摘要 | 第4-6页 |
Summary | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 前言 | 第12-13页 |
1.2 影响绵羊繁殖力的因素 | 第13-14页 |
1.2.1 遗传 | 第13页 |
1.2.2 饲喂环境及营养 | 第13页 |
1.2.3 年龄 | 第13页 |
1.2.4 温度 | 第13-14页 |
1.3 BMP-15基因研究概况与进展 | 第14-16页 |
1.3.1 BMP-15的生理效应 | 第14-15页 |
1.3.2 BMP-15基因的位点突变 | 第15-16页 |
1.4 遗传标记技术的发展 | 第16-20页 |
1.4.1 RFLP技术(RestrictionFragmentLengthPolymorphism) | 第17-18页 |
1.4.2 RAPD技术(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) | 第18-19页 |
1.4.3 SSR技术(SimpleSequenceRepeats) | 第19页 |
1.4.4 SSCP技术(Single-StrandConformationPolymorphism) | 第19-20页 |
1.4.5 SNP(Single-NucleotidePolymorphism) | 第20页 |
1.5 实时荧光定量PCR技术(real-timeQ-PCR) | 第20-22页 |
1.5.1 相对定量分析(RelativeQuantification,RQ) | 第21-22页 |
1.6 本研究绵羊品种简介 | 第22-24页 |
1.6.1 蒙古羊(Mongoliansheep) | 第22-23页 |
1.6.2 甘肃高山细毛羊(GansuAlpineFinewoolsheep) | 第23页 |
1.6.3 无角陶赛特羊(PollDorset) | 第23页 |
1.6.4 小尾寒羊(SmalltailHansheep) | 第23-24页 |
1.7 本试验的目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 绵羊BMP-15基因CDS区外显子Ⅰ多态性及其产羔数相关性分析 | 第25-35页 |
2.1 试验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 试验动物 | 第25页 |
2.1.2 试验试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 试验设备 | 第26页 |
2.1.4 溶液的配置 | 第26-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-31页 |
2.2.1 试验材料采集 | 第27页 |
2.2.2 DNA的提取 | 第27页 |
2.2.3 DNA检测 | 第27页 |
2.2.4 PCR引物设计 | 第27-28页 |
2.2.5 PCR反应体系与反应程序 | 第28-29页 |
2.2.6 PCR产物检测 | 第29页 |
2.2.7 扩增产物的电泳分析 | 第29-30页 |
2.2.8 图像分析 | 第30页 |
2.2.9 PCR产物回收 | 第30-31页 |
2.2.10 产物测序 | 第31页 |
2.3 软件使用及数据整理 | 第31页 |
2.4 试验结果 | 第31-33页 |
2.4.1 绵羊血液基因组的提取 | 第31页 |
2.4.2 BMP-15基因目的片段扩增 | 第31-32页 |
2.4.3 PCR-SSCP检测结果 | 第32-33页 |
2.4.4 测序 | 第33页 |
2.5 讨论 | 第33-34页 |
2.6 小结 | 第34-35页 |
第三章 绵羊BMP-15基因第二外显子的多态性及其与产羔数的相关性分析 | 第35-49页 |
3.1 试验材料 | 第35页 |
3.2 试验方法 | 第35-38页 |
3.2.1 试验材料的采集 | 第35页 |
3.2.2 绵羊基因组DNA的提取 | 第35页 |
3.2.3 绵羊血液DNA检测 | 第35页 |
3.2.4 引物设计 | 第35-36页 |
3.2.5 PCR反应体系和反应程序 | 第36页 |
3.2.6 扩增产物检测 | 第36-37页 |
3.2.7 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第37-38页 |
3.3 软件使用及数据整理 | 第38-41页 |
3.3.1 基因频率和基因型频频率 | 第38-39页 |
3.3.2 Hardy-Weinberg平衡检验 | 第39页 |
3.3.3 遗传多态性分析 | 第39-40页 |
3.3.4 最小二乘法计算绵羊产羔数 | 第40-41页 |
3.4 试验结果 | 第41-46页 |
3.4.1 绵羊血液DNA的提取 | 第41页 |
3.4.2 目的片段的PCR扩增 | 第41-42页 |
3.4.3 PCR-SSCP检测 | 第42页 |
3.4.4 DNA测序 | 第42-43页 |
3.4.5 基因型频率和基因频率 | 第43-44页 |
3.4.6 遗传多样性 | 第44-45页 |
3.4.7 不同基因型与绵羊产羔数的关联性分析 | 第45-46页 |
3.5 讨论 | 第46-47页 |
3.6 小结 | 第47-49页 |
第四章 绵羊BMP-15基因在不同产羔性状母羊组织中的表达量差异及分析 | 第49-61页 |
4.1 试验绵羊 | 第49页 |
4.1.1 主要试剂 | 第49页 |
4.1.2 主要仪器 | 第49页 |
4.2 试验方法 | 第49-52页 |
4.2.1 试验羊只组织样品RNA的提取 | 第49-50页 |
4.2.2 RT-PCR反应 | 第50-51页 |
4.2.3 引物设计 | 第51页 |
4.2.4 realtime-PCR试验 | 第51-52页 |
4.3 软件使用和数据处理 | 第52页 |
4.4 试验结果 | 第52-58页 |
4.4.1 RNA与cDNA的完整性 | 第52-54页 |
4.4.2 引物特异性检测 | 第54-55页 |
4.4.3 BMP-15基因在不同品种绵羊不同组织中的表达量 | 第55-58页 |
4.5 讨论 | 第58-60页 |
4.6 小结 | 第60-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
附录和附表 | 第68-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76-77页 |
导师简介 | 第77-78页 |