摘要 | 第13-16页 |
ABSTRACT | 第16-19页 |
符号与缩写 | 第20-21页 |
第一章 绪论 | 第21-61页 |
1.1 核酸探针的概述 | 第21-22页 |
1.2 经典的核酸探针的设计及应用 | 第22-25页 |
1.2.1 双元探针 | 第22页 |
1.2.2 分子信标 | 第22-24页 |
1.2.3 链取代探针 | 第24-25页 |
1.3 基于信号扩增的核酸探针的设计及应用 | 第25-33页 |
1.3.1 基于切刻内切酶循环扩增的核酸探针 | 第26-27页 |
1.3.2 基于外切酶Ⅲ循环扩增的核酸探针 | 第27-29页 |
1.3.3 基于滚环扩增的核酸探针 | 第29-31页 |
1.3.4 基于链置换扩增的核酸探针 | 第31-33页 |
1.4 基于微/纳米材料的核酸探针的设计及应用 | 第33-41页 |
1.4.1 基于磁球的核酸探针 | 第34-35页 |
1.4.2 基于金纳米颗粒的核酸探针 | 第35-37页 |
1.4.3 基于氧化石墨烯的核酸探针 | 第37-40页 |
1.4.4 基于金属纳米簇的核酸探针 | 第40-41页 |
1.5 本论文解决的科学问题及研究内容 | 第41-44页 |
参考文献 | 第44-61页 |
第二章 DNA稳定的银纳米簇荧光探针用于免标记的核酸检测 | 第61-77页 |
2.1 引言 | 第61-63页 |
2.2 实验部分 | 第63-64页 |
2.2.1 试剂和仪器 | 第63-64页 |
2.2.2 DNA/Ag NCs荧光探针的制备 | 第64页 |
2.2.3 DNA的检测 | 第64页 |
2.2.4 细胞裂解液中DNA的检测 | 第64页 |
2.3 结果与讨论 | 第64-71页 |
2.3.1 DNA/Ag NCs荧光探针的光谱表征 | 第64-65页 |
2.3.2 DNA传感器的设计原理 | 第65-66页 |
2.3.3 传感系统的荧光光谱 | 第66页 |
2.3.4 反应条件的优化 | 第66-68页 |
2.3.5 传感系统的灵敏性和选择性考察 | 第68-70页 |
2.3.6 精密度和重现性考察 | 第70页 |
2.3.7 复杂体系中目标DNA的检测 | 第70-71页 |
2.4 结论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-77页 |
第三章 目标物保护的哑铃分子探针介导的级联滚环扩增策略用于DNA甲基转移酶活性的灵敏检测 | 第77-97页 |
3.1 引言 | 第77-78页 |
3.2 实验部分 | 第78-81页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第78-79页 |
3.2.2 封闭的哑铃分子探针的制备 | 第79页 |
3.2.3 哑铃分子探针的甲基化和切割 | 第79页 |
3.2.4 级联的滚环扩增反应和荧光检测 | 第79-81页 |
3.2.5 凝胶电泳实验 | 第81页 |
3.2.6 细胞裂解液中M.SssI MTase活性的检测 | 第81页 |
3.2.7 抗癌药物对M.SssI MTase活性的抑制研究 | 第81页 |
3.3 结果与讨论 | 第81-92页 |
3.3.1 目标物保护的哑铃分子探针介导的级联滚环扩增策略用于M.SssIMTase活性分析的设计原理 | 第81-83页 |
3.3.2 目标物保护的哑铃分子探针介导的级联滚环扩增策略用于M.SssIMTase活性分析的可行性验证 | 第83-85页 |
3.3.3 反应条件的优化 | 第85-88页 |
3.3.4 M.SssI MTase活性传感系统分析性能的考察 | 第88-90页 |
3.3.5 细胞裂解液中M.SssI MTase活性检测 | 第90-91页 |
3.3.6 抗癌药物对M.SssI MTase活性的抑制研究 | 第91-92页 |
3.4 结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-97页 |
第四章 单个集成化的磁性微探针用于单细胞水平的人类甲基转移酶活性的灵敏准确分析 | 第97-117页 |
4.1 引言 | 第97-98页 |
4.2 实验部分 | 第98-102页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第98-99页 |
4.2.2 集成化的磁性微探针的制备 | 第99-100页 |
4.2.3 单个集成化的磁性微探针的捕获 | 第100页 |
4.2.4 细胞培养和Dnmt1提取 | 第100页 |
4.2.5 基于单个集成化的磁性微探针的Dnmt1活性分析 | 第100-101页 |
4.2.6 RG108对Dnmt1活性的抑制研究 | 第101页 |
4.2.7 Z-stack荧光成像 | 第101页 |
4.2.8 凝胶电泳实验 | 第101-102页 |
4.3 结果与讨论 | 第102-113页 |
4.3.1 基于单个集成化磁性微探针用于Dnmt1活性分析的设计原理 | 第102-103页 |
4.3.2 集成化磁性微探针的表征 | 第103-105页 |
4.3.3 基于单个集成化磁性微探针用于Dnmt1活性分析的可行性验证 | 第105-106页 |
4.3.4 反应条件的优化 | 第106-107页 |
4.3.5 基于单个集成化磁性微探针的Dnmt1活性传感系统分析性能的考察 | 第107-110页 |
4.3.6 Dnmt1活性抑制研究 | 第110-111页 |
4.3.7 细胞提取液中Dnmt1活性的评估 | 第111-113页 |
4.4 结论 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-117页 |
第五章 球型核酸探针介导的细胞内逻辑平台用于mRNA成像及不同表型癌细胞识别 | 第117-137页 |
5.1 引言 | 第117-118页 |
5.2 实验部分 | 第118-122页 |
5.2.1 试剂和仪器 | 第118-120页 |
5.2.2 金纳米颗粒(AuNPs)的制备 | 第120页 |
5.2.3 YES门DNA-AuNPs球型核酸探针的制备及DNA修饰量表征 | 第120-121页 |
5.2.4 AND门DNA-AuNPs球型核酸探针的制备及DNA修饰量表征 | 第121页 |
5.2.5 DNA-AuNPs球型核酸探针的细胞外荧光实验 | 第121-122页 |
5.2.6 DNA-AuNPs球型核酸探针稳定性研究 | 第122页 |
5.2.7 细胞培养 | 第122页 |
5.2.8 DNA-AuNPs球型核酸探针的细胞内荧光成像实验 | 第122页 |
5.2.9 细胞内总RNA的提取和实时荧光定量PCR(qPCR) | 第122页 |
5.3 结果与讨论 | 第122-132页 |
5.3.1 DNA-AuNPs球型核酸探针介导的细胞内逻辑平台用于mRNA成像和不同表型癌细胞识别的设计原理 | 第122-124页 |
5.3.2 金纳米颗粒(AuNPs)的表征 | 第124-125页 |
5.3.3 YES门DNA-AuNPs球型核酸探针的表征 | 第125-126页 |
5.3.4 YES门DNA-AuNPs球型核酸探针细胞外可行性和稳定性考察 | 第126-127页 |
5.3.5 AND门DNA-AuNPs球型核酸探针的表征及细胞外可行性和稳定性考察 | 第127-129页 |
5.3.6 YES门DNA-AuNPs球型核酸探针用于细胞内mRNA成像 | 第129-131页 |
5.3.7 AND门DNA-AuNPs球型核酸探针用于细胞内mRNA的逻辑成像及特定表型癌细胞的识别 | 第131-132页 |
5.4 结论 | 第132-133页 |
参考文献 | 第133-137页 |
第六章 结论与展望 | 第137-139页 |
6.1 结论 | 第137-138页 |
6.2 展望 | 第138-139页 |
致谢 | 第139-141页 |
博士期间发表论文 | 第141-143页 |
附件 | 第143-167页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第167页 |