摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-32页 |
1.1 赤霉素研究进展 | 第13-20页 |
1.1.1 赤霉素简介 | 第13-14页 |
1.1.2 植物赤霉素的生物合成 | 第14-17页 |
1.1.3 植物赤霉素代谢和信号传导 | 第17-20页 |
1.2 MYB家族转录因子研究进展 | 第20-27页 |
1.2.1 转录因子的结构与分类 | 第20-21页 |
1.2.2 MYB转录因子分类 | 第21-22页 |
1.2.3 拟南芥MYB转录因子的生物学功能 | 第22-27页 |
1.3 植物抗渗透胁迫研究进展 | 第27-30页 |
1.3.1 渗透胁迫对植物生理和代谢的影响 | 第27页 |
1.3.2 植物抗渗透胁迫机理研究 | 第27-30页 |
1.4 本文研究思路与设想 | 第30-32页 |
第2章 AtMYB32对AtGA20ox1基因表达的调控 | 第32-52页 |
2.1 材料 | 第32-35页 |
2.1.1 植物材料 | 第32页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第32页 |
2.1.3 试剂和酶 | 第32-33页 |
2.1.4 试验仪器 | 第33页 |
2.1.5 实验溶液配制 | 第33-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-46页 |
2.2.1 植物总DNA提取 | 第35页 |
2.2.2 RNA的提取及逆转录cDNA | 第35-36页 |
2.2.3 普通PCR及实时荧光定量PCR(qPCR) | 第36-38页 |
2.2.4 重组质粒的构建 | 第38-42页 |
2.2.5 电击法农杆菌感受态细胞的制备与电击法转化 | 第42页 |
2.2.6 浸花蕾法转化拟南芥 | 第42-43页 |
2.2.7 拟南芥种子播种及植株培养 | 第43页 |
2.2.8 35::AtMYB32-MYC过表达植株与缺失突变体的筛选与鉴定 | 第43-45页 |
2.2.9 双荧光素酶试验 | 第45页 |
2.2.10 染色质免疫共沉淀实验 | 第45-46页 |
2.3 结果与分析 | 第46-50页 |
2.3.1 融合表达载体的构建 | 第47页 |
2.3.2 AtMYB32过表达植株的获得 | 第47-48页 |
2.3.3 缺失突变体atmyb32-1植株的获得 | 第48-49页 |
2.3.4 转录因子AtMYB32与AtGA20ox1启动子的结合作用分析 | 第49-50页 |
2.3.5 AtMYB32在AtGA20ox1启动子上的结合位点分析 | 第50页 |
2.4 本章小结 | 第50-52页 |
第3章 AtMYB32基因表达分析 | 第52-60页 |
3.1 材料 | 第52-53页 |
3.1.1 试验材料 | 第52页 |
3.1.2 试验仪器 | 第52页 |
3.1.3 试剂配制 | 第52-53页 |
3.2 实验方法 | 第53-54页 |
3.2.1 启动子序列与氨基酸序列的获取 | 第53页 |
3.2.2 转录调控区域元件分析 | 第53页 |
3.2.3 组织特异性表达模式分析 | 第53页 |
3.2.4 基本理化性质分析 | 第53页 |
3.2.5 细胞定位分析 | 第53页 |
3.2.6 信号肽及跨膜区分析 | 第53页 |
3.2.7 拟南芥幼苗的渗透胁迫处理 | 第53-54页 |
3.2.8 RNA的提取及逆转录cDNA | 第54页 |
3.2.9 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第54页 |
3.3 结果与分析 | 第54-59页 |
3.3.1 AtMYB32保守结构域与转录调控域分析 | 第54-55页 |
3.3.2 AtMYB32基本理化性质分析 | 第55-56页 |
3.3.3 AtMYB32编码蛋白的跨膜区、信号序列及亚细胞定位分析 | 第56-57页 |
3.3.4 AtMYB32基因组织特异性表达模式分析 | 第57-58页 |
3.3.5 AtMYB32基因表达对逆境胁迫的响应 | 第58-59页 |
3.4 本章小结 | 第59-60页 |
第4章 AtMYB32在植物渗透胁迫中的功能研究 | 第60-68页 |
4.1 材料 | 第60-61页 |
4.1.1 植物材料 | 第60页 |
4.1.2 试剂和酶 | 第60页 |
4.1.3 试验仪器 | 第60页 |
4.1.4 实验溶液配置 | 第60-61页 |
4.2 实验方法 | 第61-62页 |
4.2.1 种子的灭菌与播种 | 第61页 |
4.2.2 拟南芥幼苗的渗透胁迫处理 | 第61页 |
4.2.3 RNA的提取及逆转录cDNA | 第61页 |
4.2.4 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第61页 |
4.2.5 拟南芥的干旱处理 | 第61页 |
4.2.6 失水率试验 | 第61-62页 |
4.2.7 气孔开度的测定 | 第62页 |
4.3 结果与分析 | 第62-66页 |
4.3.1 AtMYB32过量表达或缺失对子叶变绿的影响 | 第62-63页 |
4.3.2 AtMYB32过量表达或缺失对根生长发育的影响 | 第63页 |
4.3.3 AtMYB32过量表达或缺失对植物叶片气孔开度的影响 | 第63-64页 |
4.3.4 AtMYB32过量表达或缺失对拟南芥抗干旱能力及失水率的影响 | 第64-65页 |
4.3.5 AtMYB32过量表达或缺失对渗透胁迫相关基因表达的影响 | 第65-66页 |
4.4 本章小结 | 第66-68页 |
结论与讨论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第81页 |