | 第53-54页 |
3.4 PI3K抑制剂可以消除阪崎杆菌侵袭HBMECs时的tubulin变化 | 第54页 |
3.5 Dominant-negative PI3K(Δp110)可以抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs,并能消除阪崎杆菌所引起的F-actin变化以及Akt的磷酸化 | 第54-56页 |
3.6 CPLA2a与阪崎杆菌侵袭HBMECs有关 | 第56-58页 |
3.7 阪崎杆菌侵袭HBMECs时会激活cPLA2a | 第58-60页 |
3.8 HBMECs中阪崎杆菌诱导肌动蛋白解聚需要cPLA2a的活化 | 第60-62页 |
3.9 cPLA2a是Akt对于阪崎杆菌侵入HBMECs的下游效应物 | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
第三部分 阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞与ERK的活化有关 | 第68-81页 |
1 前言 | 第68-69页 |
2 材料与方法 | 第69-75页 |
2.1 材料 | 第69-70页 |
2.1.1 细胞系 | 第69页 |
2.1.2 主要试剂 | 第69-70页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第70页 |
2.2 方法 | 第70-75页 |
2.2.1 细胞培养 | 第70页 |
2.2.2 细菌培养 | 第70页 |
2.2.3 细菌侵袭实验和细菌黏附实验检测阪崎杆菌侵袭与黏附HBMECs的能力 | 第70-71页 |
2.2.4 荧光染色技术检测阪崎杆菌侵袭HBMECs的微丝(F-actin)的变化 | 第71-72页 |
2.2.5 荧光染色技术检测阪崎杆菌侵袭HBMECs的微管(Tubulin)的变化 | 第72-73页 |
2.2.6 Western-blot方法检测阪崎杆菌侵袭HBMECsERK的表达 | 第73-74页 |
2.2.7 ERKsiRNAs瞬时转染HBMECs | 第74-75页 |
3 实验结果 | 第75-79页 |
3.1 ERK抑制剂PD98059可以抑制阪崎杆菌侵袭HBMECs | 第75-76页 |
3.2 阪崎杆菌侵袭HBMECs导致ERK信号通路的活化 | 第76页 |
3.3 ERK抑制剂可以消除阪崎杆菌侵袭HBMECs时的F-actin变化 | 第76-77页 |
3.4 ERK抑制剂可以消除阪崎杆菌侵袭HBMECs时的tubulin的变化 | 第77-78页 |
3.5 对HBMECs上的ERK瞬时干扰降低阪崎杆菌侵袭并消除阪崎杆菌侵袭HBMECs时的F-actin变化 | 第78-79页 |
4 讨论 | 第79-80页 |
5 结论 | 第80-81页 |
本研究创新性的自我评价 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
综述 新生儿脑膜炎致病菌株侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMECs)的研究进展 | 第89-103页 |
参考文献 | 第98-103页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第103-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
个人简历 | 第105页 |