| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-17页 |
| ·研究背景 | 第10页 |
| ·MT基因的研究现状 | 第10-15页 |
| ·MT的发现 | 第10页 |
| ·MT基因的定位与结构 | 第10-11页 |
| ·MT基因在不同组织中表达 | 第11页 |
| ·MT基因的调控机理 | 第11-12页 |
| ·MT的生物学功能 | 第12-15页 |
| ·本研究内容与目的意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-32页 |
| ·试验材料 | 第17-20页 |
| ·试验动物组织样品 | 第17页 |
| ·试验仪器设备 | 第17-18页 |
| ·试验载体 | 第18页 |
| ·试验菌株 | 第18页 |
| ·试验主要试剂 | 第18-19页 |
| ·试剂溶液的配制 | 第19-20页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因CDS区的克隆 | 第20-25页 |
| ·总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA的检测 | 第21页 |
| ·反转录反应cDNA第一条链合成 | 第21页 |
| ·PCR扩增 | 第21-23页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第23-25页 |
| ·生物信息学分析 | 第25-26页 |
| ·蛋白质分子量与等电点预测 | 第25页 |
| ·蛋白质糖基化位点预测 | 第25页 |
| ·蛋白质疏水性预测 | 第25页 |
| ·蛋白质磷酸化位点预测 | 第25页 |
| ·蛋白质二硫键预测 | 第25页 |
| ·蛋白质信号肽预测 | 第25页 |
| ·蛋白质跨膜区预测 | 第25页 |
| ·密码子偏倚性预测 | 第25-26页 |
| ·蛋白质二级结构预测 | 第26页 |
| ·兔MT2基因原核表达 | 第26-32页 |
| ·MT2基因酶切引物设计 | 第26页 |
| ·PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR反应产物纯化与回收 | 第27页 |
| ·MT2基因与T载体的连接 | 第27页 |
| ·MT2基因转化与鉴定 | 第27页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第29-30页 |
| ·蛋白质可溶性分析 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-52页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因CDS区克隆 | 第32-34页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因RNA提取 | 第32页 |
| ·MT1,MT2和MT3基因cDNA的RCR扩增效果 | 第32-33页 |
| ·MT1,MT2和MT3基因菌液PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·MT2基因原核表达 | 第34-37页 |
| ·双酶切 | 第34-35页 |
| ·兔MT2基因原核表达 | 第35-36页 |
| ·兔MT2基因原核表达条件的优化 | 第36-37页 |
| ·兔MT2蛋白的可溶·性分析 | 第37页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因CDS区序列分析 | 第37-42页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因核苷酸和氨基酸组成分析 | 第37-40页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因同源性分析 | 第40-42页 |
| ·兔MT1,MT2和MT2基因的生物信息学预测分析 | 第42-52页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因编码蛋白分子量与等电点的预测 | 第42页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3糖基化位点预测 | 第42-44页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3疏水性预测 | 第44-45页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3磷酸化位点预测 | 第45-46页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3二硫键预测 | 第46-47页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3信号肽预测 | 第47-48页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3跨膜结构分析 | 第48-49页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3基因CDS区密码子偏倚性分析 | 第49-50页 |
| ·兔MT1,MT2和MT3二级结构预测分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·引物设计 | 第52页 |
| ·克隆引物设计 | 第52页 |
| ·酶切引物设计 | 第52页 |
| ·MT1,MT2和MT3基因序列讨论 | 第52-53页 |
| ·MT1,MT2和MT3系统进化树讨论 | 第53页 |
| ·MT1,MT2和MT3结构与功能讨论 | 第53-54页 |
| ·MT1,MT2和MT3基因CDS区偏倚性讨论 | 第54页 |
| ·MT2基因表达讨论 | 第54-56页 |
| ·原核表达载体讨论 | 第54-55页 |
| ·MT2基因表达蛋白讨论 | 第55-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63页 |
