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LRF在小鼠睾丸中的表达及其功能研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
文献综述第13-23页
    第一章 LRF的研究进展第13-19页
        1.1 LRF基因的发现第13页
        1.2 LRF基因的序列结构,第13-14页
        1.3 LRF基因在机体中的表达第14页
        1.4 LRF的生物学功能第14-19页
            1.4.1 LRF与Luman的关系第14-15页
            1.4.2 LRF与母性行为第15-17页
            1.4.3 LRF与胚胎附植第17页
            1.4.4 LRF与内质网应激第17-19页
    第二章 睾丸间质细胞的形成以及睾酮合成机制第19-23页
        2.1 雄性生殖系统第19页
        2.2 不同动物睾丸组织的发育过程第19-20页
            2.2.1 小鼠睾丸组织第19页
            2.2.2 羊睾丸组织第19页
            2.2.3 猪睾丸组织第19-20页
            2.2.4 牛睾丸组织第20页
        2.3 睾丸间质细胞的睾酮合成功能第20-23页
            2.3.1 睾丸间质细胞的形成过程第20-21页
            2.3.2 睾丸间质细胞的睾酮合成过程第21-22页
            2.3.3 下丘脑对睾酮合成的调节作用第22-23页
试验研究第23-53页
    第三章 LRF在小鼠睾丸﹑附睾和精子中的表达规律第23-35页
        3.1 试验材料第23-24页
            3.1.1 试验试剂第23-24页
            3.1.2 试验仪器第24页
            3.1.3 实验动物第24页
        3.2 试验方法第24-29页
            3.2.1 样本采集第24-25页
            3.2.2 石蜡包埋第25页
            3.2.3 免疫组织化学染色第25-26页
            3.2.4 qRT-PCR检测第26-27页
            3.2.5 小鼠原代睾丸间质细胞的分离培养与鉴定第27-28页
            3.2.6 细胞免疫荧光第28页
            3.2.7 精子免疫荧光第28-29页
        3.3 试验结果第29-33页
            3.3.1 LRF蛋白的定位表达第29-30页
            3.3.2 LRFmRNA在小鼠不同发育时期小鼠睾丸中的表达水平第30-31页
            3.3.3 分离的原代小鼠睾丸间质细胞的纯度检测第31页
            3.3.4 LRF蛋白的亚细胞定位第31-33页
        3.4 讨论第33-34页
        3.5 小结第34-35页
    第四章 hCG对LRF的表达调控第35-39页
        4.1 试验材料第35-36页
            4.1.1 试验试剂第35页
            4.1.2 试验仪器第35-36页
            4.1.3 实验动物第36页
        4.2 试验方法第36-37页
            4.2.1 hCG处理小鼠样本的收集第36页
            4.2.2 睾酮含量的ELISA检测第36页
            4.2.3 LRF和3β-HSD转录水平的检测第36-37页
        4.3 试验结果第37-38页
            4.3.1 在体注射hCG对小鼠睾酮合成和LRF表达的影响第37页
            4.3.2 hCG对体外培养小鼠睾丸间质细胞睾酮合成和LRF表达的影响第37-38页
        4.4 讨论第38页
        4.5 小结第38-39页
    第五章 LRF在小鼠睾丸间质细胞中的功能性研究第39-53页
        5.1 试验材料第39-40页
            5.1.1 试验试剂第39页
            5.1.2 试验仪器第39-40页
            5.1.3 实验动物第40页
        5.2 试验方法第40-45页
            5.2.1 pcDNA3.1(+)-LRF过表达载体构建与验证第40-44页
            5.2.2 有效si-LRF干扰片段的筛选第44-45页
            5.2.3 细胞活力的CCK-8检测第45页
            5.2.4 培养上清液中睾酮浓度的检测第45页
            5.2.5 睾酮合成酶表达水平的qRT-PCR检测第45页
        5.3 试验结果第45-52页
            5.3.1 LRF过表达载体构建第45-49页
            5.3.2 LRF对原代睾丸间质细胞睾酮合成的调节第49-50页
            5.3.3 LRF基因调节类固醇合成酶的表达第50-52页
        5.4 讨论第52页
        5.5 小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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