| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 猪2型链球菌病 | 第13-21页 |
| 1.1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.1.2 病原学 | 第14-15页 |
| 1.1.3 流行病学 | 第15页 |
| 1.1.4 临床症状及病理学变化 | 第15-16页 |
| 1.1.5 毒力(相关)因子的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.1.6 诊断 | 第18-19页 |
| 1.1.7 治疗和预防 | 第19-21页 |
| 1.2 马链球菌兽疫亚种(S.zooepidemicus)的研究概况 | 第21-25页 |
| 1.2.1 前言 | 第21页 |
| 1.2.2 病原特性 | 第21页 |
| 1.2.3 流行病学 | 第21-22页 |
| 1.2.4 致病因子 | 第22-24页 |
| 1.2.5 防制 | 第24-25页 |
| 第2章 猪2型链球菌SC-19中国流行株的特性研究 | 第25-44页 |
| 2.1 前言 | 第25-26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第26页 |
| 2.2.2 主要缓冲液 | 第26-27页 |
| 2.2.3 菌株 | 第27页 |
| 2.2.4 细菌学检查 | 第27页 |
| 2.2.5 生化试验 | 第27页 |
| 2.2.6 药敏试验 | 第27页 |
| 2.2.7 溶血试验 | 第27页 |
| 2.2.8 细菌基因型的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.9 活菌计数及攻毒菌液制备 | 第28-29页 |
| 2.2.10 动物实验 | 第29页 |
| 2.2.11 病理学研究 | 第29-30页 |
| 2.2.12 免疫组织化学研究 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-41页 |
| 2.3.1 细菌学检查 | 第31-32页 |
| 2.3.2 生化试验 | 第32页 |
| 2.3.3 药敏试验 | 第32-33页 |
| 2.3.4 溶血试验 | 第33页 |
| 2.3.5 SC19菌株基因型的PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.6 小鼠及家兔模型的研究 | 第34-36页 |
| 2.3.7 感染仔猪的临床及病理观察 | 第36-40页 |
| 2.3.8 感染仔猪的电镜观察 | 第40页 |
| 2.3.9 感染仔猪的免疫组化观察 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-44页 |
| 第3章 马链球菌兽疫亚种-猪2型链球菌基因工程疫苗的研究 | 第44-81页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 材料和方法 | 第44-60页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.2 主要缓冲液 | 第45-47页 |
| 3.2.3 菌株、质粒及培养条件 | 第47-49页 |
| 3.2.4 引物设计与合成 | 第49-50页 |
| 3.2.5 基因组的提取 | 第50-51页 |
| 3.2.6 PCR扩增 | 第51页 |
| 3.2.7 PCR产物回收 | 第51页 |
| 3.2.8 pET-28a(+)重组表达质粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.9 pET-28a(+)表达菌株的构建 | 第52页 |
| 3.2.10 蛋白诱导表达 | 第52页 |
| 3.2.11 蛋白纯化 | 第52页 |
| 3.2.12 Western Blot | 第52-54页 |
| 3.2.13 重组菌的构建 | 第54-57页 |
| 3.2.14 重组菌的生物学特性研究 | 第57页 |
| 3.2.15 实验动物 | 第57页 |
| 3.2.16 小鼠感染试验 | 第57页 |
| 3.2.17 小鼠免疫效力评价 | 第57页 |
| 3.2.18 小鼠抗体水平评价 | 第57-58页 |
| 3.2.19 小鼠抗体IgG亚类测定 | 第58页 |
| 3.2.20 免疫小鼠细胞免疫的检测 | 第58-59页 |
| 3.2.21 仔猪免疫效力评价 | 第59页 |
| 3.2.22 仔猪抗体水平评价 | 第59页 |
| 3.2.23 仔猪血清IFN-γ的定量检测(ELISA) | 第59-60页 |
| 3.2.24 统计分析 | 第60页 |
| 3.3 结果与分析 | 第60-78页 |
| 3.3.1 mrp、sao、HP0197的PCR扩增及pET-28a(+)重组质粒的酶切鉴定 | 第60-61页 |
| 3.3.2 重组蛋白的纯化及western blot鉴定 | 第61-62页 |
| 3.3.3 重组菌ST171-MRP,ST171-SAO,ST171-HP0197的构建及鉴定 | 第62-67页 |
| 3.3.4 重组菌生长曲线 | 第67-68页 |
| 3.3.5 小鼠LD_(50)及安全性的测定 | 第68页 |
| 3.3.6 小鼠的免疫效力试验 | 第68-70页 |
| 3.3.7 小鼠抗体水平评价 | 第70-71页 |
| 3.3.8 重组菌诱导小鼠抗体IgG亚类测定 | 第71页 |
| 3.3.9 重组菌免疫小鼠的IFN-γ的定量检测 | 第71-72页 |
| 3.3.10 重组菌小鼠免疫效力试验的病理变化 | 第72-73页 |
| 3.3.11 仔猪的免疫效力试验 | 第73-74页 |
| 3.3.12 仔猪抗体水平评价 | 第74-75页 |
| 3.3.13 免疫仔猪IFN-γ表达水平的检测 | 第75-76页 |
| 3.3.14 重组菌仔猪免疫效力试验的病理变化 | 第76-78页 |
| 3.4 讨论 | 第78-81页 |
| 第4章 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 附录 | 第99-101页 |
