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MiR-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞的转移和侵袭作用及机制研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
第1章 文献综述第13-23页
    1.1 乳腺癌第13-16页
        1.1.1 乳腺癌发病第13页
        1.1.2 乳腺癌分型第13-14页
        1.1.3 乳腺癌的治疗现状第14页
        1.1.4 乳腺癌与miRNA第14-16页
    1.2 Micro RNA(miRNA)第16-21页
        1.2.1 miRNA简介第16页
        1.2.2 miRNA的命名原则第16-17页
        1.2.3 miRNA的作用机制第17页
        1.2.4 miRNA靶基因预测方法第17-18页
        1.2.5 miRNA功能筛选与分析第18-19页
        1.2.6 miRNA与肿瘤的关系第19-21页
        1.2.7 miR-199与肿瘤关系第21页
    1.3 PAK4与肿瘤的关系第21-23页
第2章 实验材料与方法第23-41页
    2.1 实验材料第23-32页
        2.1.1 实验仪器第23-24页
        2.1.2 实验试剂第24-26页
        2.1.3 试剂配制第26-32页
    2.2 实验方法第32-41页
        2.2.1 细胞培养(Cell culture)第32-33页
        2.2.2 脂质体转染(Transfection)第33页
        2.2.3 细胞RNA提取(RNA isolation)第33-34页
        2.2.4 实时荧光定量PCR检测(qRT-PCR)第34-35页
        2.2.5 蛋白免疫印迹法(Western Blot)第35-36页
        2.2.6 基因沉默质粒和真核基因表达载体的构建(Plasmid construction)第36-37页
        2.2.7 细胞增殖实验(MTT assay)第37页
        2.2.8 细胞划痕实验(Wound healing)第37页
        2.2.9 Transwell小室侵袭及迁移实验(Matrigel invasion and Migration)第37-38页
        2.2.10 流式细胞术检测细胞周期(Cell cycle assay)第38页
        2.2.11 荧光素酶活性检测(Luciferase reportor assay)第38-40页
        2.2.12 统计学分析(Statistical Analysis)第40-41页
第3章 实验结果第41-61页
    3.1 乳腺癌细胞系中miR-199a/b-3p的表达水平第41页
    3.2 乳腺癌细胞株MDA-MB-231转染miR-199a/b-3p mimics后miR-199a/b-3p的表达第41-42页
    3.3 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞生长增殖能力的影响第42-44页
    3.4 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞周期蛋白的影响第44-45页
    3.5 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞迁移能力的影响第45-47页
    3.6 上调MDA-MB-231细胞中miR-199a/b-3p的表达对细胞侵袭能力的影响第47-48页
    3.7 PAK4是miR-199a/b-3p的直接靶基因第48-50页
    3.8 在MDA-MB-231细胞中转染miR-199a/b-3p mimics对PAK4的m RNA水平和蛋白质表达影响第50-51页
    3.9 PAK4基因表达沉默后对乳腺癌细胞生长增殖的影响第51-54页
    3.10 PAK4基因表达沉默后对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响第54-57页
    3.11 PAK4过表达可以恢复miR-199a/b-3p对乳腺癌细胞的抑制功能第57-61页
第4章 讨论第61-65页
第5章 结论第65-67页
创新点第67-69页
参考文献第69-77页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第77-79页
致谢第79页

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