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禽传染性支气管炎病毒H120株全基因组序列测定分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-22页
   ·禽传染性支气管炎概述第9-10页
   ·禽传染性支气管炎病毒基因结构第10-14页
     ·结构蛋白第10-12页
     ·非编码区第12页
     ·复制-转录酶蛋白第12-14页
   ·全基因组序列测定分析的研究进展第14-19页
   ·IBV重组第19-20页
   ·禽传染性支气管炎病毒H120株研究第20-22页
2 试验材料第22页
   ·毒株第22页
   ·菌种、质粒第22页
   ·SPF鸡胚第22页
   ·试剂第22页
   ·主要仪器第22页
3 试验方法第22-35页
   ·病毒培养第22-23页
   ·病毒RNA提取第23页
   ·H120全基因组内部片段分段扩增第23-26页
     ·引物设计第23-24页
     ·cDNA合成第24-25页
     ·PCR反应第25页
     ·PCR产物回收和纯化第25-26页
   ·PCR产物克隆第26-28页
     ·感受态细胞的制备第26页
     ·PCR产物连接pMD19-T载体第26-27页
     ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞第27页
     ·阳性克隆筛选第27页
     ·阳性克隆序列测定第27-28页
   ·SMART RACE获取基因组末端片段第28-31页
     ·RACE引物设计第28页
     ·SMART RACE反应第28-30页
     ·PCR产物克隆第30-31页
   ·序列拼接和基因组全序列的生物信息学分析第31-35页
4 结果第35-49页
   ·全基因组分段扩增结果第35页
   ·序列测定和拼接第35页
   ·基因组结构分析第35-36页
   ·转录调控序列分析第36页
   ·序列同源性分析第36-37页
   ·系统进化树分析第37页
   ·重组推测第37-49页
5 讨论第49-52页
   ·全基因组分段扩增第49页
   ·生物信息学分析第49-50页
   ·基因重组研究第50-52页
参考文献第52-61页
致谢第61-62页
附录 禽传染性支气管炎病毒H120株基因组全序列第62-72页

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