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苔类植物羟基肉桂酰转移酶功能鉴定和黄酮合成酶催化机制研究

中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
符号说明第15-17页
第一章 文献综述第17-29页
    1 引言第17-18页
    2 酰基转移酶第18-21页
        2.1 BAHD/HXXXD家族酶第18-20页
        2.2 羟基肉桂酰转移酶第20-21页
    3 黄酮类化合物的研究第21-27页
        3.1 黄酮类化合物的结构与生理活性第21-22页
        3.2 类黄酮的生物合成途径第22-24页
        3.3 黄酮类化合物生物合成途径中20DD酶第24-27页
    4 立题依据第27-29页
第二章 苔类植物中羟基肉桂酰转移酶的基因克隆和功能鉴定第29-58页
    1 前言第29页
    2 实验材料及仪器设备第29-34页
        2.1 植物材料第29页
        2.2 质粒与菌种第29-30页
        2.3 主要试剂和试剂盒第30-31页
        2.4 主要实验室仪器第31-32页
        2.5 主要溶液和培养基第32-33页
        2.6 引物序列第33-34页
    3 实验方法第34-45页
        3.1 序列分析第34页
        3.2 植物RNA的提取第34-35页
        3.3 基因克隆第35-37页
        3.4 原核表达载体的构建第37-39页
        3.5 蛋白表达第39-40页
        3.6 体外酶活功能的测定第40-42页
        3.7 基因的亚细胞定位第42-44页
        3.8 植物细胞壁成分的提取第44-45页
    4 实验结果与分析第45-57页
        4.1 目的基因的序列分析和克隆第45-48页
        4.2 基因序列比对和进化树分析第48-50页
        4.3 体外酶活结果分析第50-55页
        4.4 烟草亚细胞定位第55-56页
        4.5 植物细胞壁成分分析第56-57页
    5 总结第57-58页
第三章 苔类植物中黄酮合成酶催化机制研究第58-82页
    1 前言第58页
    2 实验材料第58-63页
        2.1 菌株与载体质粒第58-59页
        2.2 酶与试剂第59页
        2.3 培养基和溶液第59页
        2.4 实验仪器第59页
        2.5 引物序列第59-63页
    3 实验方法第63-68页
        3.1 目的基因的突变体的构建和表达第63-64页
        3.2 体外酶活功能鉴定第64-65页
        3.3 目的基因在拟南芥中的过表达第65-68页
        3.4 转基因拟南芥中黄酮类化合物含量分析第68页
    4 实验结果第68-80页
        4.1 序列分析及同源模拟第68-71页
        4.2 单突变体的设计第71页
        4.3 单突变体的构建和蛋白纯化第71-73页
        4.4 突变蛋白的酶活结果及分析第73-78页
        4.5 两个FNSI在拟南芥中的过表达第78-80页
        4.6 转基因拟南芥中黄酮类化合物含量分析第80页
    5 总结第80-82页
参考文献第82-91页
致谢第91-92页
攻读学位期间发表的学术论文第92-93页
学位论文评阅及答辩情况表第93页

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