中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
符号说明 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-29页 |
1 引言 | 第17-18页 |
2 酰基转移酶 | 第18-21页 |
2.1 BAHD/HXXXD家族酶 | 第18-20页 |
2.2 羟基肉桂酰转移酶 | 第20-21页 |
3 黄酮类化合物的研究 | 第21-27页 |
3.1 黄酮类化合物的结构与生理活性 | 第21-22页 |
3.2 类黄酮的生物合成途径 | 第22-24页 |
3.3 黄酮类化合物生物合成途径中20DD酶 | 第24-27页 |
4 立题依据 | 第27-29页 |
第二章 苔类植物中羟基肉桂酰转移酶的基因克隆和功能鉴定 | 第29-58页 |
1 前言 | 第29页 |
2 实验材料及仪器设备 | 第29-34页 |
2.1 植物材料 | 第29页 |
2.2 质粒与菌种 | 第29-30页 |
2.3 主要试剂和试剂盒 | 第30-31页 |
2.4 主要实验室仪器 | 第31-32页 |
2.5 主要溶液和培养基 | 第32-33页 |
2.6 引物序列 | 第33-34页 |
3 实验方法 | 第34-45页 |
3.1 序列分析 | 第34页 |
3.2 植物RNA的提取 | 第34-35页 |
3.3 基因克隆 | 第35-37页 |
3.4 原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
3.5 蛋白表达 | 第39-40页 |
3.6 体外酶活功能的测定 | 第40-42页 |
3.7 基因的亚细胞定位 | 第42-44页 |
3.8 植物细胞壁成分的提取 | 第44-45页 |
4 实验结果与分析 | 第45-57页 |
4.1 目的基因的序列分析和克隆 | 第45-48页 |
4.2 基因序列比对和进化树分析 | 第48-50页 |
4.3 体外酶活结果分析 | 第50-55页 |
4.4 烟草亚细胞定位 | 第55-56页 |
4.5 植物细胞壁成分分析 | 第56-57页 |
5 总结 | 第57-58页 |
第三章 苔类植物中黄酮合成酶催化机制研究 | 第58-82页 |
1 前言 | 第58页 |
2 实验材料 | 第58-63页 |
2.1 菌株与载体质粒 | 第58-59页 |
2.2 酶与试剂 | 第59页 |
2.3 培养基和溶液 | 第59页 |
2.4 实验仪器 | 第59页 |
2.5 引物序列 | 第59-63页 |
3 实验方法 | 第63-68页 |
3.1 目的基因的突变体的构建和表达 | 第63-64页 |
3.2 体外酶活功能鉴定 | 第64-65页 |
3.3 目的基因在拟南芥中的过表达 | 第65-68页 |
3.4 转基因拟南芥中黄酮类化合物含量分析 | 第68页 |
4 实验结果 | 第68-80页 |
4.1 序列分析及同源模拟 | 第68-71页 |
4.2 单突变体的设计 | 第71页 |
4.3 单突变体的构建和蛋白纯化 | 第71-73页 |
4.4 突变蛋白的酶活结果及分析 | 第73-78页 |
4.5 两个FNSI在拟南芥中的过表达 | 第78-80页 |
4.6 转基因拟南芥中黄酮类化合物含量分析 | 第80页 |
5 总结 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第93页 |