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与辣(甜)椒抗根结线虫Me1基因紧密连锁的EST-SSR分子标记的开发

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略词第8-13页
1.引言第13-25页
   ·辣椒根结线虫病研究现状第13-15页
     ·根结线虫及其危害第13-14页
     ·致病机理第14页
     ·防治方法第14-15页
       ·化学防治第14页
       ·物理防治第14-15页
       ·农业防治第15页
       ·生物防治第15页
   ·遗传标记技术的发展第15-20页
     ·遗传标记概述第15-16页
     ·DNA分子标记的发展第16-18页
       ·基于DNA-DNA杂交的DNA标记第16-17页
       ·基于PCR技术的DNA标记第17页
       ·基于限制性酶切和PCR的DNA标记第17页
       ·基于单个核苷酸多态性的DNA标记第17-18页
     ·表达序列标签(EST)及EST-SSR标记的研究进展第18-19页
       ·表达序列标签(EST)第18页
       ·EST-SSR标记第18-19页
     ·筛选分子标记的方法第19-20页
   ·分子标记在辣(甜)椒遗传育种上的应用第20-22页
     ·资源分类及遗传多样性研究第20页
     ·遗传图谱的构建第20页
     ·基因定位第20-21页
     ·品种纯度鉴定第21页
     ·辅助育种第21页
     ·展望第21-22页
   ·辣(甜)椒根结线虫抗性育种研究进展第22-24页
     ·辣椒抗根结线虫基因第22-23页
     ·常规育种第23页
     ·分子辅助育种第23-24页
   ·本研究的目的和意义第24-25页
2 辣(甜)椒EST-SSR信息分析及标记开发第25-39页
   ·材料与试剂第25-26页
     ·实验材料第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要仪器第26页
   ·实验方法第26-29页
     ·材料制备及模板DNA提取第26页
     ·SSR-PCR扩增第26-27页
       ·PCR扩增体系优化第26-27页
       ·PCR扩增体系稳定性验证第27页
     ·扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测第27-28页
     ·银染程序第28-29页
     ·辣椒EST-SSR筛选第29页
       ·EST-SSR查找第29页
       ·EST-SSR引物设计与合成第29页
   ·结果与分析第29-36页
     ·模板DNA提取第29-30页
     ·SSR-PCR体系优化第30-31页
       ·PCR扩增体系优化第30-31页
       ·SSR-PCR扩增体系稳定性验证第31页
     ·辣椒EST-SSR位点信息第31-36页
       ·辣椒EST-SSR发生频率第31-32页
       ·EST-SSR重复基序类型及特点第32-33页
       ·EST-SSR基序重复次数及长度第33-34页
       ·EST-SSR引物的扩增效率第34-35页
       ·EST-SSR标记的多态性第35-36页
   ·讨论第36-39页
     ·PCR反应体系优化第36页
     ·辣椒EST-SSR特点第36-37页
     ·辣椒EST-SSR的可用性评价第37-38页
     ·所筛得的EST-SSR标记在遗传育种中的意义第38-39页
3 与抗根结线虫基因Me1紧密连锁的EST-SSR标记开发第39-62页
   ·材料与试剂第39-40页
     ·实验材料第39-40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器第40页
   ·实验方法第40-44页
     ·材料准备第40页
     ·病根采集第40-41页
     ·苗期人工接种根结线虫第41-43页
       ·根结线虫卵悬浮液制备第41页
       ·接种第41-42页
       ·抗性鉴定第42-43页
     ·模板DNA的提取第43页
     ·BSA分池第43页
     ·EST-SSR分析第43页
     ·SSR扩增反应第43页
     ·引物筛选第43-44页
     ·扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测及银染第44页
     ·带型统计第44页
     ·连锁分析第44页
   ·结果与分析第44-56页
     ·辣椒抗根结线虫接种鉴定结果第44-48页
     ·基因组DNA提取与检测第48-49页
     ·亲本与抗感池间多态性引物筛选第49-50页
     ·与辣椒抗根结线虫Me1基因连锁EST-SSR标记筛选第50-56页
       ·F_2群体中EST-SSR标记分布第50-54页
       ·Me1基因与EST-SSR标记的连锁分析第54-56页
   ·讨论第56-62页
     ·辣椒抗根结线虫基因遗传研究第56-57页
     ·F_2代分离群体用于分子检测的可靠性第57-58页
     ·辣椒抗RKN的抗性鉴定技术第58-59页
       ·苗期接种第58页
       ·苗期接种根结线虫的相关条件第58-59页
     ·BSA法的选择应用第59-60页
     ·EST-SSR标记的准确性分析第60-62页
4 结论第62-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-71页
附录第71-74页
附图第74-75页
攻读学位期间发表的学术论文第75页

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