摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
文献综述 | 第13-23页 |
第一章 LRF的研究进展 | 第13-19页 |
1.1 LRF基因的发现 | 第13页 |
1.2 LRF基因的序列结构, | 第13-14页 |
1.3 LRF基因在机体中的表达 | 第14页 |
1.4 LRF的生物学功能 | 第14-19页 |
1.4.1 LRF与Luman的关系 | 第14-15页 |
1.4.2 LRF与母性行为 | 第15-17页 |
1.4.3 LRF与胚胎附植 | 第17页 |
1.4.4 LRF与内质网应激 | 第17-19页 |
第二章 睾丸间质细胞的形成以及睾酮合成机制 | 第19-23页 |
2.1 雄性生殖系统 | 第19页 |
2.2 不同动物睾丸组织的发育过程 | 第19-20页 |
2.2.1 小鼠睾丸组织 | 第19页 |
2.2.2 羊睾丸组织 | 第19页 |
2.2.3 猪睾丸组织 | 第19-20页 |
2.2.4 牛睾丸组织 | 第20页 |
2.3 睾丸间质细胞的睾酮合成功能 | 第20-23页 |
2.3.1 睾丸间质细胞的形成过程 | 第20-21页 |
2.3.2 睾丸间质细胞的睾酮合成过程 | 第21-22页 |
2.3.3 下丘脑对睾酮合成的调节作用 | 第22-23页 |
试验研究 | 第23-53页 |
第三章 LRF在小鼠睾丸﹑附睾和精子中的表达规律 | 第23-35页 |
3.1 试验材料 | 第23-24页 |
3.1.1 试验试剂 | 第23-24页 |
3.1.2 试验仪器 | 第24页 |
3.1.3 实验动物 | 第24页 |
3.2 试验方法 | 第24-29页 |
3.2.1 样本采集 | 第24-25页 |
3.2.2 石蜡包埋 | 第25页 |
3.2.3 免疫组织化学染色 | 第25-26页 |
3.2.4 qRT-PCR检测 | 第26-27页 |
3.2.5 小鼠原代睾丸间质细胞的分离培养与鉴定 | 第27-28页 |
3.2.6 细胞免疫荧光 | 第28页 |
3.2.7 精子免疫荧光 | 第28-29页 |
3.3 试验结果 | 第29-33页 |
3.3.1 LRF蛋白的定位表达 | 第29-30页 |
3.3.2 LRFmRNA在小鼠不同发育时期小鼠睾丸中的表达水平 | 第30-31页 |
3.3.3 分离的原代小鼠睾丸间质细胞的纯度检测 | 第31页 |
3.3.4 LRF蛋白的亚细胞定位 | 第31-33页 |
3.4 讨论 | 第33-34页 |
3.5 小结 | 第34-35页 |
第四章 hCG对LRF的表达调控 | 第35-39页 |
4.1 试验材料 | 第35-36页 |
4.1.1 试验试剂 | 第35页 |
4.1.2 试验仪器 | 第35-36页 |
4.1.3 实验动物 | 第36页 |
4.2 试验方法 | 第36-37页 |
4.2.1 hCG处理小鼠样本的收集 | 第36页 |
4.2.2 睾酮含量的ELISA检测 | 第36页 |
4.2.3 LRF和3β-HSD转录水平的检测 | 第36-37页 |
4.3 试验结果 | 第37-38页 |
4.3.1 在体注射hCG对小鼠睾酮合成和LRF表达的影响 | 第37页 |
4.3.2 hCG对体外培养小鼠睾丸间质细胞睾酮合成和LRF表达的影响 | 第37-38页 |
4.4 讨论 | 第38页 |
4.5 小结 | 第38-39页 |
第五章 LRF在小鼠睾丸间质细胞中的功能性研究 | 第39-53页 |
5.1 试验材料 | 第39-40页 |
5.1.1 试验试剂 | 第39页 |
5.1.2 试验仪器 | 第39-40页 |
5.1.3 实验动物 | 第40页 |
5.2 试验方法 | 第40-45页 |
5.2.1 pcDNA3.1(+)-LRF过表达载体构建与验证 | 第40-44页 |
5.2.2 有效si-LRF干扰片段的筛选 | 第44-45页 |
5.2.3 细胞活力的CCK-8检测 | 第45页 |
5.2.4 培养上清液中睾酮浓度的检测 | 第45页 |
5.2.5 睾酮合成酶表达水平的qRT-PCR检测 | 第45页 |
5.3 试验结果 | 第45-52页 |
5.3.1 LRF过表达载体构建 | 第45-49页 |
5.3.2 LRF对原代睾丸间质细胞睾酮合成的调节 | 第49-50页 |
5.3.3 LRF基因调节类固醇合成酶的表达 | 第50-52页 |
5.4 讨论 | 第52页 |
5.5 小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |