摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-31页 |
1 酿酒酵母 | 第13-15页 |
2 酿酒酵母性信息素信号传导途径 | 第15-23页 |
2.1 酿酒酵母性信息素信号传导途径概述 | 第15-17页 |
2.2 交配型a酵母性信息素信号传导途径重要组分简介 | 第17-20页 |
2.3 酿酒酵母性信息素信号传导途径的调控 | 第20-21页 |
2.4 酿酒酵母性信息素信号传导途径的特异性 | 第21-23页 |
3 外源蛋白与酿酒酵母性信息素信号传导途径的偶联 | 第23-27页 |
3.1 酿酒酵母是理想的外源GPCR表达体系 | 第23-24页 |
3.2 酿酒酵母表达外源GPCR研究的应用 | 第24页 |
3.3 酿酒酵母表达外源GPCR的策略 | 第24-27页 |
4 酿酒酵母基因敲除 | 第27-30页 |
4.1 构建敲除盒 | 第27-28页 |
4.2 酿酒酵母的筛选标记 | 第28-29页 |
4.3 酿酒酵母转化法 | 第29-30页 |
5 研究内容及目的意义 | 第30-31页 |
5.1 研究内容 | 第30页 |
5.2 研究目的意义 | 第30-31页 |
第二章 酵母菌BY4741的验证及其生长特性分析 | 第31-42页 |
1 材料与方法 | 第31-35页 |
1.1 材料 | 第31-32页 |
1.2 方法 | 第32-35页 |
2 结果与分析 | 第35-40页 |
2.1 α因子对BY4741生长的影响 | 第35-38页 |
2.2 GFP报告基因验证 | 第38-40页 |
3 小结与讨论 | 第40-42页 |
3.1 小结 | 第40-41页 |
3.2 讨论 | 第41-42页 |
第三章 BY4741菌株Far1基因的敲除 | 第42-53页 |
1 材料与方法 | 第42-47页 |
1.1 材料 | 第42-43页 |
1.2 方法 | 第43-47页 |
2 结果与分析 | 第47-50页 |
2.1 Far1基因敲除盒的构建 | 第47-48页 |
2.2 Far1基因敲除子的验证 | 第48-50页 |
3 小结与讨论 | 第50-53页 |
3.1 小结 | 第50-51页 |
3.2 讨论 | 第51-53页 |
第四章 Sst2单敲除和Sst2/Far1双敲除菌株的构建 | 第53-68页 |
1 材料与方法 | 第53-60页 |
1.1 材料 | 第53-54页 |
1.2 方法 | 第54-60页 |
2 结果与分析 | 第60-67页 |
2.1 潮霉素筛选标记的改造 | 第60-62页 |
2.2 Sst2基因敲除盒的构建 | 第62-63页 |
2.3 Sst2基因单敲除和双敲除菌株的验证 | 第63-67页 |
3 小结与讨论 | 第67-68页 |
3.1 小结 | 第67页 |
3.2 讨论 | 第67-68页 |
第五章 Ste2单敲除和Ste2/Sst2双敲除菌株的构建 | 第68-84页 |
1 材料与方法 | 第69-75页 |
1.1 材料 | 第69-70页 |
1.2 方法 | 第70-75页 |
2 结果与分析 | 第75-82页 |
2.1 Leu筛选标记的改造 | 第75-76页 |
2.2 RFP诱导表达盒的构建 | 第76-77页 |
2.3 Ste2基因敲除盒的构建 | 第77-78页 |
2.4 Ste2基因敲除子的验证 | 第78-82页 |
3 小结与讨论 | 第82-84页 |
3.1 小结 | 第82页 |
3.2 讨论 | 第82-84页 |
第六章 结论与展望 | 第84-85页 |
1 结论 | 第84页 |
2 展望 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
附录 | 第92-94页 |
附录1 G418抗性验证实验结果 | 第92-93页 |
附录2 Hyg抗性验证实验结果 | 第93-94页 |
附录3 Leu筛选标记验证实验结果 | 第94页 |