摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表(Abbreviations) | 第8-10页 |
一 前言 | 第10-21页 |
1 柑橘抗逆研究的意义 | 第10页 |
2 多胺研究进展 | 第10-12页 |
2.1 多胺简介 | 第10页 |
2.2 多胺与胁迫 | 第10-11页 |
2.3 植物中多胺的生物合成 | 第11-12页 |
2.4 精氨酸脱羧酶的研究 | 第12页 |
3 启动子研究概述 | 第12-19页 |
3.1 植物启动子的一般特征 | 第12-13页 |
3.2 植物中与干旱相关的顺式作用元件及转录因子 | 第13-15页 |
3.3 启动子的类型 | 第15-16页 |
3.4 启动子克隆的常用方法 | 第16-18页 |
3.5 启动子强弱和功能的定性,定量检测 | 第18-19页 |
3.6 启动子预测网站 | 第19页 |
4 本研究的意义 | 第19-21页 |
二 材料与方法 | 第21-37页 |
1 材料与试剂 | 第21页 |
1.1 材料 | 第21页 |
1.2 试剂 | 第21页 |
1.3 主要仪器设备 | 第21页 |
2 实验方法 | 第21-37页 |
2.1 基因组DNA的提取及检测 | 第21-22页 |
2.2 PtADC编码区DNA克隆 | 第22-23页 |
2.3 PCR产物的检测与回收 | 第23-24页 |
2.4 目的片断与载体的连接 | 第24页 |
2.5 大肠杆菌的转化及阳性克隆的检测 | 第24-27页 |
2.6 启动子的扩增 | 第27-31页 |
2.7 启动子序列的验证 | 第31页 |
2.8 生物信息学分析 | 第31页 |
2.9 表达载体构建 | 第31-33页 |
2.10 重组农杆菌工程菌株的制备 | 第33-35页 |
2.11 烟草叶片转化及植株再生 | 第35-37页 |
三 结果与分析 | 第37-46页 |
1 PtADC编码区DNA的克隆 | 第37页 |
2 PtADC基因的启动子克隆 | 第37-39页 |
3 启动子序列的验证 | 第39-40页 |
3.1 PCR验证 | 第39页 |
3.2 生物信息学验证 | 第39-40页 |
4 生物信息学分析 | 第40-43页 |
5 启动子表达载体构建 | 第43-45页 |
6 转基因烟草的PCR鉴定 | 第45-46页 |
四 讨论 | 第46-49页 |
1 PtADC基因启动子的克隆 | 第46页 |
2 PtADC基因启动子的生物信息学分析 | 第46-47页 |
3 表达载体构建的讨论 | 第47页 |
4 启动子瞬时表达的讨论 | 第47-48页 |
5 农杆菌介导的叶盘法转化烟草再生植株的讨论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
图版和说明(Plates and plate explanations) | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |