| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 研究意义 | 第13-16页 |
| 1.1.1 石油化合物及其危害 | 第13-14页 |
| 1.1.2 石油污染物的来源 | 第14-15页 |
| 1.1.3 石油污染物的处理 | 第15-16页 |
| 1.2 研究现状 | 第16-25页 |
| 1.2.1 降解石油烃的微生物 | 第16-17页 |
| 1.2.2 烷烃的降解 | 第17-20页 |
| 1.2.3 芳香烃的降解 | 第20-22页 |
| 1.2.4 石油烃类的厌氧降解 | 第22-23页 |
| 1.2.5 与石油化合物降解相关的酶和基因 | 第23-24页 |
| 1.2.6 基因工程技术在污染物降解中的应用 | 第24-25页 |
| 第二章 Rhodococcus sp.strain p52对直链烷烃的降解 | 第25-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-28页 |
| 2.1.1 主要仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.2 菌株与培养条件 | 第26-27页 |
| 2.1.3 定量、定性分析方法 | 第27-28页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第28-31页 |
| 2.2.1 Rhodococcus sp.strain p52对直链烷烃的利用与生长 | 第28-30页 |
| 2.2.2 Rhodococcus sp.strain p52对直链烷烃代谢途经分析 | 第30-31页 |
| 2.3 小结 | 第31-33页 |
| 第三章 Rhodococcus sp.strain p52对支链烷烃的降解 | 第33-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 3.1.1 主要仪器与试剂 | 第33页 |
| 3.1.2 菌株与培养条件 | 第33-34页 |
| 3.1.3 定量、定性分析方法 | 第34页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第34-37页 |
| 3.2.1 Rhodococcus sp.strain p52对异十九烷的降解 | 第34-35页 |
| 3.2.2 Rhodococcus sp.strain p52对异十九烷代谢途经分析 | 第35-37页 |
| 3.3 小结 | 第37-39页 |
| 第四章 Rhodococcus sp.strain p52对芳香烃的降解 | 第39-43页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 4.1.1 主要仪器与试剂 | 第39页 |
| 4.1.2 菌株与培养条件 | 第39-40页 |
| 4.1.3 定量、定性分析方法 | 第40页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第40-42页 |
| 4.2.1 Rhodococcus sp.strain p52对芳香烃的降解 | 第40-41页 |
| 4.2.2 Rhodococcus sp.strain p52对芳香烃化合物的代谢途经分析 | 第41-42页 |
| 4.3 小结 | 第42-43页 |
| 第五章 石油烃降解基因的扩增及其转录活性分析 | 第43-53页 |
| 5.1 材料与方法 | 第43-46页 |
| 5.1.1 主要设备与试剂 | 第43-44页 |
| 5.1.2 Rhodococcus sp.strain p52基因组DNA的制备 | 第44页 |
| 5.1.3 扩增引物 | 第44-45页 |
| 5.1.4 PCR方法 | 第45页 |
| 5.1.5 连接与转化 | 第45页 |
| 5.1.6 转化子筛选与石油烃降解基因序列分析 | 第45页 |
| 5.1.7 系统发育树的绘制 | 第45-46页 |
| 5.1.8 Rhodococcus sp.strain p52 RNA提取及cDNA的合成 | 第46页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第46-49页 |
| 5.2.1 石油烃降解基因的扩增及序列分析 | 第46-48页 |
| 5.2.2 石油烃降解基因在各石油烃代谢时的表达状况 | 第48-49页 |
| 5.3 小结 | 第49-53页 |
| 第六章 石油烃降解基因的功能验证 | 第53-61页 |
| 6.1 材料与方法 | 第53-56页 |
| 6.1.1 主要设备与试剂 | 第53页 |
| 6.1.2 石油烃降解基因的扩增 | 第53-54页 |
| 6.1.3 构建重组载体 | 第54-55页 |
| 6.1.4 重组载体转化克隆菌株(E.coli DH5α) | 第55-56页 |
| 6.1.5 重组载体转化表达菌株(E.coli BL21(DE3)) | 第56页 |
| 6.1.6 验证阳性转化子中各降解基因的表达活性 | 第56页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第56-58页 |
| 6.2.1 阳性转化子对正十四烷的转化性能 | 第56-57页 |
| 6.2.2 阳性转化子对正二十四烷的转化性能 | 第57-58页 |
| 6.3 小结 | 第58-61页 |
| 第七章 降解质粒pDF01和pDF02的接合迁移性和稳定性分析 | 第61-71页 |
| 7.1 材料与方法 | 第61-64页 |
| 7.1.1 主要设备与试剂 | 第61-62页 |
| 7.1.2 菌株对抗生素的抗性检测 | 第62页 |
| 7.1.3 供体菌与受体菌的细胞接合实验 | 第62-63页 |
| 7.1.4 接合子的菌落原位杂交实验 | 第63-64页 |
| 7.1.5 Rhodococcus sp.strain p52中降解质粒的遗传稳定性 | 第64页 |
| 7.2 结果与讨论 | 第64-69页 |
| 7.2.1 抗生素抗性检测及受体菌对DF降解能力检测 | 第64-65页 |
| 7.2.2 降解质粒pDF01和pDF02从供体菌向不同受体菌的接合迁移 | 第65-66页 |
| 7.2.3 降解质粒在Rhodococcus sp.strain p52中的遗传稳定性 | 第66-69页 |
| 7.3 小结 | 第69-71页 |
| 第八章 结论与建议 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第85-86页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |
