| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 插图清单 | 第12-13页 |
| 英文缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 抗体药物 | 第14页 |
| 1.2 人源抗体 | 第14-15页 |
| 1.2.1 人源抗体临床发展 | 第14-15页 |
| 1.3 伪狂犬病毒(PSEUDORABIES VIRUS,PRV) | 第15-17页 |
| 1.3.1 流行病学 | 第15-16页 |
| 1.3.2 临床症状 | 第16页 |
| 1.3.3 预防和治疗 | 第16-17页 |
| 1.4 抗体治疗 | 第17-18页 |
| 1.5 重组抗体技术 | 第18-19页 |
| 1.6 LINKER序列 | 第19页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 猪源抗体可变区序列的扩增及序列分析 | 第20-34页 |
| 2.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2..3 疫苗 | 第20页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 实验动物免疫及外周血淋巴细胞的分离 | 第20-21页 |
| 2.2.2 流式细胞术分选靶B淋巴细胞 | 第21-23页 |
| 2.2.3 猪源抗体重链、轻链可变区基因的扩增 | 第23-27页 |
| 2.3 结果 | 第27-32页 |
| 2.3.1 免疫猪血清抗体检测 | 第27页 |
| 2.3.2 gB蛋白的表达及纯化 | 第27-28页 |
| 2.3.3 gB蛋白抗原性检测 | 第28-29页 |
| 2.3.4 流式分选靶B淋巴细胞 | 第29-30页 |
| 2.3.5 抗体可变区的扩增 | 第30页 |
| 2.3.6 菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.7 抗体序列分析 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 猪源重组抗体序列原核表达载体的构建、表达以及初步鉴定 | 第34-44页 |
| 3.1 材料 | 第34页 |
| 3.1.1 质粒和菌株 | 第34页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 3.2 方法 | 第34-38页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第34-35页 |
| 3.2.2 PCR扩增 | 第35-36页 |
| 3.2.3 构建pET28a-H-linker-L重组质粒 | 第36-37页 |
| 3.2.4 猪源重组抗体的原核表达 | 第37-38页 |
| 3.3 结果 | 第38-42页 |
| 3.3.1 重链全长序列的扩增 | 第38页 |
| 3.3.2 轻链全长序列的扩增 | 第38-39页 |
| 3.3.3 H-linker-L全长序列的扩增 | 第39-40页 |
| 3.3.4 重组质粒pET28a-H-linker-L的双酶切鉴定 | 第40页 |
| 3.3.5 猪源重组抗体的原核表达 | 第40-41页 |
| 3.3.6 原核表达猪源抗体与兔抗猪IgG二抗反应 | 第41-42页 |
| 3.4 结论 | 第42-44页 |
| 第四章 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
