摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第1章 绪论 | 第13-26页 |
1.1 光化学生物传感器的工作原理 | 第13-14页 |
1.2 光化学生物传感技术的研究进展 | 第14-24页 |
1.2.1 基于吸收的光化学传感技术 | 第14-17页 |
1.2.2 基于荧光的光化学传感技术 | 第17-21页 |
1.2.4 表面等离子共振(SPR)技术 | 第21-22页 |
1.2.5 表面增强拉曼散射(SERS)技术 | 第22页 |
1.2.6 化学发光技术 | 第22-24页 |
1.3 本论文的工作内容 | 第24-26页 |
第2章 基于内切酶抑制分析的 DNA/Fok I 传感方法用于小分子-蛋白相互作用检测 | 第26-48页 |
2.1 前言 | 第26页 |
2.2 实验部分 | 第26-29页 |
2.2.1 试剂和材料 | 第26-28页 |
2.2.2 仪器 | 第28页 |
2.2.3 叶酸与氨基修饰寡核苷酸的交联与纯化 | 第28页 |
2.2.4 DNA/Fok I 传感器的构建 | 第28页 |
2.2.5 DNA/Fok I 传感器检测小分子-蛋白相互作用 | 第28-29页 |
2.2.6 毛细管电泳实验 | 第29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-47页 |
2.3.1 检测小分子-蛋白相互作用的 DNA/Fok I 传感器的设计 | 第29-31页 |
2.3.2 DNA/Fok I 传感器中 DNA 异源双链结构优化 | 第31-32页 |
2.3.3 DNA/Fok I 传感器上小分子标记位点的优化 | 第32-33页 |
2.3.4 Fok I 循环剪切探针 3 的标征 | 第33-34页 |
2.3.5 DNA/Fok I 传感器检测小分子-蛋白相互作用的响应特性 | 第34-40页 |
2.3.6 DNA/Fok I 传感器定量检测小分子结合蛋白 | 第40-45页 |
2.3.7 DNA/Fok I 传感器定量检测竞争小分子结合物 | 第45-47页 |
2.4 小结 | 第47-48页 |
第3章 基于切刻酶链置换放大结合化学发光用于小分子结合蛋白的灵敏检测 | 第48-58页 |
3.1 前言 | 第48页 |
3.2 实验部分 | 第48-50页 |
3.2.1 试剂和材料 | 第48-49页 |
3.2.2 仪器 | 第49页 |
3.2.3 叶酸的标记与纯化 | 第49页 |
3.2.4 均相化学发光生物传感器的构建 | 第49-50页 |
3.2.5 均相化学发光检测 | 第50页 |
3.2.6 毛细管电泳实验 | 第50页 |
3.3 结果与讨论 | 第50-57页 |
3.3.1 化学发光生物传感器的设计原理 | 第50-51页 |
3.3.2 小分子标记位点的优化 | 第51-53页 |
3.3.3 基于链置换放大的化学发光传感器的工作原理表征 | 第53-54页 |
3.3.4 切刻酶链置换放大的化学发光传感器检测叶酸受体的响应特性 | 第54-56页 |
3.3.5 基于切刻酶链置换放大的化学发光传感器用于定量检测叶酸受体 | 第56-57页 |
3.4 小结 | 第57-58页 |
第4章 基于纳米金免疫组装用于组蛋白修饰酶活性的可视化检测 | 第58-73页 |
4.1 前言 | 第58-59页 |
4.2 实验部分 | 第59-61页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第59-60页 |
4.2.2 多肽修饰纳米金的制备 | 第60页 |
4.2.3 组蛋白甲基化转移酶活性分析 | 第60-61页 |
4.2.4 组蛋白乙酰化转移酶活性分析 | 第61页 |
4.2.5 吸收光谱与动态光散射检测 | 第61页 |
4.3 结果与讨论 | 第61-72页 |
4.3.1 免疫组装用于组蛋白修饰酶活性检测的原理 | 第61-62页 |
4.3.2 免疫组装比色方法用于 SET 7/9 组蛋白甲基化转移酶活性检测 | 第62-64页 |
4.3.3 SET 7/9 组蛋白甲基化转移酶活性检测的动态光散射表征 | 第64-65页 |
4.3.4 底物肽与控制肽混合组装比例的优化 | 第65-66页 |
4.3.5 SET 7/9 组蛋白甲基化转移酶活性的定量检测 | 第66-68页 |
4.3.6 组蛋白甲基化转移酶抑制剂的筛选 | 第68-70页 |
4.3.7 免疫组装的方法用于 PCAF 组蛋白乙酰化转移酶的活性检 | 第70-72页 |
4.4 小结 | 第72-73页 |
第5章 基于多肽介导纳米金组装和表面增强拉曼散射的传感方法用于胞外蛋白酶活性的灵敏检测 | 第73-95页 |
5.1 前言 | 第73-74页 |
5.2 实验部分 | 第74-76页 |
5.2.1 试剂和仪器 | 第74页 |
5.2.2 拉曼染料和多肽探针修饰的纳米金的制备 | 第74-75页 |
5.2.3 共振耦合的表面增强拉曼光谱法用于弹性蛋白酶活性的检测 | 第75页 |
5.2.4 共振耦合表面增强拉曼光谱法用于 MMP-7 活性的检测 | 第75-76页 |
5.2.5 吸收光谱与动态光散射检测 | 第76页 |
5.2.6 透射电子显微镜分析 | 第76页 |
5.3 结果与讨论 | 第76-94页 |
5.3.1 酶控制多肽介导纳米金组装的等离子耦合表面增强拉曼法检测胞外蛋白酶活性的原理 | 第76-77页 |
5.3.2 等离子耦合表面增强拉曼光谱法检测弹性蛋白酶活性 | 第77-80页 |
5.3.3 等离子耦合表面增强拉曼光谱法检测弹性蛋白酶活性的透射电镜表征 | 第80-81页 |
5.3.4 等离子耦合表面增强拉曼光谱法检测弹性蛋白酶活性的透射电镜和动态光散射表征 | 第81-84页 |
5.3.5 等离子耦合表面增强拉曼光谱法定量检测弹性蛋白酶活性 | 第84-85页 |
5.3.6 等离子耦合表面增强拉曼光谱法定量检测弹性蛋白酶抑制剂 | 第85-88页 |
5.3.7 等离子耦合表面增强拉曼光谱法检测 MMP-7 活性 | 第88-90页 |
5.3.8 等离子耦合的表面增强拉曼光谱法定量检测 MMP-7 活性 | 第90-92页 |
5.3.9 等离子耦合表面增强拉曼光谱法同时检测检测弹性蛋白酶和 MMP-7的活性 | 第92-94页 |
5.4 小结 | 第94-95页 |
结论 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-114页 |
附录 A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第114-115页 |
致谢 | 第115页 |