摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
符号说明 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-34页 |
1.1 前言 | 第14页 |
1.2 环境内分泌干扰物概述 | 第14-19页 |
1.2.1 环境内分泌干扰物来源及分类 | 第15-16页 |
1.2.2 环境内分泌干扰物的毒性机制 | 第16-17页 |
1.2.3 双酚A研究现状 | 第17-19页 |
1.3 脱氧核糖核酸(DNA)概述 | 第19-24页 |
1.3.1 DNA的组成 | 第19页 |
1.3.2 DNA的结构 | 第19-21页 |
1.3.3 DNA的生物功能 | 第21页 |
1.3.4 DNA的分解代谢 | 第21-22页 |
1.3.5 DNA与小分子的作用模式 | 第22-24页 |
1.3.5.1 非共价结合 | 第22-23页 |
1.3.5.2 共价结合 | 第23页 |
1.3.5.3 剪切作用 | 第23-24页 |
1.4 研究方法与技术 | 第24-30页 |
1.4.1 分子水平 | 第24-28页 |
1.4.1.1 荧光光谱法 | 第24-25页 |
1.4.1.2 荧光寿命测定法 | 第25-26页 |
1.4.1.3 紫外-可见吸收光谱法 | 第26-27页 |
1.4.1.4 圆二色谱法 | 第27-28页 |
1.4.2 细胞水平 | 第28-30页 |
1.4.2.1 单细胞凝胶电泳技术 | 第28-29页 |
1.4.2.2 8-OH脱氧鸟苷测定法 | 第29-30页 |
1.5 本论文的研究内容和意义 | 第30-34页 |
1.5.1 研究内容 | 第30-31页 |
1.5.2 研究意义 | 第31-34页 |
第二章 BPA与ctDNA毒性作用分子水平的研究 | 第34-56页 |
2.1 引言 | 第34页 |
2.2 实验部分 | 第34-39页 |
2.2.1 实验仪器 | 第34-35页 |
2.2.2 实验试剂 | 第35-36页 |
2.2.3 实验方法 | 第36-39页 |
2.2.3.1 紫外-可见吸收光谱 | 第36-37页 |
2.2.3.2 荧光光谱 | 第37-38页 |
2.2.3.3 荧光寿命测定 | 第38-39页 |
2.2.3.4 圆二色谱 | 第39页 |
2.3 结果与讨论 | 第39-55页 |
2.3.1 验证乙醇对实验体系的影响 | 第39-40页 |
2.3.2 BPA激发固有波长及使用浓度选择 | 第40-42页 |
2.3.3 荧光光谱 | 第42-45页 |
2.3.3.1 ctDNA对双酚A的荧光猝灭 | 第42-43页 |
2.3.3.2 猝灭机制及结合模式 | 第43-45页 |
2.3.4 荧光寿命测定 | 第45-47页 |
2.3.5 紫外-可见吸光光谱 | 第47-50页 |
2.3.5.1 DNA和BPA单独的紫外吸收光谱 | 第47-48页 |
2.3.5.2 BPA对ctDNA紫外吸收光谱的影响 | 第48-49页 |
2.3.5.3 ctDNA对BPA紫外吸收光谱的影响 | 第49-50页 |
2.3.6 pH值对体系荧光影响 | 第50-52页 |
2.3.7 离子强度对体系荧光影响 | 第52-53页 |
2.3.8 圆二色性光谱 | 第53-55页 |
2.4 结论 | 第55-56页 |
第三章 BPA与DNA毒性作用细胞水平的研究 | 第56-74页 |
3.1 引言 | 第56页 |
3.2 实验部分 | 第56-63页 |
3.2.1 实验仪器 | 第56-57页 |
3.2.2 实验动物 | 第57页 |
3.2.3 实验试剂 | 第57-59页 |
3.2.4 实验方法 | 第59-63页 |
3.2.4.1 肝细胞获取 | 第59页 |
3.2.4.2 细胞悬液配制 | 第59页 |
3.2.4.3 肝细胞染毒与培养 | 第59-60页 |
3.2.4.4 单细胞凝胶电泳法 | 第60-61页 |
3.2.4.5 基因组DNA小量抽提 | 第61-62页 |
3.2.4.6 DNA浓度测定及处理 | 第62页 |
3.2.4.7 8-OH脱氧鸟嘌呤腺苷测定法 | 第62-63页 |
3.3 结果与讨论 | 第63-73页 |
3.3.1 单细胞凝胶电泳法 | 第63-70页 |
3.3.2 8-OHdG法测定DNA损伤 | 第70-73页 |
3.4 结论 | 第73-74页 |
第四章 全文总结与工作展望 | 第74-76页 |
4.1 主要结论 | 第74-75页 |
4.1.1 BPA对ctDNA毒性作用分子水平的研究 | 第74页 |
4.1.2 BPA对DNA毒性作用细胞水平的研究 | 第74-75页 |
4.2 工作展望 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
硕士研究生期间发表和待发表的学术论文 | 第90-92页 |
攻读硕士期间所获奖励 | 第92页 |
硕士研究生期间参与完成的科研项目 | 第92-93页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第93页 |