| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 vasa 基因研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1 vasa 基因简介 | 第12-13页 |
| 1.2 vasa 基因功能研究 | 第13-16页 |
| 1.3 vasa 基因的表达调控 | 第16-17页 |
| 2 鱼类生殖细胞的研究概况 | 第17-22页 |
| 2.1 鱼类原始生殖细胞的基本特征 | 第17页 |
| 2.2 鱼类原始生殖细胞的起源 | 第17-19页 |
| 2.3 鱼类原始生殖细胞的迁移 | 第19-20页 |
| 2.4 鱼类原始生殖细胞的可视化 | 第20-21页 |
| 2.5 鱼类原始生殖细胞的移植 | 第21-22页 |
| 3 本研究的意义 | 第22-24页 |
| 第二章 牙鲆 vasa 基因的克隆和序列特征分析 | 第24-45页 |
| 1 材料和方法 | 第24-35页 |
| 1.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第25页 |
| 1.2 实验引物 | 第25-26页 |
| 1.3 实验方法 | 第26-35页 |
| 1.3.1 总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| 1.3.2 RNA 纯化及检测 | 第27-28页 |
| 1.3.3 反转录 cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
| 1.3.4 目的片段的 PCR 扩增与克隆测序 | 第29-30页 |
| 1.3.5 cDNA 全长序列的获得 | 第30-31页 |
| 1.3.6 牙鲆基因组 DNA 的提取 | 第31-32页 |
| 1.3.7 基因组 DNA 序列的克隆 | 第32-34页 |
| 1.3.8 序列及系统进化分析 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-43页 |
| 2.1 基因全长 cDNA 的克隆 | 第35-37页 |
| 2.2 核苷酸序列及氨基酸序列特征 | 第37页 |
| 2.3 基因组 DNA 序列的克隆和分析 | 第37-41页 |
| 2.4 多序列比对和系统进化分析 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 牙鲆 vasa 基因的表达分析 | 第45-51页 |
| 1 材料与方法 | 第45-48页 |
| 1.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第45页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第45页 |
| 1.1.3 组织表达分析的取材 | 第45页 |
| 1.1.4 早期发育时期表达分析的取材 | 第45-46页 |
| 1.2 实验引物 | 第46页 |
| 1.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 1.3.1 总 RNA 提取、纯化以及转录 | 第46页 |
| 1.3.2 荧光定量 PCR | 第46-47页 |
| 1.3.3 数据处理 | 第47-48页 |
| 2 结果 | 第48-49页 |
| 2.1 组织表达分析 | 第48-49页 |
| 2.2 早期胚胎发育时期表达分析 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 牙鲆 vasa 基因不同异构体的表达分析 | 第51-60页 |
| 1 材料和方法 | 第51-53页 |
| 1.1 实验材料 | 第51页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第51页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第51页 |
| 1.2 实验引物 | 第51-52页 |
| 1.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 1.3.1 总 RNA 提取、纯化以及转录 | 第52页 |
| 1.3.2 不同转录本的克隆 | 第52页 |
| 1.3.3 异构体的序列分析 | 第52页 |
| 1.3.4 异构体的表达分析 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-58页 |
| 2.1 牙鲆 vasa 转录本的克隆 | 第53-55页 |
| 2.2 牙鲆 vasa 不同异构体的序列分析 | 第55-56页 |
| 2.3 牙鲆 vasa 异构体的表达分析 | 第56-58页 |
| 2.3.1 不同异构体性腺表达分析 | 第56页 |
| 2.3.2 不同异构体早期胚胎发育时期表达分析 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 牙鲆 Po-vasa 启动子调控的 GFP 报告载体构建 | 第60-70页 |
| 1 材料和方法 | 第60-65页 |
| 1.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 1.2 实验引物 | 第61页 |
| 1.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 1.3.1 vasa 基因 5 端序列分析 | 第61页 |
| 1.3.2 载体构建所需片段的准备 | 第61-63页 |
| 1.3.3 pvasa-EGFP 报告载体构建 | 第63-64页 |
| 1.3.4 pvasa-EGFP 报告载体 PCR 检验 | 第64-65页 |
| 2 结果 | 第65-67页 |
| 2.1 启动子区域序列的生物信息学分析 | 第65-66页 |
| 2.2 载体构建策略 | 第66页 |
| 2.3 报告载体的结构 | 第66页 |
| 2.4 报告载体的检验 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79-80页 |