| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 背景 | 第11页 |
| 1.2 沙门氏菌及其危害性 | 第11-13页 |
| 1.3 沙门氏菌的分离和鉴定方法 | 第13-15页 |
| 1.3.1 传统分离鉴定方法 | 第13页 |
| 1.3.2 快速检测方法 | 第13-15页 |
| 1.4 荧光定量PCR 原理及应用 | 第15-18页 |
| 1.5 沙门氏菌分子检测靶点 | 第18-21页 |
| 1.5.1 现有靶点 | 第18-20页 |
| 1.5.2 用生物信息学方法发掘新靶点 | 第20-21页 |
| 1.6 扩增内标在PCR 检测中的应用 | 第21-23页 |
| 2 沙门氏菌特异性靶点的筛选和普通PCR 检测方法评价 | 第23-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-35页 |
| 2.1.1 菌种 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂与培养基 | 第24-27页 |
| 2.1.3 DNA 提取及纯度分析 | 第27-28页 |
| 2.1.4 检测靶点的发掘及引物设计 | 第28-31页 |
| 2.1.5 PCR 反应及电泳检测 | 第31-32页 |
| 2.1.6 特异性评价 | 第32页 |
| 2.1.7 灵敏度评价 | 第32-33页 |
| 2.1.8 人工污染牛乳样品的检测 | 第33-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.2.1 特异性 | 第35页 |
| 2.2.2 灵敏度 | 第35-38页 |
| 2.2.3 人工污染样品的检测 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-43页 |
| 3 沙门氏菌荧光定量PCR 检测方法的建立与优化 | 第43-70页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-58页 |
| 3.1.1 菌种 | 第43-47页 |
| 3.1.2 培养基与试剂 | 第47-48页 |
| 3.1.3 DNA 提取及纯度分析 | 第48页 |
| 3.1.4 引物与目标探针 | 第48-50页 |
| 3.1.5 扩增内标的构建 | 第50-51页 |
| 3.1.6 PCR 体系优化 | 第51-53页 |
| 3.1.7 特异性验证 | 第53-54页 |
| 3.1.8 灵敏度评价 | 第54页 |
| 3.1.9 自然背景菌群干扰下的检测限 | 第54-55页 |
| 3.1.10 食品样品人工污染实验 | 第55-58页 |
| 3.2 结果与分析 | 第58-66页 |
| 3.2.1 引物的初步筛选 | 第58页 |
| 3.2.2 Real-time PCR 体系的优化 | 第58-60页 |
| 3.2.3 特异性验证 | 第60-61页 |
| 3.2.4 检测灵敏度评价 | 第61-62页 |
| 3.2.5 自然背景菌群干扰下的检测限 | 第62-63页 |
| 3.2.6 食品样品人工污染实验 | 第63-66页 |
| 3.3 讨论 | 第66-70页 |
| 4 总结与展望 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-83页 |