| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 一 综述 | 第10-19页 |
| 1. goosecoid (gsc)基因研究进展 | 第10-12页 |
| 2. TALENs技术简介 | 第12-15页 |
| 3. 鱼鳔研究进展 | 第15-19页 |
| 3.1 鱼鳔形态机构及功能简介 | 第15-17页 |
| 3.2 鱼鳔充气原理及研究进展 | 第17-19页 |
| 二 实验材料及方法 | 第19-36页 |
| 1. 实验材料 | 第19-21页 |
| 1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.2 载体、试剂盒、工具酶 | 第19页 |
| 1.3 相关其它实验试剂及配方 | 第19-21页 |
| 2. TALENs敲除斑马鱼gsc | 第21-28页 |
| 2.1 靶点筛选 | 第22页 |
| 2.2 TALENs靶点质粒构建及mRNA合成 | 第22-25页 |
| 2.2.1 靶点质粒构建 | 第22-24页 |
| 2.2.2 质粒提取 | 第24页 |
| 2.2.3 mRNA合成及纯化 | 第24-25页 |
| 2.3 FO斑马鱼构建及靶点突变效率检测及突变体筛选 | 第25-28页 |
| 2.3.1 TALENs mRNA注射 | 第25-26页 |
| 2.3.2 基因组DNA提取及PCR检测靶点突变效率 | 第26-28页 |
| 2.3.3 突变体筛选 | 第28页 |
| 3. 鱼鳔标记基因原位杂交 | 第28-33页 |
| 3.1 标记基因探针合成 | 第28-32页 |
| 3.2 鱼鳔标记基因原位杂交 | 第32-33页 |
| 4. gsc突变体鱼鳔及咽部结构石蜡切片、HE染色 | 第33-35页 |
| 4.1 石蜡切片 | 第33-34页 |
| 4.2 HE染色 | 第34-35页 |
| 5. gsc突变体软骨阿尔新蓝染色 | 第35页 |
| 6. 野生型胚胎LiCl处理 | 第35-36页 |
| 三 实验结果 | 第36-44页 |
| 1. TALENs敲除斑马鱼gsc | 第36-37页 |
| 2. 突变体表型分析 | 第37-39页 |
| 2.1 突变体无明显背腹发育缺陷 | 第37页 |
| 2.2 突变体鱼鳔缺陷 | 第37-39页 |
| 3. 突变体鱼鳔结构完整 | 第39-40页 |
| 4. 突变体咽部结构正常 | 第40-42页 |
| 5. 突变体头部神经与鱼鳔充气联系 | 第42-44页 |
| 四 讨论与展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第50页 |
