致谢 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第15-33页 |
1.1 自噬 | 第15-25页 |
1.1.1 自噬的分类 | 第15-18页 |
1.1.2 自噬的作用机制 | 第18-19页 |
1.1.3 调控自噬的信号通路 | 第19-21页 |
1.1.4 自噬的研究方法 | 第21-23页 |
1.1.5 自噬与病毒的研究 | 第23-25页 |
1.2 烟粉虱 | 第25-27页 |
1.2.1 烟粉虱概述 | 第25-26页 |
1.2.2 烟粉虱的分布及危害方式 | 第26-27页 |
1.3 双生病毒 | 第27-29页 |
1.3.1 双生病毒概述 | 第27-28页 |
1.3.2 双生病毒的危害 | 第28-29页 |
1.4 烟粉虱-双生病毒互作 | 第29-31页 |
1.5 本研究的目的及内容 | 第31-33页 |
1.5.1 本研究目的 | 第31-32页 |
1.5.2 本研究内容 | 第32-33页 |
2 基本材料与方法 | 第33-54页 |
2.1 基本材料 | 第33-38页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第33页 |
2.1.2 供试植物 | 第33页 |
2.1.3 供试病毒 | 第33-34页 |
2.1.4 主要试剂 | 第34页 |
2.1.5 生态学研究相关的仪器与设备 | 第34-37页 |
2.1.6 分子生物学研究主要的仪器和设备 | 第37-38页 |
2.2 基本实验方法 | 第38-54页 |
2.2.1 烟粉虱隐种鉴定方法(RFLP-PCR) | 第38-39页 |
2.2.2 亚克隆方法 | 第39-42页 |
2.2.3 带毒植株的获取 | 第42页 |
2.2.4 植物基因组DNA提取方法(试剂盒法) | 第42-43页 |
2.2.5 植物基因组DNA提取方法(Tris碱法) | 第43页 |
2.2.6 qPCR反应 | 第43-44页 |
2.2.7 烟粉虱总RNA提取(SV Total RNA Isolation System kit) | 第44-45页 |
2.2.8 烟粉虱总RNA提取(Trizol法) | 第45页 |
2.2.9 烟粉虱cDNA的制备(PrimeScript RT TM reagent Kit) | 第45-46页 |
2.2.10 烟粉虱总蛋白的提取和蛋白浓度的测定 | 第46-47页 |
2.2.11 Western Blot | 第47-49页 |
2.2.12 免疫荧光技术(Immunofluorescence,免疫荧光) | 第49页 |
2.2.13 荧光原位杂交技术 | 第49-50页 |
2.2.14 透射电镜 | 第50-51页 |
2.2.15 RNA干扰烟粉虱基因 | 第51-53页 |
2.2.16 统计学方法 | 第53-54页 |
3 非选择性自噬途径在烟粉虱-双生病毒互作中的作用 | 第54-92页 |
3.1 实验材料 | 第55-56页 |
3.1.1 供试昆虫、病毒及植物 | 第55-56页 |
3.1.2 主要试剂 | 第56页 |
3.2 实验方法 | 第56-62页 |
3.2.1 TEM观察TYLCV感染烟粉虱诱导自噬体的发生 | 第56-57页 |
3.2.2 激光共聚焦观察TYLCV粒子和自噬小体在中肠中的定位 | 第57页 |
3.2.3 Western Blot检测P62和Beclin 1蛋白表达 | 第57页 |
3.2.4 寄主转移对MEAM1烟粉虱自噬的影响 | 第57-58页 |
3.2.5 寄主转移对MEAM1烟粉虱其他通路的影响 | 第58页 |
3.2.6 自噬抑制剂对TYLCV增殖的影响 | 第58-60页 |
3.2.7 干扰自噬相关基因对TYLCV增殖的影响 | 第60-61页 |
3.2.8 抑制和激活自噬对MEAM1烟粉虱传播病毒效率的影响 | 第61页 |
3.2.9 持续获TYLCV对MEAM1烟粉虱自噬影响 | 第61页 |
3.2.10 TYLCCNV侵染MEAM1烟粉虱对自噬影响 | 第61-62页 |
3.2.11 PalCuCNV侵染MEAM1烟粉虱对自噬影响 | 第62页 |
3.2.12 TYLCV侵染温室白粉虱对自噬影响 | 第62页 |
3.3 结果与分析 | 第62-88页 |
3.3.1 短暂获TYLCV对MEAM1烟粉虱自噬的影响 | 第62-82页 |
3.3.2 持续获TYLCV对MEAM1烟粉虱自噬的影响 | 第82-83页 |
3.3.3 TYLCCNV激活MEAM1烟粉虱自噬反应 | 第83-85页 |
3.3.4 PalCuCNV不能激活MEAM1烟粉虱自噬反应 | 第85-86页 |
3.3.5 TYLCV不能激活温室白粉虱自噬反应 | 第86-88页 |
3.4 讨论 | 第88-92页 |
4 选择性自噬途径在烟粉虱-双生病毒互作中的作用 | 第92-98页 |
4.1 材料和方法 | 第92-93页 |
4.1.1 供试昆虫、病毒及植物 | 第92页 |
4.1.2 主要试剂 | 第92-93页 |
4.2 实验方法 | 第93页 |
4.2.1 监测MEAM1烟粉虱中分子伴侣介导的自噬 | 第93页 |
4.2.2 监测MEAM1烟粉虱中线粒体介导的自噬 | 第93页 |
4.3 实验结果 | 第93-95页 |
4.3.1 TYLCV可能诱导MEAM1烟粉虱中分子伴侣介导的自噬 | 第93-94页 |
4.3.2 PalCuCNV不能诱导MEAM1烟粉虱中分子伴侣介导的自噬 | 第94-95页 |
4.3.3 TYLCV可能诱导MEAM1烟粉虱中线粒体介导的自噬 | 第95页 |
4.4 讨论 | 第95-98页 |
5 总讨论 | 第98-103页 |
5.1 本研究的特色与创新 | 第101页 |
5.2 值得继续研究的问题 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-111页 |