中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
縮略词 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-39页 |
1. 活性氧介绍 | 第15-23页 |
1.1. 活性氧的产生 | 第16-19页 |
1.2. 活性氧的作用 | 第19页 |
1.3. 活性氧对机体的损伤 | 第19-20页 |
1.4. 生物体对活性氧的防御与清除 | 第20-23页 |
2. 抗氧化系统 | 第23-38页 |
2.1. 超氧化物歧化酶 | 第24-27页 |
2.2. 硒谷光氨肽过氧化物酶与硒结合蛋白 | 第27-38页 |
3. 研究目的及意义 | 第38-39页 |
第二章 松江鲈超氧化物歧化酶TfSOD的基因克隆与功能研究 | 第39-71页 |
1. 引言 | 第39-40页 |
2. 材料和方法 | 第40-57页 |
2.1 菌株和载体 | 第40页 |
2.2 仪器和试剂 | 第40-41页 |
2.3 主要试剂配制 | 第41-44页 |
2.4 实验材料 | 第44页 |
2.5 总RNA的提取和SMART cDNA合成 | 第44-46页 |
2.6 松江鲈TfSOD基因扩增 | 第46-48页 |
2.7 序列分析 | 第48-49页 |
2.8 实时荧光定量PCR(Quantitative real time PCR,qRT-PCR) | 第49页 |
2.9 重组表达、蛋白纯化以及抗体制备 | 第49-57页 |
3. 实验结果 | 第57-67页 |
3.1 基因克隆和序列分析结果 | 第57-59页 |
3.2 同源比对与进化树构建 | 第59-61页 |
3.3 TfSOD的空间结构 | 第61-62页 |
3.4 TfSOD的组织分布和表达模式 | 第62-63页 |
3.5 LPS和重金属刺激后TfSOD表达的变化 | 第63-64页 |
3.6 TfSOD重组表达及纯化 | 第64-65页 |
3.7 DPPH法测定TfSOD活性 | 第65-67页 |
4. 讨论 | 第67-71页 |
第三章 松江鲈谷胱甘肽过氧化物酶TfSe-GPx的基因克隆 | 第71-87页 |
1. 引言 | 第71-72页 |
2. 实验方法 | 第72-73页 |
2.1 SMART cDNA合成 | 第72页 |
2.2 松江鲈TfSe-GPx基因3’,5’端克隆 | 第72页 |
2.3 序列分析 | 第72页 |
2.4 总RNA的提取和SMART cDNA合成 | 第72页 |
2.5 LPS和重金属刺激后TfSe-GPx表达的变化 | 第72-73页 |
2.6 TfSe-GPx蛋白表达 | 第73页 |
3. 实验结果 | 第73-82页 |
3.1 基因克隆和序列分析结果 | 第73-75页 |
3.2 同源比对与进化树构建 | 第75-78页 |
3.3 TfSe-GPx的空间结构 | 第78-79页 |
3.4 TfSe-GPx的组织分布和表达模式 | 第79-80页 |
3.5 LPS和重金属刺激后TfSe-GPx表达的变化 | 第80-82页 |
3.6 TfSe-GPx重组表达及纯化 | 第82页 |
4. 讨论 | 第82-87页 |
第四章 松江鲈硒结合蛋白TfSeBP的基因克隆与功能研究 | 第87-105页 |
1 引言 | 第87页 |
2. 实验材料和方法 | 第87-89页 |
2.1 SMART cDNA合成 | 第87-88页 |
2.2 松江鲈TfSeBP基因3’,5’端克隆 | 第88页 |
2.3 序列分析 | 第88页 |
2.4 总RNA的提取和SMART cDNA合成 | 第88页 |
2.5 组织分布及LPS和重金属刺激后TfSeBP表达的变化 | 第88页 |
2.6 TfSeBP蛋白表达、纯化及抗体的制备 | 第88-89页 |
3. 实验结果 | 第89-100页 |
3.1 基因克隆和序列分析结果 | 第89-91页 |
3.2 同源比对与进化树构建 | 第91-96页 |
3.3 TfSeBP1的空间结构 | 第96页 |
3.4 TfSeBP1的组织分布和表达模式 | 第96-97页 |
3.5 LPS和重金属刺激后TfSeBP1表达的变化 | 第97-99页 |
3.6 TfSeBP1重组表达及纯化 | 第99-100页 |
4. 讨论 | 第100-105页 |
参考文献 | 第105-119页 |
致谢 | 第119-121页 |
攻读学位论文期间发表的学术论文 | 第121-122页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第122页 |