| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第11-29页 |
| 1.1 氯酚 | 第11-14页 |
| 1.1.1 氯酚的基本性质 | 第11页 |
| 1.1.2 氯酚的生物富集 | 第11-12页 |
| 1.1.3 氯酚的代谢 | 第12-13页 |
| 1.1.4 氯酸对动物体的损伤 | 第13-14页 |
| 1.1.5 氯酚对人体的损伤 | 第14页 |
| 1.2 2,4-二氯苯酚 | 第14-17页 |
| 1.2.1 2,4-二氯苯酚的基本信息 | 第15-16页 |
| 1.2.2 2,4-二氯苯酚的危害 | 第16-17页 |
| 1.3 草鱼 | 第17-18页 |
| 1.4 细胞凋亡 | 第18-22页 |
| 1.4.1 细胞凋亡的简介 | 第18-19页 |
| 1.4.2 线粒体途径介导的细胞凋亡 | 第19-21页 |
| 1.4.3 死亡受体途径介导的细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.4.4 穿孔素/颗粒酶途径 | 第21-22页 |
| 1.5 细胞凋亡常用的检测方法 | 第22-25页 |
| 1.5.1 细胞形态学的改变 | 第22-23页 |
| 1.5.2 DNA的降解 | 第23页 |
| 1.5.3 对caspases及底物、调节因子、抑制因子的检测 | 第23-24页 |
| 1.5.4 细胞膜的改变 | 第24页 |
| 1.5.5 对包埋标本的凋亡检测 | 第24页 |
| 1.5.6 与线粒体有关的检测 | 第24-25页 |
| 1.6 凋亡抑制蛋白 | 第25-26页 |
| 1.7 活性氧 | 第26-27页 |
| 1.8 研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第29-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2.4 主要溶液配制 | 第31-32页 |
| 2.5 实验技术路线 | 第32-33页 |
| 2.6 实验方法 | 第33-40页 |
| 2.6.1 草鱼原代肝脏细胞的分离 | 第33-34页 |
| 2.6.2. 细胞活力实验(MTT法) | 第34页 |
| 2.6.3 Hoechst 33258染色检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 2.6.4 AV/PI双染检测细胞凋亡 | 第35页 |
| 2.6.5 线粒体膜电位的检测 | 第35-36页 |
| 2.6.6 活性氧的检测 | 第36页 |
| 2.6.7 凋亡相关基因mRNA表达的影响 | 第36-40页 |
| 2.7 草鱼细胞内凋亡抑制蛋白多克隆抗体的制备和检测 | 第40-42页 |
| 2.7.1 引物设计及扩增片段的选择 | 第40页 |
| 2.7.2 草鱼肝脏总RNA提取 | 第40-41页 |
| 2.7.3 RT-PCR及IAP片段的克隆 | 第41页 |
| 2.7.4 重组表达载体的构建 | 第41页 |
| 2.7.5 IAP融合蛋白的诱导与表达 | 第41页 |
| 2.7.6 IAP融合蛋白的纯化与定量 | 第41-42页 |
| 2.7.7 多克隆抗血清的制备及纯化 | 第42页 |
| 2.7.8 免疫印迹 | 第42页 |
| 2.8 IAP蛋白表达的影响 | 第42-45页 |
| 2.8.1 蛋白的提取 | 第42-43页 |
| 2.8.2 蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| 2.8.3 蛋白的变性 | 第43页 |
| 2.8.4 免疫印迹 | 第43-45页 |
| 2.9 数据分析与作图 | 第45-46页 |
| 第三章 实验结果 | 第46-57页 |
| 3.1 2,4-DCP对草鱼原代肝细胞细胞活力的影响 | 第46页 |
| 3.2 2,4-DCP对草鱼原代肝细胞凋亡的影响 | 第46-48页 |
| 3.2.1 细胞凋亡的形态学检测 | 第46-47页 |
| 3.2.2 细胞凋亡率的检测 | 第47-48页 |
| 3.3 2,4-DCP对线粒体膜电位的影响 | 第48-49页 |
| 3.4 2,4-DCP对凋亡相关基因的影响 | 第49-50页 |
| 3.5 2,4-DCP对ROS的影响 | 第50-51页 |
| 3.6 2,4-DCP对TNF-α mRAN表达的影响 | 第51页 |
| 3.7 2,4-DCP对草鱼肝细胞IAP mRAN和蛋白表达的影响 | 第51-57页 |
| 3.7.1 2,4-DCP对草鱼肝细胞IAP mRAN表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.7.2 IAP多克隆抗体的制备 | 第52-55页 |
| 3.7.3 2,4-DCP对IAP的影响 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-62页 |
| 4.1 2,4-DCP导致草鱼肝脏细胞活力下降和细胞凋亡 | 第57-58页 |
| 4.2 2,4-DCP导致草鱼肝脏细胞凋亡与线粒体有关 | 第58-59页 |
| 4.3 2,4-DCP导致草鱼肝脏细胞凋亡由ROS介导 | 第59-60页 |
| 4.4 2,4-DCP导致草鱼肝脏细胞凋亡与死亡受体途径相关 | 第60-61页 |
| 4.5 2,4-DCP对草鱼肝脏细胞IAP的影响 | 第61-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-63页 |
| 5.1 主要结论 | 第62页 |
| 5.2 研究展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 缩略词表 | 第74-75页 |
| 在读期间研究成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
